siRNA沉默OPN基因治療喉鱗癌的實驗研究.pdf

1、目的：通過體外實驗和動物模型觀察OPN-siRNA對喉鱗癌的治療效應，探索一條喉鱗癌基因治療的新途徑。 方法：OPN基因被OPN-siRNA沉默后，RT-PCR檢測OPNmRNA的表達水平；Western-blot檢測OPN蛋白質的表達水平，PIStaining檢測凋亡細胞數目，MTT Assay檢測凋亡細胞水平；建立人喉鱗癌裸鼠種植瘤模型；裸鼠瘤體內注射治療結束前后分別稱量裸鼠體重、離體腫瘤的重量和測量腫瘤體積大小。

2、結果：OPN基因被OPN-siRNA沉默后，western blot檢測Hep-2細胞的OPN基因剪切體1蛋白表達明顯減弱；RT-PCR技術檢測OPNmRNA表達量明顯降低。PI染料染色后，OPN-RNAi組30％-35％的腫瘤細胞凋亡；MTT Assay結果顯示，OPN-siRNA慢病毒轉染Hep2細胞后，Hep2細胞細胞活力明顯下降；腫瘤生長曲線可知，OPN-siRNA慢病毒轉染組的腫瘤生長明顯受到抑制；OPN-siRNA慢病毒轉染