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文檔簡介
1、構(gòu)建一個合適的評價模型,是研究腫瘤發(fā)生發(fā)展過程及提高早期診斷效率的關(guān)鍵。微載體培養(yǎng)技術(shù)是其中易于實現(xiàn)、成本低、可大規(guī)模操作的一種方法。與傳統(tǒng)的培養(yǎng)方式相比,微載體技術(shù)可以為細(xì)胞生長提供一個三維(Three-dimension,3D)環(huán)境,是一種良好的3D細(xì)胞培養(yǎng)模型。
聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)具有良好的生物相容性、優(yōu)異的力學(xué)性能和可控的降解速率,因此被廣泛用作組織工程的支架材料和細(xì)胞培養(yǎng)微載體等。但是,由于PLGA材料本身
2、存在疏水性、表面能低、表面缺乏細(xì)胞識別位點等固有的缺點,因而影響了細(xì)胞在微載體上的粘附、增殖和分泌基質(zhì),因此改善材料的細(xì)胞相容性十分必要。本論文圍繞PLGA微球的制備、改性及在卵巢癌HO8910細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用展開,具體的研究內(nèi)容如下:
1.采用乳化溶劑揮發(fā)法制備了PLGA微球。通過調(diào)節(jié)攪拌速度、水油比和分散劑濃度,獲得了不同粒徑和粒徑分布的PLGA微球。在此基礎(chǔ)上,采用乳化溶劑揮發(fā)法結(jié)合液致相分離制備了表面多孔的PLGA微球
3、。微球的表面存在大量分布較均一的小孔,內(nèi)部多為不規(guī)則多孔結(jié)構(gòu)。在制備PLGA微球的過程中,選用不同的分子量和組分的PLGA聚合物,可以制備出不同孔尺寸和密度的多孔微球。
2.以平均粒徑在150μm左右的光滑和多孔PLGA微球作為模板,采用胺解和接枝涂層相結(jié)合的方法,在PLGA微球表面固定Ⅰ型膠原,以提高細(xì)胞相容性。微球表面的自由氨基量隨胺解時間的延長先延長后趨于穩(wěn)定。采用戊二醛為偶聯(lián)劑,將Ⅰ型膠原接枝涂層在微球表面。Ⅰ型膠原的
4、固定量隨自由氨基含量的增加而增大。
3.在體外進行卵巢癌HO8910細(xì)胞的培養(yǎng),對上述制備得到的表面光滑及多孔的PLGA微球及各自改性后的微球進行評價。相對于表面光滑的微球來說,表面多孔的PLGA微球有利于細(xì)胞的粘附生長;同時Ⅰ型膠原修飾后的PLGA微球比改性前細(xì)胞相容性得到顯著提高。對傳統(tǒng)二維平板培養(yǎng)和微載體培養(yǎng)進行了比對,發(fā)現(xiàn)微載體培養(yǎng)中細(xì)胞E-cadherin的表達(dá)比較高,更接近于實體瘤。
4.探索了聚乙烯亞胺
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