姜黃素脂質(zhì)體和脂質(zhì)體凝膠的制備及其經(jīng)皮給藥研究.pdf

1、姜黃素(Curcumin)是從姜黃根莖中提取得到的一種黃色色素，作為天然的植物提取物，其來源廣、毒性低，具有抗炎、抗腫瘤、抗菌抗病毒等藥理活性。但姜黃素體外穩(wěn)定性差，口服易被胃腸道和肝臟代謝而使其生物利用度極低，從而影響其藥效的發(fā)揮。經(jīng)皮給藥途徑與其他給藥途徑相比具有如可以避免肝臟首過效應(yīng)和胃腸道對藥物的降解、方便給藥等優(yōu)點，因此考慮將姜黃素制備成經(jīng)皮給藥制劑，用于皮膚炎癥、皮膚腫瘤和癌癥皮膚轉(zhuǎn)移等皮膚疾病的治療。但由于姜黃素本身脂溶性

2、強(qiáng)的特點和受到角質(zhì)層屏障的限制，姜黃素透皮制劑的研究也將是一大挑戰(zhàn)。脂質(zhì)體作為一種常用的經(jīng)皮給藥載體，可以促進(jìn)藥物的皮膚滲透性和皮內(nèi)滯留量。因此，本文將以脂質(zhì)體為姜黃素透皮給藥載體，并將其制備成凝膠劑，進(jìn)行經(jīng)皮給藥研究，利用其良好的生物相容性，促進(jìn)姜黃素的皮膚滲透和皮內(nèi)滯留，這對于姜黃素在皮膚局部或深層組織發(fā)揮藥效具有一定的實際意義。本文的主要研究內(nèi)容如下：
　　一、處方前研究。建立了姜黃素的分析方法，通過方法學(xué)考察表明所建立的分

3、析方法準(zhǔn)確、可靠；考察了姜黃素在不同溶媒體系中的溶解度，確定了姜黃素體外釋放和透皮實驗的接收介質(zhì)為20％乙醇和0.5％吐溫80的混合溶液；運用軟件預(yù)測了姜黃素的油水分配系數(shù)，并根據(jù)其分子量和油水分配系數(shù)，從理論上預(yù)測了其體外經(jīng)皮滲透性能，結(jié)果表明姜黃素本身的經(jīng)皮滲透性較差，需要通過相應(yīng)的劑型進(jìn)行改善；考察了姜黃素在不同溫度和pH條件下的穩(wěn)定性，結(jié)果表明24 h內(nèi)，姜黃素在50℃和60℃條件下能穩(wěn)定存在；在pH為5.0、6.5、7.0條件

4、下顯示出較好的穩(wěn)定性，而在pH為7.8－8.0的條件下有明顯降解的趨勢。
　　二、姜黃素脂質(zhì)體的制備和評價。選擇了微柱離心法為姜黃素脂質(zhì)體包封率的測定方法，并以包封率為指標(biāo)，篩選了姜黃素的制備工藝；以包封率和載藥量為指標(biāo)，通過單因素和正交試驗進(jìn)行了處方優(yōu)化，得到優(yōu)化工藝為氯仿為有機(jī)溶劑，水合溫度60℃，水合時間30 min，超聲功率80 W，超聲時間180 s，最佳處方為姜黃素用量10 mg，磷脂用量200 mg，膽固醇用量20

5、mg，吐溫80用量20 mg，5 mL pH6.5的磷酸鹽緩沖液為水合介質(zhì)；以此工藝和處方比例分別制備了姜黃素大豆磷脂脂質(zhì)體、姜黃素蛋黃磷脂脂質(zhì)體和姜黃素氫化大豆磷脂脂質(zhì)體，采用透射電鏡，馬爾文粒徑測定儀和差示掃描量熱儀(DSC)等對其物理性質(zhì)進(jìn)行了表征，結(jié)果表明姜黃素大豆磷脂、蛋黃磷脂和氫化磷脂脂質(zhì)體形態(tài)相似，均為類圓形，粒徑分別為102.4±2.2、109.1±4.9和117.4±4.6 nm，多分散性指數(shù)分別為0.247±0.02

6、8、0.261±0.013和0.279±0.039，電位分別為-12.9±1.4、-11.9±2.0和-10.4±2.7 mv，包封率分別為(82.32±3.91)％、(81.59±2.38)％和(80.77±4.12)％；DSC的結(jié)果說明三種脂質(zhì)體中脂質(zhì)膜均與姜黃素發(fā)生了相互作用，存在形式均發(fā)生了變化；脂質(zhì)體的釋放結(jié)果表明，姜黃素氫化磷脂脂質(zhì)體的釋放較慢，其釋放速度僅為姜黃素大豆磷脂和蛋黃磷脂脂質(zhì)體釋放速度的1/2，推測與脂質(zhì)膜的流動

7、性有關(guān)；穩(wěn)定性實驗結(jié)果表明，4℃條件下，三種脂質(zhì)體在90天內(nèi)未出現(xiàn)聚集和明顯的藥物滲漏現(xiàn)象。
　　三、姜黃素脂質(zhì)體的體外透皮研究和抗腫瘤活性評價。采用Franz擴(kuò)散池，以單位面積皮膚累計滲透量和滯留量為指標(biāo)考察了姜黃素脂質(zhì)體離體經(jīng)皮擴(kuò)散的影響因素。結(jié)果表明，姜黃素脂質(zhì)體的皮膚累計滲透量和滯留量均顯著高于姜黃素溶液(累計滲透量：12.56μg·cm-2，滯留量：1.49μg·cm-2)，說明脂質(zhì)體作為姜黃素的透皮載體，能增強(qiáng)其經(jīng)皮滲

8、透性能。此外，隨著脂質(zhì)體粒徑減小(400－100 nm)，姜黃素皮膚累計滲透量和滯留量隨之增大(累計滲透量：23.26－34.65μg·cm-2，滯留量：3.11-5.49μg·cm-2)；隨著藥物濃度的增大(1.0-2.0μg·mL-1)，姜黃素的皮膚累計滲透量和滯留量也隨之增大(累計滲透量：21.53－34.05μg·cm-2，滯留量：4.02-5.37μg·cm-2)；與姜黃素氫化磷脂脂質(zhì)體(累計滲透量：21.87μg·cm-2，

9、滯留量：3.32μg·cm-2)相比，大豆磷脂脂質(zhì)體(累計滲透量：34.84μg·cm-2，滯留量：5.66μg·cm-2)和蛋黃磷脂脂質(zhì)體(累計滲透量：31.97μg·cm-2，滯留量：5.23μg·cm-2)更利于增強(qiáng)藥物的透皮性能。以B16BL6黑色素瘤細(xì)胞為研究對象，考察了姜黃素脂質(zhì)體抗腫瘤活性，實驗結(jié)果表明，姜黃素脂質(zhì)體的體外抗腫瘤活性優(yōu)于姜黃素溶液(IC50值為22.42μg·mL-1)；且不同磷脂組成的姜黃素脂質(zhì)體的抗腫瘤

10、作用有差異，與氫化磷脂脂質(zhì)體相比(IC50值為14.04μg·mL-1)，大豆磷脂脂質(zhì)體(IC50值為10.02μg·mL-1)和蛋黃磷脂脂質(zhì)體(IC50值為11.35μg·mL-1)顯示出了更好的體外抗腫瘤活性。
　　四、姜黃素脂質(zhì)體凝膠的制備和體外透皮研究。在以上研究工作的基礎(chǔ)之上，選擇姜黃素大豆磷脂脂質(zhì)體制備成凝膠劑。以姜黃素的皮膚累計滲透量和滯留量為指標(biāo)，從卡波姆、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉中篩選得卡波姆為姜黃素脂質(zhì)體的凝

11、膠基質(zhì)，并進(jìn)一步篩選了基質(zhì)濃度及化學(xué)促滲劑，最終選擇1％卡波姆為凝膠基質(zhì)聯(lián)合2％氮酮和2％薄荷醇為促滲劑制備姜黃素脂質(zhì)體凝膠(含姜黃素1 mg·g-1)。透皮實驗結(jié)果表明，姜黃素脂質(zhì)體凝膠劑的皮膚累計滲透量(87.38μg·cm-2)和皮膚滯留量(13.44μg·cm-2)水平均優(yōu)于普通凝膠制劑(累計滲透量：32.07μg·cm-2，滯留量：4.16μg·cm-2)。脂質(zhì)體凝膠的初步穩(wěn)定性考察結(jié)果表明，在3個月內(nèi)其穩(wěn)定性良好。
　

12、　五、姜黃素脂質(zhì)體凝膠的體內(nèi)藥效學(xué)評價。采用B16BL6小鼠黑色素瘤模型，以腫瘤抑制率為指標(biāo)，考察了姜黃素脂質(zhì)體凝膠劑的體內(nèi)抗腫瘤活性。實驗結(jié)果表明，姜黃素脂質(zhì)體凝膠劑對小鼠黑色素瘤生長有明顯抑制作用，抑瘤率為(43.6±3.6)％，與姜黃素普通凝膠劑相比升高了1.74倍。
　　本研究通過透皮給藥途徑避免了肝臟首過效應(yīng)和胃腸道代謝對姜黃素的影響，采用脂質(zhì)體凝膠劑顯著提高了姜黃素的皮膚滲透量和滯留量，有利于姜黃素以經(jīng)皮給藥方式治療皮