獺兔生長激素基因克隆及原核細(xì)胞表達(dá)的初步研究.pdf

1、獺兔原產(chǎn)于法國，又名力克斯兔(Rex rabbit)是一種皮肉兼用兔，由于獺兔皮毛酷似水貂而得名。獺兔體型明顯小于肉兔體型，所以獺兔皮張面積將小于肉兔皮張面積。通過改變獺兔生長發(fā)育性能期望提高獺兔體型，從而在不改變獺兔皮毛優(yōu)質(zhì)的情況下提高獺兔的生長速度與體型大小。由于獺兔與肉兔進(jìn)行傳統(tǒng)遺傳育種雜交時會破壞后代的皮毛質(zhì)量，產(chǎn)生大量針毛，大幅度降低獺兔皮用價值。所以獺兔在生產(chǎn)管理及遺傳育種培養(yǎng)時堅決不能與肉兔進(jìn)行雜交培養(yǎng)。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的

2、發(fā)展，轉(zhuǎn)基因獺兔必將成為生產(chǎn)皮用獺兔的一個必然發(fā)展趨勢。GH(Growth hormone)基因已經(jīng)在多種動物體上取得了許多研究成果。
　　生長激素(GH)是動物腦垂體前葉嗜酸性細(xì)胞所分泌的一種激素，它主要作用是刺激骨、軟骨細(xì)胞的生長和分化，調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)、糖以及脂肪的代謝。生長激素(GH)基因是生長激素(GH)的遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)，是重要的生理機(jī)能基因，所以對GH基因的相關(guān)研究一直為人們所關(guān)注。
　　本研究采用RT-PCR技術(shù)克隆得

3、到獺兔GH基因。通過載體pMD18-T轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α，經(jīng)過測序證明成功克隆得到獺兔GH基因，長651bp，可編碼216個氨基酸(含1個END序列)，與NCBI中其他幾種常見動物對進(jìn)行了對比，豬、馬、牛、綿羊、山羊、家貓、家狗同源性分別為93%、92%、88%、90%、88%、92%、91%，說明獺兔與家庭生長激素基因同源性非常高。使用克隆得到的獺兔GH基因與表達(dá)載體pET-32a(+)相連接，轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)，并使其