不同產(chǎn)地槲蕨的質(zhì)量對比研究.pdf

1、槲蕨[Drynaria roosii Nakaike(異名:D.fortunei J.Sm)]為槲蕨科槲蕨屬多年生蕨類植物,其根莖入藥為骨碎補(bǔ),具有補(bǔ)腎強(qiáng)骨,療傷止痛的功效。目前,在市場上,骨碎補(bǔ)藥材的混用現(xiàn)象十分嚴(yán)重,文獻(xiàn)記載目前作為骨碎補(bǔ)藥用的植物共涉及到6屬,15種植物,其來源復(fù)雜,而且質(zhì)量參差不齊,因此,有必要對骨碎補(bǔ)藥材的來源、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、控制方法等進(jìn)行研究,以確保骨碎補(bǔ)藥材的質(zhì)量穩(wěn)定、可靠?！吨袊幍洹?2010版)規(guī)定以柚皮

2、苷為指標(biāo)成分,但一些混淆品如中華槲蕨(D.sinica Diels),也含有柚皮苷。所以,單一成分的含量測定已不能滿足對其質(zhì)量的全面控制,亟需建立一套系統(tǒng)的、綜合的方法對其質(zhì)量進(jìn)行分析和評價(jià)。
　　 本文通過查閱中國植物志、古籍論著及相關(guān)的期刊文獻(xiàn),整理大量槲蕨及其混淆品的標(biāo)本資料,進(jìn)行了槲蕨的本草考證,并對其化學(xué)及藥理學(xué)研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述。在此基礎(chǔ)上,設(shè)計(jì)了骨碎補(bǔ)藥材的市場調(diào)查方案,前往河北安國、安徽毫州進(jìn)行市場調(diào)查,并結(jié)合文

3、獻(xiàn)資料及標(biāo)本記錄分析了槲蕨的生態(tài)習(xí)性、資源分布、混淆品、產(chǎn)量、銷售等情況。
　　 同時(shí),我們以采自湖北五峰的槲蕨的根莖為研究對象,采用硅膠和凝膠等色譜分離技術(shù),對其75％乙醇的提取物進(jìn)行了分離純化,得到7個(gè)單體化合物和1個(gè)甾體混合物,通過理化、波譜解析和文獻(xiàn)對照等方法確定了它們的結(jié)構(gòu),分別為:山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷7-O-a-L阿拉伯呋喃糖苷(kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside-7-O

4、-α-L-arabinofuranoside),柚皮苷(naringin),新北美圣草苷(neoeriocitrin),5,7-二羥基色原酮-7-O-蕓香糖苷(5,7-dihydroxychromone-7-O-rutinoside),香豆酸-4-O-β-吡喃葡萄糖苷(trans-p-coumaric acid-4-O-β-D—glucopyranoside),咖啡酸-4-D-β-D-葡萄糖苷(caffeic acid-4-O-β-D—

5、glucopyranoside),D-(+)-半乳糖[D-(+)-Galactose],豆甾醇(stigmasterol),β-谷甾醇(β-sitosterol)。其中5,7-二羥基色原酮-7-O-蕓香糖苷是首次從該屬植物中分到的。
　　 另外,我們建立了槲蕨根莖中4種成分(咖啡酸-4-O-β-D-葡萄糖苷,5,7-二羥基色原酮-7-O-蕓香糖苷,新北美圣草苷和柚皮苷)含量測定的RP-HPLC方法。系統(tǒng)地考察了方法的提取條件和色

6、譜條件,確定提取條件為:70％乙醇-水溶液超聲提取45 min。色譜條件為:色譜柱MZ-C18(4.6×250 mm,5μm)；流動相為乙腈(A):水+0.2％冰醋(B)梯度洗脫0→8 min,8％A→15％A；8→15 min,15％A→20％A；15→30 min,20％A持續(xù)15 min；30→36 min,20％A→43％A；36→45 min,43％A→70％A,流速1.0 mL/min；柱溫25℃；檢測波長260 nm?？Х?/p>

7、酸-4-O-β-D-葡萄糖苷,5,7-二羥基色原酮-7-O-蕓香糖苷,新北美圣草苷和柚皮苷分別在10.00～100.00μg/mL(r2=0.9994),0.30～6.00μg/mL(r2=0.9998),6.72～67.20μg/mL(r2=0.9999)和24.80～248.00μg/mL(r2=0.9998)范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系,加樣回收率(n=5)分別為102.23％(RSD=1.10％),100.67％(RSD=1.

8、86％),101.95％(RSD=1.78％)和98.12％(RSD=1.88％)。應(yīng)用該方法對10批不同產(chǎn)地的槲蕨根莖中的4種成分進(jìn)行了含量測定。
　　 最后,我們應(yīng)用高效液相色譜法建立了槲蕨根莖的化學(xué)指紋圖譜,對10批不同產(chǎn)地槲蕨根莖進(jìn)行HPLC指紋圖譜分析,得到13個(gè)共有峰,指認(rèn)了其中5個(gè),應(yīng)用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價(jià)系統(tǒng)2004 A版》軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,對不同產(chǎn)地的槲蕨根莖進(jìn)行了相似度分析,10批槲蕨根莖的相似度均大