金針菇生活史各階段核相研究.pdf

1、金針菇Flammulina velutipes (Curtis) Singer，是擔(dān)子菌門、膨瑚菌科、小火焰菌屬的一種真菌，是一種在全球均廣受歡迎的著名的食藥用真菌。到目前為止，關(guān)于金針菇的一系列生物學(xué)特性的研究及其食藥用價值在國內(nèi)外均有相關(guān)的研究，但關(guān)于金針菇整個詳細(xì)生活史的報道研究相對較少。本論文對金針菇生活史各階段的核相及出菇機理進(jìn)行了較為全面的研究，主要內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　1.金針菇生活史各階段的人工培養(yǎng)
　　本實

2、驗通過進(jìn)一步的研究改良并優(yōu)化了最適宜金針菇栽培的條件，同時觀察了其生活史各個不同階段的生長發(fā)育情況，觀察不同菌株子實體產(chǎn)生孢子的情況，并且收集不同菌株的孢子進(jìn)行萌發(fā)交配實驗。實驗結(jié)果得出:金針菇的菌絲在形成初期均為白色，但隨著菌絲的不斷繁殖生長，不同菌株的菌絲表面會分泌出黃褐色的色素;發(fā)育成熟的異核體菌絲及部分同核體菌絲可扭結(jié)產(chǎn)生原基，繼而發(fā)育成為子實體。實驗結(jié)果表明異核子實體能產(chǎn)生擔(dān)孢子，擔(dān)孢子可以萌發(fā)，發(fā)育為菌絲體;少數(shù)同核體菌絲也

3、可以產(chǎn)生子實體，但子實體呈畸形，后期不產(chǎn)生孢子。
　　2.金針菇生活史各階段的形態(tài)解剖學(xué)觀察
　　取金針菇的菌絲體、子實體和擔(dān)孢子，制作臨時裝片，用剛果紅溶液染色，普通光學(xué)顯微鏡下觀察，結(jié)果表明:金針菇同核體菌株均無鎖狀聯(lián)合，子實體擔(dān)子上不產(chǎn)生擔(dān)子小梗，不產(chǎn)生孢子;兩不同極性的單核菌絲進(jìn)行交配形成次級菌絲，有明顯的鎖狀聯(lián)合，形成的子實體的擔(dān)子上含有4個擔(dān)子小梗，最后擔(dān)孢子從小梗上脫落。單核菌絲和雙核菌絲都能產(chǎn)生粉孢子。

4、>　　對金針菇生活史各階段的菌絲體、子實體、擔(dān)孢子等進(jìn)行熒光顯微觀察研究。結(jié)果表明:金針菇單個擔(dān)孢子發(fā)育而來的同核體菌絲為單核，無鎖狀聯(lián)合，部分單孢菌株能形成同核子實體，同核子實體的原擔(dān)子中只有1個核，該核在擔(dān)子中進(jìn)行一次有絲分裂形成縱向排列的2個子核，擔(dān)子發(fā)育停止，同核子實體不產(chǎn)生擔(dān)孢子;具有可親和交配型的單孢菌絲經(jīng)過質(zhì)配形成異核體菌絲，異核體菌絲雙核，具有鎖狀聯(lián)合，能形成異核子實體，異核子實體的原擔(dān)子中具有2個核，這2個核經(jīng)過核配融

5、合為1個二倍核，二倍核在擔(dān)子中進(jìn)行減數(shù)分裂形成4個單倍子核，4個子核分別進(jìn)入4個擔(dān)孢子中，隨著擔(dān)孢子繼續(xù)發(fā)育，其中的單核再進(jìn)行一次有絲分裂，成熟擔(dān)孢子為雙核，但這2個核是同質(zhì)的。由單核菌絲和雙核菌絲產(chǎn)生的粉孢子為單核。
　　3.SNPs單核苷酸多態(tài)性在金針菇生活史研究中的應(yīng)用
　　本實驗通過構(gòu)建金針菇基因組文庫，設(shè)計了17對引物，并分析得到了117個SNPs位點。并用這17對引物對不同采集地及不同生長發(fā)育時期的金針菇樣品進(jìn)行

6、PCR擴(kuò)增并測序。SNPs分子標(biāo)記對金針菇生活史各階段的核相進(jìn)行了分子檢測。分子標(biāo)記還證實單核體菌株在栽培出菇的過程中可能會被其它菌株的粉孢子或擔(dān)孢子污染而變成異核體菌株。
　　根據(jù)以上研究結(jié)果，我們構(gòu)建了完整的金針菇生活史:雙核孢子萌發(fā)形成單核初生菌絲，少數(shù)初生菌絲能出菇形成同核子實體，同核子實體擔(dān)子為雙核，不產(chǎn)生擔(dān)子小梗，不產(chǎn)生孢子;兩個不同極性的初生菌絲交配形成次生菌絲，次生菌絲形成異核子實體，子實體擔(dān)子含有4個擔(dān)子小梗，最