脂氧素A4通過(guò)阻斷巨噬細(xì)胞的激活抑制前列腺癌細(xì)胞.pdf

1、研究背景：腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞 (TAMs)是腫瘤微環(huán)境中的重要組成部分，在腫瘤的進(jìn)展過(guò)程中起著關(guān)鍵的作用。在過(guò)去十年的研究中有人發(fā)現(xiàn)TAMs 有促進(jìn)腫瘤的作用，但腫瘤與TAMs 之間的作用極其復(fù)雜，它們之間的關(guān)系還沒(méi)有被清楚地闡明，有關(guān)TAMs是否有促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的作用仍然還存在爭(zhēng)議。有研究表明在肺癌的治療中TAMs 數(shù)量的增加對(duì)腫瘤的預(yù)后有良好作用，但是對(duì)乳腺癌的預(yù)后較差。目前，炎癥微環(huán)境已被證實(shí)在實(shí)體惡性腫瘤的進(jìn)展中扮演著重要的角色，此

2、時(shí)巨噬細(xì)胞會(huì)被激活為TAMs。有報(bào)道稱非甾體類抗炎藥(NSAIDs)能抑制腫瘤的增殖，并促進(jìn)它的凋亡。脂氧素 (lipoxins，LXs)作為一種新穎的非甾體類抗炎藥，是第一個(gè)在活體內(nèi)被鑒定的內(nèi)源性炎癥反應(yīng)“剎車信號(hào)（braking signal）”家族。本文對(duì)TAMs 對(duì)前列腺癌的作用進(jìn)行了研究，而且研究了內(nèi)源性抗炎抗腫瘤物質(zhì)脂氧素對(duì)前列腺癌進(jìn)程的作用。
　　 目的：從細(xì)胞水平研究TAMs 對(duì)PC-3 前列腺癌細(xì)胞的遷移以及增

3、殖的影響，以及脂氧素對(duì)TAMs 作用的影響。
　　 方法：體外培養(yǎng)人前列腺癌細(xì)胞PC-3細(xì)胞和人巨噬細(xì)胞系U937，THP-1,鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7。試驗(yàn)分為三組：1.空白組：即用沒(méi)有刺激的巨噬細(xì)胞上清液培養(yǎng)PC-3細(xì)胞；2.巨噬細(xì)胞上清液刺激組：LPS(100ng/ml)或者160nmol/L PMA[28]刺激的巨噬細(xì)胞上清液（AMCM）培養(yǎng)PC-3細(xì)胞；3.脂氧素干預(yù)組：加入LXA4（200nmol/L）與激活的巨噬

4、細(xì)胞上清液培養(yǎng)PC-3細(xì)胞。倒置顯微鏡下觀察其形態(tài)變化；體外培養(yǎng)PC-3細(xì)胞至貼滿整個(gè)六孔板，在加上清液培養(yǎng)及藥物之前在每個(gè)孔板中央用槍頭劃一條直線，觀察用藥作用24h后對(duì)癌細(xì)胞侵襲的影響；同樣分為三組體外培養(yǎng)細(xì)胞，采用免疫熒光來(lái)觀察反映癌細(xì)胞增殖的標(biāo)記物核仁素(C23)，核干素(NS)和反應(yīng)細(xì)胞粘附的標(biāo)記物鈣粘蛋白(E-cadherin），連環(huán)蛋白(β-catenin)表達(dá)情況；RT-PCR和western blot分別來(lái)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)C

5、23，NS基因和蛋白的表達(dá)情況，并用western blot 檢測(cè)核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的蛋白表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：與空白對(duì)照組相比，AMCM 刺激組PC-3細(xì)胞的遷移能力明顯增加，鈣粘蛋白(E-cadherin），連環(huán)蛋白(β-catenin)的表達(dá)則較空白對(duì)照組明顯降低，反映其增殖能力的指標(biāo)C23、NS的表達(dá)量明顯增高，且核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的蛋白表達(dá)亦增高；而脂氧素干預(yù)組較AMCM 刺激組遷移能力降低，且該組C23、NS、