卵巢早衰相關(guān)位點(diǎn)在塞爾維亞患者中的驗(yàn)證研究.pdf

1、研究背景及目的:
　　 卵巢早衰(premature ovarian failure，POF)是指女性40歲之前發(fā)生的卵巢功能衰竭。卵巢早衰的發(fā)病率，在小于40歲的女性中大約為1％，小于30歲的女性中大約為0.1％。卵巢早衰的病因和發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜且尚未完全清楚，大部分患者病因不清，屬“特發(fā)性卵巢早衰”。
　　 近年來(lái)，通過(guò)對(duì)POF遺傳機(jī)制的研究，發(fā)現(xiàn)了一系列與卵巢發(fā)育和卵子生成相關(guān)的候選基因，但僅能解釋一小部分患者的發(fā)

2、病原因。前期通過(guò)對(duì)391例中國(guó)漢族POF患者進(jìn)行全基因組關(guān)聯(lián)研究(genome-wide association studies，GWAS)，同時(shí)在400例POF患者中進(jìn)行驗(yàn)證研究，發(fā)現(xiàn)候選區(qū)域8q22.3關(guān)聯(lián)位點(diǎn)(rs10464815、rs10808365、rs3847152、rs3847153、rs3847154、rs3843552、rs10955242、rs3843555)，盡管該區(qū)域內(nèi)未發(fā)現(xiàn)相關(guān)候選基因，但推測(cè)其鄰近區(qū)域存在與卵

3、巢發(fā)育和卵子生成有關(guān)的調(diào)控區(qū)域。前期在中國(guó)POF患者中進(jìn)行早絕經(jīng)(early menopause，EM)相關(guān)位點(diǎn)關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)3個(gè)相關(guān)SNPs位點(diǎn)，分別為位于HK3基因rs2278493、ESR1基因rs2234693和BRSK1基因rs12611091位點(diǎn)。目前尚無(wú)其他人群上述相關(guān)SNPs位點(diǎn)的驗(yàn)證研究。
　　 本實(shí)驗(yàn)依據(jù)最小等位基因頻率（minor allele frequency,MAF）＞3％的原則，擬選擇已報(bào)道的與中國(guó)漢

4、族POF相關(guān)聯(lián)的SNPs位點(diǎn)，包括rs2278493、rs2234693、rs12611091、rs3847153和rs3108910等，在塞爾維亞人群中驗(yàn)證其與POF的相關(guān)性，并分別比較不同等位基因頻率在塞爾維亞人種與中國(guó)漢族人群的分布差異。
　　 研究對(duì)象與方法:
　　 依據(jù)POF的診斷標(biāo)準(zhǔn)，選擇英國(guó)塞爾維亞人種的特發(fā)性POF患者197例，并選擇同期就診的正常女性552例作為對(duì)照，所有研究對(duì)象均為英國(guó)塞爾維亞人種且無(wú)

5、親緣關(guān)系。分別抽取其外周血，提取全血的基因組DNA;利用PCR技術(shù)和基因測(cè)序技術(shù)對(duì)SNPs位點(diǎn)rs2278493、rs2234693、rs12611091、rs3847153和rs3108910的等位基因頻率進(jìn)行分析。使用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行x2檢驗(yàn)，設(shè)定檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，若P≤0.05則拒絕原假設(shè)，表示兩組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 (1)塞爾維亞人種中各SNPs位點(diǎn)不同等位基因

6、頻率在POF組和正常對(duì)照組之間的比較:HK3基因rs2278493位點(diǎn)（A/G多態(tài)）A等位基因頻率(31.2％vs30.5％，P=0.798＞0.05);ESR1基因rs2234693位點(diǎn)（C/T多態(tài)）C等位基因頻率(46.1％vs49.3％，P=0.296＞0.05);BRSK1基因rs12611091位點(diǎn)（C/T多態(tài)）C等位基因頻率(54.3％vs52.9％，P=0.629＞0.05);rs3847153位點(diǎn)(C/T多態(tài))C等位基因

7、頻率(4.3％vs4.6％，P=0.803＞0.05);rs3108910位點(diǎn)（G/A多態(tài)）G等位基因頻率(26.1％vs23.7％，P=0.339＞0.05)。
　　 (2)各SNPs位點(diǎn)不同等位基因頻率在塞爾維亞人種POF患者和中國(guó)漢旗人種POF患者之間的比較:HK3基因rs2278493位點(diǎn)(A/G多態(tài))A等位基因頻率(31.2％vs34.51％，P=0.246＞0.05);ESR1基因rs2234693位點(diǎn)（C/T多態(tài)）

8、C等位基因頻率(46.1％vs36.55％，P=0.002＜0.05);BRSK1基因rs12611091位點(diǎn)（C/T多態(tài)）C等位基因頻率(54.3％vs75.78％，P＜0.0001);rs3847153位點(diǎn)(C/T多態(tài))C等位基因頻率(4.3％vs30.08％，P＜0.0001);rs3108910位點(diǎn)(G/A多態(tài))G等位基因頻率(26.1％vs52.05％，P＜0.0001)。
　　 結(jié)論:
　　 rs227849