復(fù)方絞股藍(lán)益智顆粒藥劑學(xué)及其防治老年性癡呆的藥理作用與安全性研究.pdf

1、目的：本文研究復(fù)方絞股藍(lán)益智顆粒（FTG）的提取工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其防治老年性癡呆的藥理作用和安全性，為將FTG開發(fā)成新一代功能保健食品提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：①藥劑學(xué)研究：以總皂苷的得率為指標(biāo)，運(yùn)用正交試驗(yàn)優(yōu)選FTG最佳提取工藝；用TLC法對(duì)制劑中三七、人參進(jìn)行定性鑒別，用分光光度法測定制劑中總皂苷含量。②藥理學(xué)研究：采用經(jīng)典的小鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)與大鼠Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)，觀察FTG對(duì)動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶障礙的改善作用；采用以尾靜脈注射膠原

2、蛋白與腎上腺素的混合誘導(dǎo)劑，復(fù)制小鼠急性腦卒中模型，觀察FTG對(duì)小鼠急性腦卒中死亡率的影響；培養(yǎng)原代大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞，觀察FTG對(duì)Aβ25-35致神經(jīng)細(xì)胞毒性的保護(hù)作用；測定FTG對(duì)小鼠腦蛋白含量及MAO-B活性的影響與FTG對(duì)Aβ25-35致癡呆大鼠海馬Ac hE活性的影響。③毒理學(xué)研究：在急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)中，采用最大給藥量試驗(yàn)法，以30000 mg/kg BW劑量的FTG給予小鼠灌胃兩周，觀察小鼠一般外觀表現(xiàn)，中毒癥狀與死亡數(shù)；采用

3、Ames試驗(yàn)、小鼠骨髓微核試驗(yàn)、小鼠精子畸形試驗(yàn)，觀察 FTG的遺傳毒性；在30天喂養(yǎng)試驗(yàn)中，以3333、5000、6667 mg/kg BW3個(gè)劑量的FTG給大鼠連續(xù)灌胃30天，實(shí)驗(yàn)期間觀察動(dòng)物的生長發(fā)育情況，包括各劑量組的動(dòng)物體重、增重量、進(jìn)食量、食物利用率、血常規(guī)指標(biāo)、血生化指標(biāo)、臟器重量及臟器/體重比值。
　　結(jié)果：①藥劑學(xué)研究：優(yōu)選出FTG最佳提取工藝為A2C3B2：即微波提取3次，加水量為10倍量，每次提取時(shí)間為30分

4、鐘；在TLC法鑒別實(shí)驗(yàn)中，供試品與對(duì)照品的色譜在相應(yīng)位臵上顯示相同顏色的斑點(diǎn)，陰性無干擾。人參皂苷 Re在40μg～200μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，Y=250.83X-0.017，r=0.9972，精密度和回收率符合要求。②藥理學(xué)研究：在小鼠跳臺(tái)試驗(yàn)中觀察到FTG高、中、低（16、8、4g〃kg-1〃d-1）劑量組與模型組比較，記憶獲得期成績： P＜0.05或 P＜0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，記憶鞏固期成績：各組P﹥0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)

5、意義；在大鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)中觀察到 FTG高、中、低（14、7、3.5g〃kg-1〃d-1）劑量組逃避潛伏期、成功找到平臺(tái)次數(shù)與模型組比較P＜0.05或P＜0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在急性腦卒中實(shí)驗(yàn)中察到FTG高、中、低（16、8、4g〃kg-1〃d-1）劑量組死亡率與模型組比較，P＜0.05或P＜0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中觀察到 FTG(2.5mg-1〃mL-1)組與模型組比較細(xì)胞存活率顯著升高（P<0.05）

6、，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在測定 MAO-B實(shí)驗(yàn)中觀察到FTG高、中、低（16、8、4g〃kg-1〃d-1）劑量組的腦蛋白含量與MAO-B活性與空白組比較P＜0.05或P＜0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在測定大鼠海馬AchE活性實(shí)驗(yàn)中觀察到FTG高、中、低（14、7、3.5g〃kg-1〃d-1）劑量組AchE活性與假手術(shù)組比較P＜0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③毒理學(xué)研究：在急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)中，未見動(dòng)物有中毒癥狀，無動(dòng)物死亡，外觀表現(xiàn)未見異常；在

7、遺傳毒性試驗(yàn)中，三項(xiàng)遺傳毒性試驗(yàn)結(jié)果均為陰性；在30天喂養(yǎng)試驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物的生長發(fā)育良好，各劑量組的動(dòng)物體重、增重量、進(jìn)食量、食物利用率、血常規(guī)指標(biāo)、血生化指標(biāo)、臟器重量及臟器/體重比值與對(duì)照組比較，均無顯著性差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：①FTG的最佳提取工藝為A2C3B2（即微波提取3次，水用量為10倍量），并建立了其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。②FTG對(duì)大、小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙具有明顯的改善作用；對(duì)小鼠急性腦卒中死亡率有明顯降低作用；FT