定眩合劑對椎基底動脈供應(yīng)血不足影響論文：定眩合劑對椎基底動脈供應(yīng)血不足兔腦去甲腎上腺素、5-羥色胺含量

1、<p>　　定眩合劑對椎基底動脈供應(yīng)血不足影響論文：定眩合劑對椎基底動脈供應(yīng)血不足兔腦去甲腎上腺素、5-羥色胺含量及血液流變學的影響</p><p>　　【摘要】  　　目的觀察中藥定眩合劑（Dingxuanheji)對兔椎基底動脈供血不足（VBI）腦組織去甲腎上腺素（NE），5-羥色胺（5-HT）含量及血液流變學的影響。方法選健康青紫蘭兔40只,隨機分為空白組，模型組，西比靈組，定眩合劑高、

2、低劑量組，每組8只，除空白組外其余各組高脂飼料喂養(yǎng)并注射硬化劑，7 d重復1次，6周后造模成功，再連續(xù)給相應(yīng)藥物4周后處死，進行指標測定。結(jié)果定眩合劑能使椎基底動脈供血不足動物腦組織NE，5-HT的含量增加，并使血液流變學主要指標降低, 減少了血栓形成的可能。結(jié)論定眩合劑可提高NE，5-HT的含量，通過改善通氣狀況對VBI腦組織具有保護作用，并能有效改善血液流變學,血液流變學水平的高低可反映椎基底動脈供血不足病變的程度及治療效果。<

3、;/p><p>　　【關(guān)鍵詞】  定眩合劑； 椎-基底動脈供血不足； 去甲腎上腺素； 5-羥色胺</p><p>　　Abstract：ObjectiveTo study effects of DXHJ on the NE,5-HT contents of Brain Tissue and blood rheology in Vertebro-basilar Artery insuf

4、ficiency model rabbits. Methods40 rabbits were randomly divided into 5 groups，normal group, model group, Flunarizine group and DXHJ high, low dose groups．Except normal group, the rest were fed by high fat diet, and injec

5、ted Yinghuaji once a week for six weeks. Ten weeks later, the rabbits were sacrificed and the chose targets were tested. ResultsThe DXHJ could rai</p><p>　　Key words： Dingxuanheji；  Vertebrobasilar insu

6、fficiency；   NE；  5-HT；    　　椎基底動脈供血不足（VBI）是由于短暫性血液供應(yīng)不足導致腦干、小腦或枕葉皮層缺血的一組臨床綜合征，是神經(jīng)系統(tǒng)的常見病、多發(fā)病，其特點為反復發(fā)作,纏綿難愈,每年有10%的病人發(fā)生完全性腦卒中, 急性基底動脈閉塞或急性雙側(cè)椎動脈閉塞的死亡率則高達80% 以上。因此對VBI 進行積極的治療, 無論在臨床上, 還是

7、在預防醫(yī)學上均有很大的意義。腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)是一類具有廣泛生物學活性的物質(zhì),在中樞神經(jīng)系統(tǒng)參與許多生理反應(yīng)。這些物質(zhì)在組織中的含量是反映神經(jīng)遞質(zhì)生物合成、釋放、攝取、失活等過程的生化指標，在研究神經(jīng)元功能狀態(tài)或研究藥物對神經(jīng)組織作用的影響時,常用這些生化指標。近年來發(fā)現(xiàn),病理情況下它與腦血管病關(guān)系密切［1］，本研究主要觀察定眩合劑(DXHJ) 對椎基底動脈供血不足腦組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素(NE) 、5-羥色胺(5-HT) 含

8、量的影響及其血液流變學的改變，探討DXHJ的作用機制。</p><p><b>　　1  材料與儀器</b></p><p>　　1.1  動物健康青紫蘭兔40 只 , 雌雄各半, 體質(zhì)量( 2.0±0.3) kg, 兔齡3～4 月, 合格證號：醫(yī)動字號14-004,由蘭州生物制品研究所實驗動物室提供，附合一級實驗動物質(zhì)量標準。室溫18～

9、20℃,濕度65%～70%,實驗前適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d后隨機分為5組, 即空白組、模型組，西比靈組，定眩合劑高、低劑量組,每組8只。</p><p>　　1.2  藥物及試劑定眩合劑由甘肅省中醫(yī)院制劑室配制 (藥物組方：岷當歸，川芎，半夏，天麻，白術(shù)，茯苓，陳皮，鉤藤，甘草) ； 西比靈由西安楊森制藥有限公司生產(chǎn)，批號：20080109；消痔靈注射液由吉林省集安益盛藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號：080321；

10、利多卡因，批號：0708022；膽固醇購自北京雙旋生物培養(yǎng)基制品廠，批號：20070606。豬油，雞蛋，白糖，市售，自備。NE，5-HT試劑盒購自美國ADL公司。</p><p>　　1.3  儀器經(jīng)顱多普勒血流檢測儀為美國卜ledasoraics TCD儀，探頭頻率2HzIz；日立高速低溫冷凍離心機；722 s分光光度計，上海緊密科學儀器有限公司產(chǎn)品。</p><p><

11、b>　　2  方法</b></p><p>　　2.1  造模方法參照成都中醫(yī)藥大學鄭重等［2］的造模方法，用硬化劑（消痔靈與利多卡因按1∶1混合）10 ml，于家兔左側(cè)C3～C5頸椎橫突側(cè)面，進針以感覺到橫突邊緣為準，回抽針栓無血、無氣、無腦脊液，然后推注硬化劑，于7 d后重復注射一次。同時除空白組外其余各組高脂飼料喂養(yǎng)（高脂飼料由2%膽固醇、5%鮮蛋黃、3%白糖、10%豬

12、油、80%基礎(chǔ)飼料配制而成）［3］。6周內(nèi)造模成功，以TCD檢驗造模成功。</p><p>　　2.2  給藥方式將40只青紫蘭兔隨機分為5組，即空白組，模型組，西比靈組，定眩合劑高、低劑量組。西比靈組以西比靈1.2 mg/(kg·d)，并以每千克體重10 ml蒸餾水稀釋,制成混懸液灌胃；治療組分別予定眩合劑低、高劑量［3.6 ，7.2 ml/(kg·d)］灌胃（本品每毫升含天麻以天

13、麻素計，不得少于0.19 mg）；模型組同時灌胃以相應(yīng)體積的生理鹽水；空白組不予任何處理。此后，每周秤一次體重,根據(jù)體重調(diào)整給藥量。</p><p><b>　　2.3  指標測定</b></p><p>　　2.3.1  腦組織單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的測定腦組織勻漿的制備：實驗用家兔斷頭處死，迅速打開顱腔，在冰浴中迅速分離大腦腦干，放于硫酸紙上稱重，將腦

14、組織放入裝有3 ml預冷生理鹽水中，退去紙重求得腦組織的凈量，按1∶30的比例補充生理鹽水量制成組織勻漿，將組織勻漿倒入帶塞離心管中，振蕩5 min，然后4℃在3 000 r·min-1離心15 min，取上清液，2～8℃冰柜保存酶聯(lián)免疫吸附法測定腦組織NE，5-HT含量。</p><p>　　2.3.2  血液流變學測定每組兔子在清醒狀態(tài)下，心臟穿刺取血, 肝素抗凝。將5 ml 血液放入毛管

15、式自動顯示流變儀中操作, 觀察5組動物全血粘度、血漿粘度與紅細胞壓積的變化。</p><p>　　2.4  統(tǒng)計學處理應(yīng)用SPSS 10.0軟件，實驗所得數(shù)據(jù)均以±s表示,各組間兩兩比較采用F檢驗。</p><p><b>　　3  結(jié)果與分析</b></p><p>　　3.1  各組NE， 5-HT含

16、量的比較  結(jié)果見表1。 表1  定眩合劑對模型家兔NE，5-HT的影響（略）</p><p>　　3.2  各組血液流變學的比較結(jié)果見表2。表2  定眩合劑對模型家兔血液流變學全血黏度的影響（略）</p><p>　　表1結(jié)果表明，模型組腦組織內(nèi)NE、5-HT含量與空白組比較明顯降低（P<0.01）。應(yīng)用定眩合劑后，低劑量治療組兔腦組織內(nèi)NE

17、、5-HT含量無明顯變化（P>0.05），高劑量組與模型組比較差異有顯著性( P<0. 05， P<0.01)，隨著定眩合劑治療量的增加，高劑量組與小劑量組之間有差異（P<0.05），實驗動物腦內(nèi)NE，5-HT含量增高。    　　表2資料經(jīng)統(tǒng)計學處理表明：模型組與空白組比較差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01) ，提示模型組血黏度明顯高于正常組；西比靈組與模型組比

18、較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05) ，提示西比靈無降低血黏度作用；定眩合劑高劑量組與空白組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05) ，提示定眩合劑低、高劑量干預模型家兔后血黏度基本恢復至正常水平。</p><p><b>　　4  討論</b></p><p>　　4.1  定眩合劑對NE、5-HT含量的影響椎-基底動脈的供血是腦部血液供應(yīng)

19、的重要系統(tǒng)。本實驗結(jié)果顯示了實驗動物腦組織單胺類神經(jīng)遞質(zhì)與VBI之間病理生理上的密切關(guān)系。腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)NE、5-HT 是由神經(jīng)細胞合成后儲存于囊泡內(nèi),當動作電位到達神經(jīng)末梢時,在Ca2+ 的參與下通過酶解或再攝取被迅速清除?！irthelmer等［4～6］ 認為中樞神經(jīng)系統(tǒng)缺血期間可刺激腦內(nèi)單胺類遞質(zhì)如5-HT、NE等的大量釋放，這些遞質(zhì)又是Ca2+的激動劑，可開啟Ca2+通道閘門，使Ca2+大量流入胞內(nèi)，神經(jīng)元內(nèi)鈣超載；另一方

20、面，缺血前已合成的神經(jīng)遞質(zhì)大量釋放進入細胞間隙, 細胞間隙蓄積的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)在腦缺血過程中發(fā)揮更多的損傷作用，使神經(jīng)元破壞加劇，最后這些遞質(zhì)一部分被降解,一部分被帶入腦脊液及血液中,終使腦組織中遞質(zhì)含量下降。另有研究表明［7，8］ , 某些神經(jīng)元有單胺類介質(zhì)與肽類物質(zhì)共存, 在腦缺血后, 這兩類物質(zhì)的水平都發(fā)生了改變,β內(nèi)啡肽控制5-HT的含量, β內(nèi)啡肽減少時, 5-HT水平就增高, β內(nèi)啡肽增高時, 5-HT水平就減少, 5-HT

21、含量下降促使β內(nèi)啡肽釋放增加，從而引起通氣抑</p><p>　　4.2  定眩合劑對血夜流變學的影響椎基底動脈供血不足的發(fā)病主要是血流動力學改變所致,少數(shù)可能由微栓子引起,血液流變學與中醫(yī)血瘀的關(guān)系密切,血流流變學指標反映血液的黏滯性、濃稠性、聚集性和凝固性，是血瘀證病理變化的重要參數(shù)。全血黏度主要由紅細胞和變性能力所決定,家兔的紅細胞與人相同，均為無核紅細胞,其聚集性與人相對接近, 當血液黏滯度增高

22、、顯著的高黏狀態(tài),這勢必影響微循環(huán)的灌注; 全血黏度增高則血液流動性差, 最終導致微循環(huán)障礙。當歸及其水溶性成分阿魏酸能抑制血小板釋放5-HT ,后者是血小板聚集的促進劑;阿魏酸也能提高血小板中環(huán)磷酸腺苷(cAMP) 濃度,抑制血栓素A2 ( TXA2 ) 的合成［13］；天麻的有效成分天麻素能抑制血小板粘附,阻止血栓形成。本實驗較全面地反映了不同切變率下的全血黏度變化。與正常組比較,造模后模型組低、高切變率明顯增高,說明本法造?？稍黾?/p>

23、家兔血液的黏滯性。定眩合劑對低、高切變率下的全血黏度有顯著降低作用,從一個側(cè)面證明了定眩合劑確有化瘀作用。根據(jù)本研究結(jié)果，定眩合劑可有效降低VBI家兔明顯升高的全血粘度，增加該模型家兔的腦血流量，降低血黏度。從本文資料分</p><p>　　【參考文獻】  　　［1］Milusheva E，Sperlagh B, Shikova L, et al. Nonsynaptic release of［ 3H

24、］ noradrenaline in response to oxidative stress combined with mitochondrial dysfunction in rat hippocampal slices［J］.Neuroscience,2003, 120 (3) : 771.　?。?］朱明雙，鄭重，黃勇，等.注射硬化劑法制作家兔頸椎病椎動脈型模型［J］.成都中醫(yī)藥大學學報，2000，23（3）：43.