家蠶絲腺生物工廠表達(dá)hGM-CSF的研究.pdf_第1頁
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1、蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文家蠶絲腺生物工廠表達(dá)hGMCSF的研究姓名：李曦申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：貢成良20090501ExpressionofhGMCSFinSilkwormSilkGlandBioreactorAbstractExpressionofhGMCSFinSilkwormSilkGlandBioreactorAbstractThehumangranulocytemaerophagecolonysti

2、mulatingfactorOaOM—CSF)isanimportantkindoftheglycoproteinthathastheimmunityadjustmentfunctionitplaysthevitalroleinhemopoiesisregulationandtheimmunityadjustm鋤tandhastheimportantclinicalpracticevalueCurrentlyVerietyofthere

3、combinanthGM—CSFexpressionsystemswereintroduced，andInsectexpressionsystemhasitsownadvantagegraduallycometotheforeBombyxmoHisanimportanttraditionaleconomicalinsectkeepingalonghistoryinourcountryandhasacleargeneticbackgrou

4、ndThelarvaofsilkwormhasapairofhigrdydevelopedsilkglands、析tIltheabilitytosynthesizefibroinAtpresentresearchershavemadeitbecomebioreactorandexpressedmanykindsofproteinsHoweveritstillhasmanydisadvantages，includingeffectindu

5、ction，expressionofexogenousgeneandsteadyheredityoftransgenicindividualTransposonexpressionvectorbasedonpiggyBaewasconstructedsuccessfullyinthisthesisThetransgenicvectorcontainsahGMCSFgenecontrolledbyfibroinH—chainpromote

6、randaneomycinresistancegenecontrolledbybaculovirusearlypromoterBmNcellsweretransfected謝mbotlltransposonvectorandhelperplasmidandscreened晰mantibioticsG418AstableexpressiontransformedcelllineWasobtainedELISAassayindicatedt

7、hattheexpressionlevelofhGMCSFinceUlinewasabout153455pg／106cellsInordertointroducethetransposonvectorintoBombyxmoriseveraltransgenicmethodssuchasspermmediatedgenetransferparticledeliverysystemtransfereggprickingandgonadal

8、injectionwereusedAndscreened麗t11GFPandantibioticsG418，combinedidentificationofPCRandSouthernblottransgenicsilkwormswereobtainedTheresultofwesternblotdisplayedthatthemolecularweightofhGMCSFexpressedbytransgcnicsilkwormsil

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