內(nèi)分泌性低血鉀癥臨床和分子生物學(xué)機(jī)制研究.pdf

1、在本系列研究的第一部分，首先分析內(nèi)分泌疾病致低血鉀、血鉀濃度與臨床表現(xiàn)、心電圖變化的相關(guān)性，并觀察補(bǔ)鉀治療后血鉀和心電圖恢復(fù)情況。本研究入選42例各種內(nèi)分泌疾患所致低血鉀的患者， 觀察臨床表現(xiàn)、血鉀濃度與心電圖變化的關(guān)系，其中24例全程跟蹤補(bǔ)鉀治療中及治療后的臨床表現(xiàn)、血清鉀濃度和心電圖變化。42例低血鉀患者臨床表現(xiàn)為乏力(以雙下肢為重)、心悸、胸悶，嚴(yán)重低血鉀者表現(xiàn)為四肢軟癱以及肌肉酸痛。血鉀濃度為2.60±0.55 mmol/1，

2、心電圖低血鉀改變與血清鉀生化測(cè)定符合率為88.2％。血清鉀<2.5mmol/1時(shí)，兩者符合率為100％。1l例原發(fā)性醛固酮增多癥患者入院時(shí)血鉀為2.54±0.60mmol/1；補(bǔ)鉀治療40小時(shí)后血鉀3.35±0.44mmol/1，血鉀濃度、臨床表現(xiàn)及心電圖恢復(fù)正常時(shí)間較長。8例糖尿病酮癥酸中毒或糖尿病合并高血壓患者入院時(shí)血鉀2.58±0.42mmol/1；補(bǔ)鉀治療40小時(shí)后血鉀3.72±0.17mmol/1；血清鉀濃度、臨床表現(xiàn)及心電圖

3、恢復(fù)正常所需時(shí)間也較長。5例甲亢周期性麻痹患者入院時(shí)血鉀最低為1.75±0.60mmol/1，補(bǔ)鉀治療15小時(shí)后血鉀3.55±0.53mmol/1；血清鉀濃度臨床表現(xiàn)及心電圖恢復(fù)正常需要的時(shí)間較原發(fā)性醛固酮增多癥組或糖尿病酮癥酸中毒組短。結(jié)論：低血鉀的臨床表現(xiàn)除與低鉀血癥的嚴(yán)重程度有關(guān)外，還與低鉀 血癥發(fā)生的急緩有關(guān)。心電圖能較好地反映低血鉀的嚴(yán)重程度。內(nèi)分 泌疾病所致低血鉀由于病因不同而出現(xiàn)不同程度的臨床表現(xiàn)及心電圖 變化，且

4、經(jīng)補(bǔ)鉀治療后恢復(fù)正常所需時(shí)間也不同。補(bǔ)鉀需補(bǔ)至血清鉀 濃度和心電圖恢復(fù)正常為止。 在本系列研究的第二部分，我們對(duì)低血鉀周期性麻痹的分子機(jī)制 進(jìn)行探討。低血鉀周期性麻痹可分為特發(fā)性低鉀周期性麻痹、甲亢伴 低鉀麻痹和家族性低鉀周期性麻痹，三類皆有遺傳因素參與，但家族 性低血鉀性周期性麻痹(hypokalemic periodic paralysis，HOKPP，低鉀 周麻)更加確切，是一種與遺傳有關(guān)的離子通道疾病，為常染色體顯

5、 性遺傳。目前已證實(shí)與家族低鉀周麻發(fā)病相關(guān)的突變類型約有十種，涉及三個(gè)基因：CACNAlS、SCN4A和KCNE3，分別編碼人骨骼肌Ca 通道、Na通道和K通道。不同突變類型所致低鉀周麻的臨床表現(xiàn)各異，而明確低鉀周麻的原因有利臨床治療。我們運(yùn)用PCR擴(kuò)增及反應(yīng)產(chǎn)物 直接測(cè)序的方法，對(duì)一個(gè)中國人低鉀周麻家系進(jìn)行基因篩查，并運(yùn)用 亞克隆方法進(jìn)行證實(shí)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在編碼Na通道的基因SCN4A上第2014位核苷酸存在一個(gè)新點(diǎn)突變(CGTl-

6、TGT)，為雜合突變，并引起相應(yīng)編碼氨基酸的改變，由原來的精氨酸(Argine)變?yōu)榘腚装彼?Cystine，SCN4A Arg672Cys)此突變?yōu)镠OKPP一個(gè)新的突變類型，并且經(jīng)亞克隆的方法進(jìn)一步證實(shí)了此雜合突變。這是國內(nèi)第一次報(bào)道的中國人低鉀周麻家系，且證實(shí)一新的雜合突變發(fā)生在SCN4A 12號(hào)外顯子，此點(diǎn)突變只在HOKPP患者中存在。而且，家系中各攜帶有此突變的患者的表現(xiàn)并不相同，提示了R672C突變型可能具有不完全外顯的特

7、性。在本系列研究的第三部分，我們分析—Liddle綜合征家系臨床資料及進(jìn)行分子生物學(xué)研究，探討其發(fā)病機(jī)制。詳細(xì)采集先證者及其家庭成員(共16人)的病史并行各項(xiàng)相關(guān)生化檢查，明確Liddle綜合征的診斷。采集外周血抽提DNA，運(yùn)甩PCR直接擴(kuò)增測(cè)序方法，尋找上皮細(xì)胞鈉通道β及γ亞單位(β ENaC，γENaC)的編碼基因SCNNlB、SCNNlG可能存在的遺傳學(xué)改變。先證者為—23歲男性，高血壓史一年余，多次低血鉀發(fā)作，血鉀最低達(dá)1.8m

8、m01/10血管腎素活性基礎(chǔ)和激發(fā)值均降低，血醛固酮和尿醛固酮在正常低限。予口服氨苯喋啶每日400rag，治療一月后血壓下降至130/75mmHg，血鉀升至3.66mmo1/1。臨床確診為Liddle綜合征。先證者二舅有高血壓低血鉀肌麻痹發(fā)作史，曾測(cè)血鉀為2.1mmo1/l。先證者三姐有低血鉀肌麻痹發(fā)作史2次，血鉀最低達(dá)2.5mmol/1。編碼β ENaC基因SCNNlB第13號(hào)外顯子的DNA測(cè)序結(jié)果顯示，先證者(Ⅲ-8)、大姐(Ⅲ-5

9、)、三姐(Ⅲ-7)、母親(Ⅱ-5)和二舅(Ⅱ-3)第616位密碼子存在CCC→CAC錯(cuò)義突變，引起相應(yīng)脯氨酸到組氨酸的改變。對(duì)100例無關(guān)個(gè)體進(jìn)行直接測(cè)序未發(fā)現(xiàn)相應(yīng)變異，證明此為一新突變類型。其他家系成員均未發(fā)現(xiàn)這一基因突變。Y ENaC基因測(cè)序未發(fā)現(xiàn)突變。本家系中發(fā)現(xiàn)的SCNNlB基因第616位密碼子CCC—CAC錯(cuò)義突變?yōu)長iddle綜合征又一新致病基因類型。對(duì)家系成員進(jìn)行基因檢測(cè)有助于早期篩選突變攜帶者，以便早期干預(yù)治療。在本系

10、列研究的第四部分，我們對(duì)一少見的Cushing綜合征類型即異位ACTH分泌綜合征的臨床特征進(jìn)行分析，而其較為突出的特征既是：6例患者皆有嚴(yán)重低血鉀癥及堿中毒傾向?？偨Y(jié)胸腺類癌一異位ACTH綜合征以低血鉀為首發(fā)臨床癥狀，分析六例病人的臨床表現(xiàn)，尤其是非典型胸腺類癌一異位ACTH綜合征的癥狀和體征、實(shí)驗(yàn)室相關(guān)測(cè)定值、以及影像學(xué)表現(xiàn)。6例患者年齡在22-40歲，4男、2女，所有患者均在典型柯興綜合癥表現(xiàn)基礎(chǔ)上，具異位ACTH分泌綜合征特征，皆

11、有面部皮膚色素沉著、低血鉀堿中毒的傾向，平均血鉀為2.29±0.02：mmol/1、血PH值為7.44±0.02；2mg地塞米松和8mg地塞米松抑制試驗(yàn)均不被抑制；4例患者以浮腫、蛋白尿就診。6例皆行垂體MRI，診為垂體微腺瘤者3例(占50[％])，僅2例腎上腺CT掃描示雙側(cè)腎上腺增生，6例皆常規(guī)胸片，3例發(fā)現(xiàn)縱膈增寬，但胸部CT全部顯示“前縱膈占”。6例病人均行胸腺腫瘤切除術(shù)并病理證實(shí)為胸腺類癌一異位ACTH綜合征。本項(xiàng)臨床觀察說明如