不同產(chǎn)區(qū)牡丹內(nèi)生菌研究.pdf

1、常用中藥牡丹皮（Moutan Cortex）為毛茛科（Ranunculaceae）芍藥屬（Paeonia）牡丹（Paeonia suffruticosa Andr.）的干燥根皮，主產(chǎn)安徽銅陵、亳州以及河南洛陽(yáng)、山東菏澤，其中安徽銅陵是公認(rèn)的牡丹皮道地產(chǎn)區(qū)。本研究在實(shí)驗(yàn)室前期研究的基礎(chǔ)上，著重對(duì)非道地產(chǎn)區(qū)牡丹內(nèi)生菌進(jìn)行分離、鑒定并與道地產(chǎn)區(qū)牡丹內(nèi)生菌種類構(gòu)成進(jìn)行了比較，同時(shí)測(cè)定了牡丹內(nèi)生菌的抑菌性，優(yōu)化了內(nèi)生菌發(fā)酵工藝，探討了內(nèi)生菌對(duì)組培

2、苗生長(zhǎng)的影響。具體研究結(jié)果如下：
　　1.從亳州、洛陽(yáng)和菏澤產(chǎn)區(qū)牡丹根部分離到內(nèi)生菌7屬26種，其中內(nèi)生細(xì)菌3屬13種、內(nèi)生真菌4屬13種，優(yōu)勢(shì)屬為芽孢桿菌屬和青霉屬；通過(guò)與道地產(chǎn)區(qū)內(nèi)生菌種類構(gòu)成進(jìn)行比較，芽孢桿菌屬、假單胞屬、青霉屬和鐮刀屬為道地與非道地產(chǎn)區(qū)所共有。
　　2.采用濾紙片法、抑制菌絲生長(zhǎng)速率法對(duì)內(nèi)生菌進(jìn)行抑菌活性研究表明：76.92％的內(nèi)生菌對(duì)病原細(xì)菌有不同程度的抑菌性，內(nèi)生細(xì)菌X11、X23和X27、內(nèi)生真

3、菌Z14對(duì)三種病原細(xì)菌均表現(xiàn)出抑菌性，內(nèi)生細(xì)菌X27、X21發(fā)酵液對(duì)金黃色葡萄球菌作用產(chǎn)生的抑菌圈直徑為16.1mm和17.3mm。對(duì)病原真菌產(chǎn)生抑菌作用的內(nèi)生菌占總數(shù)的50％，其中內(nèi)生細(xì)菌X27對(duì)西瓜枯萎病菌的抑制率、內(nèi)生細(xì)菌X23對(duì)青霉和西瓜枯萎病菌的抑制率均在50％以上。內(nèi)生真菌Z23對(duì)青霉的抑制率為64.7％，內(nèi)生真菌Z21對(duì)黑線炭疽菌的抑制率達(dá)到72.1％。
　　3.通過(guò)對(duì)一株具有抑菌活性的內(nèi)生菌株進(jìn)行合適的碳、氮源篩選

4、，篩選出的碳源為可溶性淀粉、氮源為牛肉膏，采用正交實(shí)驗(yàn)進(jìn)行發(fā)酵條件的優(yōu)化，最佳抑菌發(fā)酵組合為：5％接種量、20％裝液量和180r/min的轉(zhuǎn)速，各因素對(duì)發(fā)酵的影響的大小順序?yàn)榻臃N量、轉(zhuǎn)速和裝液量。
　　4.內(nèi)生菌對(duì)鳳丹種胚發(fā)芽率和組培苗生長(zhǎng)影響的研究表明：44.4％內(nèi)生優(yōu)勢(shì)菌和抑菌活性菌具有促生作用，經(jīng)菌J3、J9發(fā)酵液處理過(guò)的種胚萌發(fā)率高于對(duì)照組，菌J8抑制了種胚的萌發(fā)。在所接種的內(nèi)生菌組培苗中，菌J1促進(jìn)組培苗生長(zhǎng)且地上鮮重與