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1、目的:本文主要通過觀察110例急性冠脈綜合癥患者sPLA2、IL-8、hs-CRP等炎癥因子水平,以探討sPLA2的作用機(jī)制和冠心病的防治方法。 資料與方法:1.1.對(duì)象:選擇本院心內(nèi)科2004年8月至2005年6月住院患者。分為三組:(1)正常對(duì)照組:89例,其中男53例,女36例,年齡42~82(61.91±8.45)歲。經(jīng)詳細(xì)詢問病史體格檢查、生化檢查、胸片、心電圖、心超及冠狀動(dòng)脈造影檢查排除心臟疾患以及其他疾病。(2)穩(wěn)
2、定型冠心病(SCHD)組63例,男45例,女18例,年齡38~78(64.11±9.48)歲;(3)急性冠脈綜合癥(ACS)組110例,男87例,女23例,年齡41~88(64.20±10.72)歲;以上患者也均排除感染等其他疾病。 1.2.方法:(1)血生化指標(biāo):受試者于冠脈造影當(dāng)日術(shù)前采橈動(dòng)脈血液5ml,不抗凝。3000r/min,10min離心取血清,-20℃保存待測(cè)。采用OlympusAU2700全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定,包
3、括HDL-C、LDL-C和hs-CRP等。 (2)sPLA2的檢測(cè):所采集標(biāo)本同上。用ELISA法檢測(cè)血清sPLA2(試劑盒購自美國R&D公司)。嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作,在96孔板中依次加入待測(cè)樣品及標(biāo)準(zhǔn)品、緩沖液、反應(yīng)底物,37度水浴30min后加入終止液及顯色液,室溫孵育10min,再于波長405nm處讀取數(shù)據(jù),并在570~590nm處校正。檢測(cè)符合實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。 (3)IL-8的檢測(cè):所采集標(biāo)本同上。用流式細(xì)胞
4、儀檢測(cè)IL-8水平(試劑盒經(jīng)聯(lián)科生物購自美國Bender公司)。準(zhǔn)備好相關(guān)試劑后,在帶濾膜的微孔板內(nèi)依次加入緩沖液、樣品、抗體包被的熒光微球及生物素標(biāo)記的檢測(cè)抗體,孵育后使用真空抽濾裝置反復(fù)抽吸沖洗,再加入PE偶聯(lián)的鏈霉親合素,孵育、反復(fù)抽吸,然后移至流式標(biāo)本管,在Coulter流式細(xì)胞儀上建立FSC/SSC雙參數(shù)直方圖,調(diào)節(jié)參數(shù)后分別采集標(biāo)本管中的微球,測(cè)出相對(duì)應(yīng)的平均熒光強(qiáng)度(MFI),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并根據(jù)FlowCytomix軟件計(jì)
5、算IL-8濃度。 (4)冠狀動(dòng)脈病變積分(CAS)計(jì)算方法:同一病變選用顯示病變最嚴(yán)重的體位,利用計(jì)算機(jī)定量分析系統(tǒng)(QCA)分析冠狀動(dòng)脈狹窄程度,參照Leaman冠狀動(dòng)脈積分方法計(jì)算CAS。1.3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:資料應(yīng)用SPSSl0.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)量資料用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,兩組數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn),多組數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析;計(jì)數(shù)資料用卡方檢驗(yàn)。P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果2.1.各組的基本
6、特征:年齡、性別、體重指數(shù)、高血壓、糖尿病以及LDL、HDL在急性冠脈綜合癥組、穩(wěn)定型冠心病組及對(duì)照組中分布無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。白細(xì)胞計(jì)數(shù)ACS組高于正常對(duì)照組(P<0.05),同時(shí)也高于SCHD組(P<0.05),而對(duì)照組與SCHD組間比較則無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 2.2.急性冠脈綜合癥與sPLA2的關(guān)系sPLA2在ACS組[(71.3±18.07)u/ml]較SCHD組[(62.63±11.92)u/ml]
7、以及正常對(duì)照組[(55.18±11.75)u/ml]均明顯升高(P<0.01),而SCHD組[(62.63±11.92)u/ml]sPLA2同時(shí)也高于正常對(duì)照組(P<0.01)。 2.3.IL-8、hs-CRP等在冠心病患者的變化IL-8在ACS組[(194.8±77.84)Pg/ml]顯著高于SCHD組[(159.46±78.64)Pg/ml]和正常對(duì)照組[(118.77±32.19)Pg/ml](P<0.01),而SCHD組
8、也顯著高于正常對(duì)照組。hs-CRP濃度也有類似的變化。 2.4.sPLA2與IL-8、hs-CRP等的關(guān)系:IL-8、hs-CRP介導(dǎo)因子,sPLA2與其進(jìn)行Spearman相關(guān)性分析,發(fā)現(xiàn)sPLA2與hs-CRP(r=0.231,P=0.005)及IL-8(r=0.203,P=0.007)分別呈顯著正相關(guān)關(guān)系。 2.5.sPLA2與HDL-C及CAS的相關(guān)性分析:通過Spearman相關(guān)性檢驗(yàn),發(fā)現(xiàn)sPLA2與HDL-
9、C呈負(fù)相關(guān)(r=-0.173,P=0.005),與冠狀動(dòng)脈病變積分(CAS)則呈正相關(guān)(r=0.409,P=0.000),但sPLA2與年齡、BMI、LDL-C卻無顯著相關(guān)性。 2.6.將sPLA2、年齡、性別、BMI、高血壓、糖尿病、吸煙對(duì)冠心病作Cox回歸分析,提示sPLA2為冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P=0.001,相對(duì)危險(xiǎn)度1.012),但高血壓、糖尿病、吸煙在本研究中未顯示出其獨(dú)立危險(xiǎn)因素的作用(P>0.05)。
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