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文檔簡(jiǎn)介
1、肝癌是常見的病死率較高的惡性腫瘤,全身化療是中晚期癌癥患者的主要治療方法,但全身化療藥物選擇性低,毒副反應(yīng)大,療效差。載藥納米藥物投遞系統(tǒng)是近年來新興的藥物靶向運(yùn)送制劑,它借助于安全無毒的各種運(yùn)送載體,采用特殊工藝方法制備納米級(jí)別的藥物微球;納米藥物微球具有靶向傳遞、可控緩慢釋放、增強(qiáng)藥效及降低毒副反應(yīng)等特點(diǎn),有望成為癌癥組織的靶向化療制劑。本課題旨在制備載阿霉素納米微球,研究探討其性質(zhì)表征、制備工藝及體外細(xì)胞毒作用,為納米藥物載體制劑
2、的研究及開發(fā)提供一定的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
目的
制備載阿霉素乳酸羥基乙酸共聚物PLGA納米微球(ADM-PLGA-NP),分析表征其一般理化性質(zhì)及緩釋特點(diǎn),探討研究其對(duì)體外培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞系HepG2的細(xì)胞毒作用。
方法
1.采用改良的W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法制備ADM-PLGA-NP,場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡觀察微球形態(tài),激光衍射粒度分析儀檢測(cè)微球粒徑分布及多分散性,紫外分光光度法計(jì)算載藥率及包封率,體外藥物釋放實(shí)
3、驗(yàn)考察微球?qū)DM的緩釋規(guī)律;
2.HepG2細(xì)胞分別與ADM原藥和載藥納米微球ADM-PLGA-NP(根據(jù)體外藥物釋藥曲線計(jì)算出釋藥量)共培養(yǎng)一定時(shí)間后,相差倒置顯微鏡觀察給藥后的細(xì)胞形態(tài)的變化,噻唑藍(lán)(MTT)比色法評(píng)價(jià)ADM-PLGA-NP的細(xì)胞毒作用,熒光顯微鏡觀察細(xì)胞對(duì)ADM-PLGA-NP的吞噬攝取,流式細(xì)胞術(shù)半定量細(xì)胞內(nèi)的阿霉素藥物含量,研究ADM原藥和載藥納米微球ADM-PLGA-NP的細(xì)胞攝取量及細(xì)胞毒性差異
4、。
結(jié)果
1.制備的ADM-PLGA-NP外觀呈圓整球形,無明顯粘連;平均粒徑約237±12.7nm,大小均勻,分布范圍窄,多分散性指數(shù)為0.022;載藥量及包封率分別為1.42±0.67%和23.82±8.34%;藥物在體外緩慢釋放,12h內(nèi)呈突釋,突釋量達(dá)藥物總量的55%,5d累積釋放量達(dá)85%。
2.ADM原藥和載藥納米微球ADM-PLGA-NP分別與HepG2細(xì)胞共培養(yǎng)后,相差倒置顯微鏡觀察示細(xì)胞貼
5、壁能力減弱,胞質(zhì)固縮,甚至死亡;MTT實(shí)驗(yàn)示空白微球?qū)epG2細(xì)胞的平均增殖抑制率為5.98±2.96%;ADM-PLGA-NP和ADM原藥均能抑制HepG2細(xì)胞增殖,ADM原藥的細(xì)胞抑制增殖率較ADM-PLGA-NP低(p<0.05);熒光顯微鏡觀察到ADM-PLGA-NP被細(xì)胞吞噬后ADM發(fā)出紅色熒光;流式細(xì)胞術(shù)半定量顯示,ADM-PLGA-NP較ADM原藥在細(xì)胞內(nèi)有更強(qiáng)的ADM藥物分子熒光強(qiáng)度。
結(jié)論
利用復(fù)
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