草魚(yú)生長(zhǎng)激素基因在酵母菌中的表達(dá)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、該研究首先用DNA重組技術(shù)將已克隆的草魚(yú)生長(zhǎng)激素(CGH)基因cDNA編碼區(qū)片斷定向插入pGEX-4T-1質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化大腸桿菌TOP10F',用菌落PCR和質(zhì)粒PCR方法篩選陽(yáng)性克隆;以BamH Ⅰ和EcoRI酶切鑒定重組質(zhì)粒.以IPTG誘導(dǎo)融合蛋白表達(dá),并作RT-PCR及SDS-PAGE分析.從聚丙稀酰胺制備凝膠中回收正確表達(dá)的融合蛋白,以此免疫小鼠制備高免血清.得到高效表達(dá)草魚(yú)GH的重組質(zhì)粒pGCGH,RT-PCR分析確證重組質(zhì)粒在大

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