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文檔簡介
1、目的:確定大黃藥材質量標準,對大黃多糖提取、純化工藝進行研究,并將其制備成脂質體,對其脂質體制備進行考察,篩選最合理工藝,使大黃多糖藥理作用與脂質體技術結合,充分發(fā)揮藥效,并對大黃多糖及其脂質體調節(jié)免疫力,抗腫瘤的作用進行實驗驗證。
方法:采用單因素試驗法對影響大黃多糖提取的溫度、固液比、提取時間、提取次數(shù)、醇沉濃度、醇用量等因素進行考察,確定大黃多糖提取最佳工藝;采用HPD-300大孔樹脂對大黃多糖進行脫色試驗研究;采用
2、Sevage法除蛋白,用考馬斯亮藍法測定蛋白質含量,對三氯甲烷與正丁醇比例、藥液與試劑的用量比例、萃取次數(shù)三個因素進行單因素考察,以優(yōu)選除蛋白工藝;對大黃多糖脂質體制備方法及影響脂質體包封、成型因素進行研究,以包封率為指標,篩選出適宜的大黃多糖脂質體制備工藝;對大黃多糖及其脂質體對小鼠網狀內皮系統(tǒng)吞噬功能的影響進行實驗研究,考察大黃多糖及其脂質體對腸癌細胞HT29的體外作用,以驗證大黃多糖抗腫瘤效果,證明其制劑的藥學作用及使用意義。
3、r> 結果:大黃多糖最佳提取工藝為:100℃下,10倍量水提2次,每次2h,用6倍量90%乙醇進行粗多糖分離;大黃多糖脫色素最佳工藝為:0.25g/ml生藥藥液,以6BV/h速度滴漏,HPD-300大孔樹脂徑高比為1/17;最佳除蛋白工藝為:三氯甲烷與正丁醇體積比為3:1,藥液與Sevage試劑體積比為4:1,萃取分離次數(shù)為5次;采用注入法制備大黃多糖脂質體,優(yōu)選工藝為膽固醇與卵磷脂質量比為4:1,加入PH6.86磷酸鹽緩沖液40
4、ml,5.6mg/g大黃多糖液10ml;藥效學實驗顯示,大黃多糖及其脂質體能明顯提高巨噬細胞吞噬指數(shù)、吞噬系數(shù)(P<0.05);體外腫瘤細胞抑制實驗顯示,大黃多糖及脂質體對HT-29人腸癌細胞具有明顯的抑制作用(P<0.05)。
結論:大黃藥材資源豐富,來源廣泛,其多糖成分具有良好的調節(jié)免疫功能、抑制腫瘤細胞的作用。我們將大黃多糖制備成脂質體,使其藥效得到充分發(fā)揮;試驗結果顯示,大黃多糖提取純化工藝、脂質體制備工藝設計合理
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