FGFR3、E2F-1、P21、和Rb蛋白在膀胱移行細(xì)胞腫瘤組織中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:膀胱腫瘤是泌尿系統(tǒng)中常見(jiàn)的惡性腫瘤,而膀胱腫瘤中絕大多數(shù)均為惡性腫瘤。膀胱移行細(xì)胞癌(bladder transitional cell carcinoma,BTCC)對(duì)人類(lèi)的身體危害嚴(yán)重,目前膀胱移行細(xì)胞癌的致病因素及其發(fā)病機(jī)制尚未闡明,并且缺乏特異性的診斷及有效的標(biāo)記物,這些一直是醫(yī)學(xué)專(zhuān)家的研究重點(diǎn)。
　　 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)屬于免

2、疫球蛋白基因超家族成員,目前已發(fā)現(xiàn)有4種由獨(dú)立基因編碼的FGFRs,即FGFR1、FGFR2、FGFR3和FGFR4,分別由四個(gè)獨(dú)立的基因flg、bek、fgfr3和flg-2編碼。它們廣泛分布在成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(fibroblastgrowth factors FGFs)的靶細(xì)胞的表面,介導(dǎo)FGFs的生物學(xué)活性。研究證實(shí),FGFR3基因突變會(huì)導(dǎo)致一系列遺傳性骨骼發(fā)育缺陷,后來(lái),人們發(fā)現(xiàn)FGFR3與胰腺癌、甲狀腺癌、Kaposis肉瘤

3、及牙源性腫瘤等多種惡性腫瘤有關(guān)。
　　 E2F-1蛋白是DNA結(jié)合蛋白E2F家族中五種蛋白之一。是細(xì)胞周期G1期向S期過(guò)渡的重要調(diào)控因子。研究顯示,E2F-1蛋白在乳腺癌、食管癌及胃癌等腫瘤中表達(dá)明顯升高,即E2F-1的過(guò)度表達(dá)在腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起到了促進(jìn)的作用。一些實(shí)驗(yàn)也顯示其有望成為治療一些增殖性疾病和腫瘤的靶基因。
　　 p21蛋白是ras基因的表達(dá)產(chǎn)物,分子量為21KD,位于11號(hào)染色體短臂,在ras基因發(fā)生突

4、變時(shí),可致細(xì)胞無(wú)限制的生長(zhǎng)并引起癌變。
　　 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(retinoblastoma,Rb)蛋白是細(xì)胞正常生長(zhǎng)、分化所不可缺少的環(huán)節(jié),是一種常見(jiàn)的“抑癌基因”。當(dāng)Rb缺失或失活時(shí),其抑制細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期的功能降低或者喪失,從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的形成。
　　 本項(xiàng)研究課題擬以免疫組化方法檢測(cè)FGFR3、E2F-1、P21和Rb蛋白在膀胱移行細(xì)胞癌、膀胱乳頭狀瘤組織中的表達(dá)情況,分析上述蛋白表達(dá)的生物學(xué)意義和在膀胱移行

5、細(xì)胞癌發(fā)生中的可能作用。
　　 方法:
　　 選取河北醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科2000年8月至2009年10月期間存檔蠟塊膀胱腫瘤組織共122例,包含30例膀胱移行細(xì)胞乳頭狀瘤(Bladder transitional cell papilloma,BTCP)和92例膀胱移行細(xì)胞癌(bladder transitional cell carcinoma,BTCC)。所有患者均為初次手術(shù),術(shù)前均未經(jīng)放射治療或化療。另取1

6、0例非腫瘤性膀胱粘膜作為對(duì)照組。所有病例全部切片均由兩位高年資病理醫(yī)師診斷復(fù)核。根據(jù)WHO膀胱腫瘤組織學(xué)分級(jí),將BTCC分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí),分別為38例、31例、23例；
　　 采用免疫組織化學(xué)S-P法,檢測(cè)正常膀胱粘膜、BTCP和BTCC組織中FGFR3、E2F-1、P21和Rb蛋白的表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.膀胱移行細(xì)胞腫瘤中FGFR3蛋白的表達(dá)免疫組化

7、檢測(cè),FGFR3蛋白陽(yáng)性物質(zhì)主要定位于細(xì)胞胞膜或胞漿上,表現(xiàn)為黃色或棕黃色著色。10例非腫瘤性膀胱粘膜、30例BTCP、92例BTCC組織中FGFR3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為40.00％(4/10)、56.67％(17/30)、81.52％(75/92)。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果,BTCC組織中FGFR3蛋白表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于正常膀胱粘膜和BTCP組織中的陽(yáng)性率,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；而B(niǎo)TCP與非腫瘤性膀胱黏膜組織的陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

8、(P>0.05)。FGFR3蛋白在GⅠ、GⅡ、GⅢ級(jí)BTCC中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為73.68％、83.87％、91.30％,無(wú)顯著性差異(P>0.05)。FGFR3蛋白表達(dá)陽(yáng)性率在不同年齡、性別間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 2.膀胱移行細(xì)胞腫瘤中E2F-1蛋白的表達(dá)免疫組化檢測(cè)發(fā)現(xiàn),非腫瘤性膀胱粘膜、BTCP和BTCC組織中均有E2F-1蛋白的表達(dá),陽(yáng)性物質(zhì)主要位于細(xì)胞核,呈棕黃色或黃褐色顆粒。E2F-1蛋白在10

9、例非腫瘤性膀胱粘膜、30例BTCP、92例BTCC組織中陽(yáng)性表達(dá)率分別為為30.00％(3/10)、46.67％(14/30)、70.65％(66/92)。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果,BTCC組織中E2F-1蛋白表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于非腫瘤性膀胱粘膜和BTCP組織中的陽(yáng)性率,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；而非腫瘤性膀胱黏膜與BTCP組織間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。GⅠ、GⅡ、GⅢ級(jí)BTCC中E2F-1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率分別為63.15％、70

10、.97％、82.60％,統(tǒng)計(jì)分析無(wú)顯著性差異(P>0.05)。E2F-1蛋白表達(dá)在不同年齡、性別間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 3.膀胱移行細(xì)胞腫瘤中P21蛋白的表達(dá)免疫組化檢測(cè)結(jié)果,非腫瘤性膀胱粘膜、BTCP和BTCC組織中均有p21蛋白的表達(dá),陽(yáng)性表達(dá)部位主要位于細(xì)胞漿,呈棕黃色或黃褐色顆粒。10例非腫瘤性膀胱粘膜、30例BTCP和92例BTCC組織中陽(yáng)性表達(dá)率分別為為40.00％(4/10)、50.00％(1

11、5/30)、72.83％(67/92)。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果,BTCC組織中P21蛋白表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于非腫瘤性膀胱粘膜組織和BTCP組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);而非腫瘤性膀胱黏膜與BTCP組織間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。GⅠ、GⅡ、GⅢ級(jí)BTCC組織中P21蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為65.79％、74.19％、82.60％,無(wú)顯著性差異(P>0.05)。不同年齡、性別間的P21蛋白陽(yáng)性表達(dá)率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。<

12、br>　　 4.膀胱移行細(xì)胞腫瘤中Rb蛋白的表達(dá)免疫組化檢測(cè)發(fā)現(xiàn),在非腫瘤性膀胱粘膜、BTCP和BTCC組織中均有Rb蛋白的表達(dá),陽(yáng)性表達(dá)部位主要位于細(xì)胞核,呈棕黃色或黃褐色顆粒。10例非腫瘤性膀胱粘膜組織中均可見(jiàn)Rb蛋白表達(dá),其陽(yáng)性率為100％(10/10);而30例BTCP和92例BTCC組織中陽(yáng)性表達(dá)率分別為為93.33％(28/30)和68.48％(63/92)。統(tǒng)計(jì)分析表明BTCC組織中Rb蛋白表達(dá)的陽(yáng)性率明顯的低于非腫瘤性

13、膀胱粘膜組織和BTCP組中的陽(yáng)性表達(dá)率,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；非腫瘤性膀胱粘膜組織與BTCP組織間差異不顯著(P>0.05)；GⅠ、GⅡ、GⅢ級(jí)BTCC組織中Rb蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率分別為76.31％、67.74％、56.52％,無(wú)顯著性差異(P>0.05)。不同年齡、性別間的Rb蛋白陽(yáng)性表達(dá)率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 5.膀胱移行細(xì)胞癌組織中FGFR3、E2F-1、P21及Rb蛋白表達(dá)的相關(guān)關(guān)系膀胱移行

14、細(xì)胞癌中E2F-1蛋白與P21蛋白表達(dá)存在明顯的正相關(guān)關(guān)系(r=0.214,P=0.041)。FGFR3與E2F-1、FGFR3與P21、FGFR3與Rb、E2F-1與Rb及P21與Rb蛋白在膀胱移行細(xì)胞癌中表達(dá)不存在相關(guān)關(guān)系(P>0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.與BTCP和非腫瘤性膀胱粘膜組織相比,BTCC組織中FGFR3、E2F-1和P21蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng),而Rb蛋白表達(dá)明顯降低,提示FGFR3、E2F-1、P