滸苔多糖的酶法提取、純化及初步結構研究.pdf

1、滸苔（Enteromorphα）是一種重要的經(jīng)濟海藻，具有食用和藥用價值。本文以青島海域滸苔為原料，對滸苔多糖的酶法提取、分離純化和結構分析進行了系統(tǒng)研究。
　　 1、比較了不同脫脂溶劑的脫脂效果，結果表明95％的乙醇脫脂效果最好。通過不同提取方法的滸苔多糖得率比較，最終選擇熱水浸提法和熱水-木瓜蛋白酶法進行研究。
　　 2、確立了熱水浸提滸苔多糖的提取分離工藝，優(yōu)化了提取分離工藝參數(shù)，確定了含量分析方法。通過單因素試驗

2、和正交試驗得到滸苔多糖的最佳提取工藝為:提取溫度80℃，時間4h，料液比1∶50，提取2次，得到粗多糖純度為46.29％，滸苔多糖得率為22.53％，蛋白含量0.86％。
　　 3、確立了熱水-木瓜蛋白酶聯(lián)用法提取滸苔多糖的提取分離工藝，通過單因素試驗和正交試驗得到的最佳提取工藝條件為:木瓜蛋白酶用量8％，酶解溫度60℃，酶解3h，料液pH5.5，得到粗多糖純度為50.03％，滸苔多糖的得率27.75％，蛋白含量為0.78％。熱

3、水-木瓜蛋白酶法提取滸苔多糖的效果明顯高于熱水浸提法。
　　 4、通過活性炭，雙氧水對滸苔多糖進行脫色，結果表明:2％的雙氧水脫色率高，多糖損失率最低。采用DEAE-52纖維素柱對滸苔多糖組分進行分離，得到4種系列多糖EP1、EP2、EP3和EP4。EP1的產(chǎn)率為73.22％。將EP1進行葡聚糖凝膠SephadexG-100柱層析、透析、冷凍干燥得到得到易溶于熱水、不溶于乙醇等有機溶劑的白色粉末狀滸苔多糖純品，多糖回收率為95.

4、35％，純度為99.69％。
　　 5、利用紅外光譜對滸苔多糖純品進行測定，結果表明具有多糖的特征吸收峰及硫酸基存在。EP1組分在180-640nm波長間掃描，在260nm和280nm未見有核酸和蛋白質(zhì)的特征吸收峰。
　　 6、采用HPLC法分析滸苔多糖所含的單糖組成，確定色譜條件為:EclipseXDB-C18色譜柱，流動相為0.1mol/L醋酸銨(pH6.7)緩沖液-乙腈(86∶14，v∶v)，流速1.0mL/min