姜黃素對(duì)血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及其機(jī)制的研究.pdf

1、血管性癡呆(vasculardementia，VD)是腦血管病后產(chǎn)生的進(jìn)行性智能障礙綜合征，包括缺血性、出血性及腦缺血缺氧損害引起的癡呆，以記憶、認(rèn)知功能缺損為主。隨著癡呆的進(jìn)展，患者生活不能自理，將加重家庭和社會(huì)的負(fù)擔(dān)。近年來(lái)，VD的發(fā)病率呈明顯上升趨勢(shì)，在我國(guó)甚至超過(guò)早老性癡呆(Alzheimer;sDisease，AD)，占老年期癡呆病因的首位。因此，對(duì)該病的基礎(chǔ)和臨床研究具有重要的臨床意義和社會(huì)意義。 本實(shí)驗(yàn)采用的是雙側(cè)

2、頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎(2VO)的血管性癡呆模型，造模后，通過(guò)釋放氧自由基、NO、炎癥細(xì)胞因子而行使細(xì)胞毒效應(yīng)，引起細(xì)胞死亡，所以iNOS和自由基的過(guò)量產(chǎn)生可能是引起癡呆的重要機(jī)制。姜黃素是有效的抗炎、抗氧化的藥物，它可抑制NFκB介導(dǎo)的炎癥因子的轉(zhuǎn)錄以及iNOS和COX-2等的表達(dá)。 鑒于目前的研究基礎(chǔ)和現(xiàn)狀，本課題對(duì)目前尚未見(jiàn)報(bào)道的有關(guān)內(nèi)容，如姜黃素對(duì)血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響、姜黃素對(duì)血管性癡呆大鼠腦組織生化指標(biāo)的影響、姜黃

3、素對(duì)血管性癡呆大鼠iNOS表達(dá)的影響等方面進(jìn)行了研究。其目的在于探討姜黃素對(duì)血管性癡呆的作用及可能的作用機(jī)制，以尋求預(yù)防和治療血管性癡呆的途徑和方法。 目的：本實(shí)驗(yàn)旨在研究：一、姜黃素是否可以改善雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎(2VO)所致的血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的減退；二、如果存在這種作用，則是否通過(guò)調(diào)節(jié)iNOS及自由基而起作用。 材料與方法：(1)以雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎(2VO)來(lái)制備大鼠血管性癡呆模型。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分

4、為4組(假手術(shù)組、溶劑對(duì)照組、即時(shí)給藥組、間隔給藥組)，即時(shí)給藥組術(shù)后給予姜黃素100mg/kg，溶于0.2mlDMSO中，連續(xù)7天；間隔給藥組于術(shù)后的1、2、3、4、6、8周按50mg/kg(溶于0.1mlDMSO中)給予姜黃素，每周兩次；而溶劑對(duì)照組同時(shí)給予等量的DMSO。假手術(shù)組動(dòng)物手術(shù)操作同上，但不結(jié)扎。于術(shù)后4周和8周分別進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn)，來(lái)檢測(cè)各組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的差異，通過(guò)HE染色和NeuN標(biāo)記的免疫組化來(lái)觀(guān)察細(xì)胞數(shù)量和形態(tài)

5、的差異。(2)將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為3組(假手術(shù)組、溶劑對(duì)照組、即時(shí)給藥組)，造模和給藥方法同上，于術(shù)后2周按照試劑盒的方法檢測(cè)腦組織氧自由基(O2.-)和羥自由基(.OH)。(3)造模、給藥和分組方法同(2)，于術(shù)后3天取海馬，運(yùn)用Westernblot方法檢測(cè)iNOS蛋白表達(dá)情況。 結(jié)果：(1)水迷宮結(jié)果顯示，在兩個(gè)測(cè)試周期內(nèi)，各組動(dòng)物逃避潛伏期都大致呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，但VD大鼠的逃避潛伏期顯著大于假手術(shù)組(p＜0.01)，給予姜黃

6、素后，VD大鼠的逃避潛伏期顯著縮短(p＜0.01)，表明姜黃素改善了VD大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。HE染色和免疫組化證實(shí)姜黃素減少了2VO所導(dǎo)致的神經(jīng)細(xì)胞死亡。 (2)生化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，溶劑對(duì)照組大鼠與假手術(shù)組相比腦組織中的O2.-和OH的含量明顯升高(P＜O.05)。姜黃素給藥組與模型組相比腦組織中O2.-和OH的含量明顯降低(p＜0.05)。(3)Westernblot結(jié)果表明：假手術(shù)組和給藥組的海馬有少量的iNOS蛋白表達(dá)；模型