針刺改善血管性癡呆大鼠海馬相關(guān)認知損害的NADPH氧化酶機制研究.pdf

1、目的：從NADPH氧化酶角度探討針刺改善血管性癡呆大鼠海馬認知水平的抗氧化機制。
　　方法：(1) Wistar大鼠140只，隨機分為正常組、假手術(shù)組、模型組、針刺組和非穴組。選擇雙血管阻斷法復制血管性癡呆大鼠模型，針刺治療結(jié)束后，采用光澤精化學發(fā)光法檢測各組大鼠海馬NADPH氧化酶活性水平；采用Western blotting和PCR方法檢測海馬NADPH氧化酶質(zhì)膜亞基(gp91phox、p22phox)蛋白和基因表達水平；用W

2、estern blotting檢測各組大鼠海馬胞漿亞基(p47phox、p40phox、p67phox)蛋白表達情況；
　　(2)選用gp91phox基因敲除(KO)小鼠及C57BL6野生(WT)小鼠各20只，全部造模后，同種小鼠隨機分為2組，分別是WT模型組，WT針刺組，KO模型組，KO針刺組模型選擇單血管阻斷法復制血管性癡呆小鼠，針刺方法同上，治療結(jié)束后，用 Morris水迷宮檢測血管性癡呆小鼠的空間學習記憶能力。
　　

3、結(jié)果：(1) NADPH氧化酶活性評價：與正常組相比，模型組NADPH氧化酶活性明顯升高，針刺后海馬NADPH氧化酶活性明顯降低(P<0.05)；(2) NADPH氧化酶質(zhì)膜亞基蛋白表達水平：與正常組相比，模型組海馬質(zhì)膜亞基總蛋白和膜蛋白表達水平顯著升高(P<0.05)，針刺后海馬質(zhì)膜亞基蛋白表達水平顯著下降(P<0.05)；(3) NADPH氧化酶質(zhì)膜亞基(gp91phox、p22phox)基因表達水平：各組間質(zhì)膜亞基基因表達水平的比

4、較未見顯著差異(P>0.05)；(4) NADPH氧化酶胞漿亞基(p40phox、p47phox、p67phox)蛋白表達水平評價：與正常組相比，模型組海馬p40phox和p47phox總蛋白表達水平顯著升高(P<0.05)，針刺后海馬總蛋白表達水平顯著下降(P<0.05)；但各組間 p67phox蛋白表達水平的比較未見顯著差異(P>0.05)；(5)空間學習記憶能力評價：與WT模型組相比，WT針刺組逃避潛伏期和游泳距離顯著縮短(P<0

5、.05)；與WT模型組相比，KO模型組逃避潛伏期和游泳距離顯著延長(P<0.05)。與KO模型組相比，KO針刺組逃避潛伏期和游泳距離無顯著性變化(P>0.05)。
　　結(jié)論:針刺可通過降低海馬 NADPH氧化酶質(zhì)膜亞基(gp91phox、p22phox)和胞漿亞基(p47phox、p40phox)蛋白表達水平，減弱NADPH氧化酶活性，發(fā)揮抗氧化作用；海馬中g(shù)p91phox基因敲除可減弱針刺改善VD動物空間學習記憶能力的抗氧化作用