丁香假單胞菌黃瓜致病變種黃瓜株系和甜瓜株系的分子生物學(xué)比較.pdf

1、丁香假單胞菌黃瓜致病變種（Pseudomonassyringaepv.lachrymans）引起的黃瓜細(xì)菌性角斑病在世界范圍內(nèi)皆有發(fā)生，造成不同程度的損失，同時(shí)也引起甜瓜細(xì)菌性葉斑病。以往研究表明黃瓜和甜瓜細(xì)菌性角斑病的病原均為丁香假單胞菌黃瓜致病變種，但在本實(shí)驗(yàn)室的研究中發(fā)現(xiàn)，丁香假單胞菌黃瓜致病變種黃瓜株系和甜瓜株系在致病性和分子生物學(xué)上存在一定差異。本研究對(duì)黃瓜細(xì)菌性角斑病菌黃瓜株系和甜瓜株系的致病性分別進(jìn)行了測(cè)定與比較，并利用多

2、個(gè)看家基因研究了二者的分子生物學(xué)差異，設(shè)計(jì)特異性引物將這兩種寄主上的分離物加以區(qū)分。獲得了以下主要研究成果:
　　對(duì)丁香假單胞菌黃瓜致病變種黃瓜株系和甜瓜株系的16SrRNA和16S-23SrRNA進(jìn)行了測(cè)序并建立了系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)，同時(shí)對(duì)這兩個(gè)株系的分離物進(jìn)行了致病性測(cè)定，結(jié)果顯示，兩種不同株系分離物的16SrRNA和16S-23SrRNA同源性均高達(dá)99％，同時(shí)兩種分離物在甜瓜和黃瓜上存在致病性差異，在原寄主上發(fā)病更為嚴(yán)重;說(shuō)明丁香

3、假單胞菌黃瓜致病變種黃瓜株系和甜瓜株系屬于同一個(gè)種，但在致病性上存在差異。
　　對(duì)丁香假單胞菌黃瓜致病變種黃瓜株系和甜瓜株系的5個(gè)看家基因GAPDH基因、rpoD、rpoB、gyrB和gltA進(jìn)行了序列測(cè)定并構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。系統(tǒng)發(fā)育分析表明，丁香假單胞菌黃瓜致病變種黃瓜株系和甜瓜株系分別聚在兩個(gè)獨(dú)立的分支簇里，說(shuō)明兩種分離物在遺傳上存在明顯差異。
　　通過(guò)多重序列比較分析丁香假單胞茵黃瓜致病變種黃瓜株系和甜瓜株系以及丁香假

4、單胞菌不同致病變種的GAPDH基因和ITS序列，分別設(shè)計(jì)了針對(duì)丁香假單胞菌黃瓜致病變種黃瓜株系的特異性引物(G-F/G-R)和甜瓜株系的特異性引物(ITS-F/ITS-R)，兩對(duì)引物均能把所有參試的這兩個(gè)株系的菌株彼此區(qū)分。進(jìn)一步證明了這2個(gè)株系可能為不同致病變種。
　　綜合上述結(jié)果，本研究建議將丁香假單胞菌黃瓜致病變種甜瓜株系命名為新的致病變種:丁香假單胞菌甜瓜致病變種Pseudomonassyringaepv.melonisp