豬圓環(huán)病毒病防控分析

1、2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,1,豬圓環(huán)病毒病防控措施,何啟蓋 華中農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院國家生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系疫病防控崗位科學家,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,2,獸醫(yī)科學研究的基本思路,基礎(chǔ)研究：提供新理論和新概念，合成新材料：如病原結(jié)構(gòu)、分類、入侵細胞、與宿主互作，致病機理等應(yīng)用基礎(chǔ)研究 （1）研制新型基因工程疫苗、診斷試劑盒、藥物靶標發(fā)現(xiàn)、抗微生物制劑篩選等 （2）以臨床需要為導向，圍

2、繞復雜的臨床現(xiàn)象，發(fā)現(xiàn)原因，尋找解決方法。應(yīng)用研究 臨床觀察、收集數(shù)據(jù)、分析等 制定新規(guī)程和標準等,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,3,我國養(yǎng)豬生產(chǎn)指標的差異,2011年統(tǒng)計，我國母豬數(shù)量4700萬頭左右，母豬年提供出欄豬是14-15頭左右。散養(yǎng)戶較差的生產(chǎn)成績降低了我國養(yǎng)豬業(yè)的整體效益。 如果全群成活率達到90%以上，那么不同日齡階段的成活率指標分別是：哺乳：96%，保育：97%，育肥：98%

3、-99%。,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,4,國內(nèi)外生產(chǎn)性能差距原因的分析,雖然母豬產(chǎn)仔數(shù)相當，但配種分娩率低（85%）：繁殖障礙問題（傳染病與飼料根源）。產(chǎn)房仔豬：腹瀉問題保育豬與生長豬：殘次率高育肥豬：呼吸道問題（綜合癥）,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,5,保育階段豬的主要問題：,斷奶后發(fā)熱（40－41℃）消瘦皮膚蒼白關(guān)節(jié)腫大呼吸道癥狀殘次率高，成活率低（50％－85％）,2013-1

4、1-23,湖北省動物疫病診斷培訓,6,保育豬問題的根源,疾病威脅（1）母源抗體消失（2）病原乘虛而入：豬繁殖與呼吸綜合征病毒；豬2型圓環(huán)病毒；副豬嗜血桿菌；鏈球菌管理因素：斷奶和混群應(yīng)激；飼料的轉(zhuǎn)換；密度增加,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,7,1、病原學 （病毒的特點）2、流行病學（如何傳播）3、致病機制（如何致?。?、臨床癥狀（有哪些表現(xiàn)）5、診斷6. 疫苗研究7、預(yù)防控制措施8. 需要解決的科學問

5、題,豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾病Porcine circovirus-associated diseases,相關(guān)臨床表現(xiàn)：仔豬斷奶衰竭綜合征皮炎腎病綜合征繁殖障礙增生性腸炎先天性震顫急性肺臟水腫（Acute pulmonary edema）,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,8,我們在豬圓環(huán)病毒病研究的歷史,2000年，陳院士獲得第一個由國家資助豬圓環(huán)病毒病研究的課題-國家自然科學基金課題（30170701），開展感染

6、性克隆和病毒基因功能、偽狂犬病-2型圓環(huán)病毒基因工程疫苗研究。2007年：分離出豬2型圓環(huán)病毒W(wǎng)H株和其他毒株。2007年-：國家生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項目資助。2012年7月，獲得新獸藥注冊證書-現(xiàn)在-將來：臨床應(yīng)用技術(shù)的集成。,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,9,1、動物和人類的圓環(huán)病毒,植物：椰樹葉腐爛病毒、三葉草侏儒病毒和香蕉簇頂病毒。禽類：鸚鵡喙羽病毒、鴿圓環(huán)病毒、金絲雀圓環(huán)病毒、鵝圓環(huán)病毒。雞傳染性貧血病毒

7、()；人類：美國在人輪狀病毒疫苗中發(fā)現(xiàn)類圓環(huán)病毒；輸血傳播病毒（TTV），TTV-like minivirus 豬圓環(huán)病毒起源：由植物矮縮病毒（plant nanovirus)和脊椎動物杯狀病毒重組產(chǎn)生（Gibbs and Weiller,1999）,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,10,豬圓環(huán)病毒分類,分為PCV1和PCV2型等?；蚪M1.7kb，是目前發(fā)現(xiàn)最小的脊椎動物DNA病毒。 PCV1目

8、前為止尚未證明致病性。 PCV2存在于多個組織，有致病性。1965年：血清中發(fā)現(xiàn)PCV2病毒；1991年第一個圓環(huán)病毒病案例報道。1998年分離出病毒。,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,11,PCV2 特點,無囊膜，單股負鏈環(huán)狀DNA，基因組大小為1767(PCV2b)-1768bp(PCV2a)能在PK－15細胞生長，但無肉眼可見的病變；其生長依賴細胞周期S期表達的細胞蛋白。用D－氨基葡萄糖處理感染細胞，可

9、促進病毒的增殖。,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,12,豬2型圓環(huán)病毒基因組雖然小，但危害大,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,13,豬2型圓環(huán)病毒主要基因的功能,ORF1：編碼聚合酶，與病毒復制有關(guān)ORF2：免疫原性基因和毒力相關(guān)基因 很多基因工程疫苗或亞單位疫苗使用的靶基因。如表達ORF2的重組偽狂犬病毒、重組沙門氏菌、重組波氏桿菌等。ORF3：引起細胞凋亡ORF4：負調(diào)控病毒的生長其它6個O

10、RF的功能未知,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,14,PCV2 毒株之間ORF2的比較,B.R. Trible, R.R.R. Rowland / Virus Research 164 (2012) 68– 77,受體結(jié)合區(qū),,誘餌表位區(qū),,抗體結(jié)合區(qū),,ORF2與病毒毒力的關(guān)系,兩個氨基酸突變：P110A（傳代30代，脯氨酸P變?yōu)楸彼幔?和R191S （傳代120代 ，精氨酸變?yōu)榻z氨酸）：增殖滴度增加，毒力增強；基因

11、組中1331-1339bp（ gctgtggcc ，位于ORF2基因（1033～1734bp）中）序列差異 （ Krakowka S, ，Virus.Res. 2012，164:90–99 ）:蛋白構(gòu)象改變-疏水變?yōu)橛H水；,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,15,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,16,PCV2感染降低活疫苗免疫效果,1. Oppressing T, McKeown NE, Harmon KL,

12、Meng XJ, Halbur PG. Clin Vaccine Immunol. 2006 Aug;13(8):923-9. PCV 2感染降低了藍耳病活病毒疫苗的功效 另一方面，藍耳病毒感染后，促進圓環(huán)病毒在體內(nèi)的增殖和分布（G.M Allan et al., 2000） 2. Huang YL, Pang VF, Lin CM, Tsai YC, Chia MY, Deng MC, Chang CY, Je

13、ng CR. Vet Res. 2011 Dec 1;42(1):115. PCV 2感染降低了減毒豬瘟疫苗的功效 3. 影響偽狂犬病活疫苗的再次免疫應(yīng)答。Kekarainen(2008)：元兇是PCV2 ORF1中的CpG基序,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,17,豬2型圓環(huán)病毒研究的瓶頸問題-病毒分離的影響因素,PCV1污染，干擾PCV2的分離細胞無病變，很難確定是否感染；不同毒株對細胞適應(yīng)性有

14、差異,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,18,豬圓環(huán)病毒2型WH株的分離,PCR陽性病料接種細胞，在第5、10、15、20 代細胞培養(yǎng)物中，通過間接免疫熒光試驗( IFA) 、普通PCR、熒光定量PCR鑒定均為PCV2陽性,于第20代后毒價顯著升高。,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,19,PCV2-WH株分離鑒定,熒光定量PCR鑒定，分離毒株(WH株)拷貝數(shù)為5.84×108/0.1µg,2

15、013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,20,PCV2-WH株基因組序列,GenBank 登錄號為FJ598044 PCV2-WH株基因組為PCV2b,此外，也分離了9株圓環(huán)病毒,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,21,我國流行毒株為PCV2b,235 ORF2－PCR為陽性的病料中， 9株為PCV2 2a基因型 133份為PCV2 2b基因型 98份：為非2a和2b，推測為2c（丹

16、麥存在）PCV2b毒力高于PCV2a基因型呈地方分布特征同一個豬場有PCV2a和2b同時存在,采用：ORF2 和全基因組測序；區(qū)分不同基因型的PCR等方法,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,22,分離毒株接種豬的皮炎病例-分離出新的基因型毒株，PCV2d;,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,23,新的病毒基因型不斷出現(xiàn),臺灣： 2001-2003：PCV2a: 22.9% 2003-2011

17、: PCV2b: 77.1% 我國大陸（2012年） PCV2b-1C (2a和2b的ORF2之間重組)； PCV2d; PCV2b變異株（2a的ORF1 與2b的ORF2重組）,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,24,2、流行病學特征,哪些因素與疾病的發(fā)生有關(guān)？,國家生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項目資助,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,25,流行規(guī)律,傳染

18、源傳播途徑易感動物其它誘發(fā)因素（X因子）共感染因子,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,26,2-1 傳染源與傳播途徑,病豬的糞尿、鼻腔能排毒；帶毒公豬的精液（檢測到3-4log10核酸/ml精液）感染后5天可檢測到。間歇排毒51天（PCV2a)和81天（PCV2b)。垂直傳播：繁殖障礙病乳汁帶毒(Madson et al., 2009; Gerber et al.,2011).發(fā)熱期豬的血清（全血）中可檢測到

19、病毒蚊子傳播,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,27,2-2易感動物,不同年齡的豬均可感染：胎兒，哺乳舍的小豬等感染后較為嚴重。日齡越小，癥狀越嚴重。 Catherine： 1－7日齡；無母乳。需要大量的病毒（接種量為≥107.0TCID50）其它動物：小鼠為模型,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,28,2-3 其它因子的參與,傳染性因子 協(xié)同作用：細小病毒（復制病例） 促進作用：肺炎

20、支原體感染； 豬繁殖與呼吸綜合征病毒非傳染性因子 應(yīng)激：多次注射（疫苗，藥物）。X因子：其它未知因子（？？）,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,29,PCV2和PRRSV與HPS, 鏈球菌的混合感染,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,30,3、致病機理,損害免疫系統(tǒng)，降低機體免疫力是新的免疫抑制病之一（藍耳病、霉菌毒素中毒、豬偽狂犬病，豬支原體肺炎）,國家生豬現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技

21、術(shù)體系項目資助,主要病理特征-淋巴細胞減少，其他細胞增生（Annu. Rev. Anim. Biosci. 2013. 1:43–64）,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,31,the PCV2-associated lymphoid depletion and histiocyticto-granulomatous replacement of the follicle with multinucleated giant

22、cells in the center.,the PCV2-induced lymphoid depletion in the tonsils and PCV2-specific antigen(brown staining),2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,32,單獨感染的致病機理,1、感染單核巨噬細胞和樹突狀細胞，但不復制。 單核吞噬細胞——非特異殺傷外來病原 樹突狀細胞：抗原遞呈功能

23、2、細胞因子的水平：IL-2、IL-4、IL-10、IL-12的mRNA 下降，T細胞免疫抑制。3、引起淋巴細胞的凋亡，導致B和T淋巴細胞數(shù)量的減少（？）4、III型過敏反應(yīng)，引起皮炎和腎?。涸颍涸缙诟腥净蚋咚娇贵w,致病機制-感染PCV2后PAM轉(zhuǎn)錄組學研究,芯片分析，發(fā)現(xiàn)大量的炎性相關(guān)因子上調(diào)表達，這可能是PCV2引起全身性炎癥反應(yīng)的內(nèi)在原因。大量抗原遞呈相關(guān)基因上調(diào)表達，這些基因的上調(diào)會誘導機體的細胞免疫。大量細胞增殖

24、相關(guān)及細胞凋亡基因差異表達，說明PCV2能調(diào)節(jié)細胞的生長周期，最大限度的增殖病毒。抑制NFκB信號通路相關(guān)基因被鑒定，說明PCV2感染后能導致機體的免疫抑制。,炎癥反應(yīng),炎癥是臨床常見的一個病理過程，可以生于機體各部位的組織和各器官，例如扁桃體炎、肺炎、腎炎等。急性炎癥時具有紅、腫、熱、痛、組織/器官功能衰竭等變化，同隨時常伴有發(fā)熱、白細胞增多等全身反應(yīng)，實質(zhì)上是機體與致炎因子進行抗爭的結(jié)果。,炎癥反應(yīng)的信號轉(zhuǎn)導,,圖解見備注,

25、轉(zhuǎn)錄因子NF-κB,NF-κB是最早由Sen和Baltimore首先從B淋巴細胞核提取物中檢測到的一種能與免疫球蛋白鏈基因增強子кB序列特異結(jié)合的核蛋白因子。NF-κB是一種重要的核轉(zhuǎn)錄因子, 在機體的免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)和細胞的生長發(fā)育等方面發(fā)揮重要作用。,NF-κB/Rel family,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,37,實驗室混合感染模型,革蘭氏陰性細菌感染： 副豬嗜血桿菌血清4型和5型、豬鏈球菌與PCV2

26、混合感染研究： LPS為PCV2增殖促進因子，與Chang et al., 2006結(jié)果一致。,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,38,感染PCV2的不同結(jié)局,B.R. Trible, R.R.R. Rowland / Virus Research 164 (2012) 68– 77,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,39,4、臨床癥狀,（1）、斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）（2）、皮炎與

27、腎病綜合癥（PDNS）（3）、繁殖障礙：妊娠早期流產(chǎn)（4）、先天型性震顫：[1][2][3]（豬瘟？）,國家生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項目資助,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,40,4-1、斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）,臨床表現(xiàn)：發(fā)熱，消瘦，衰竭病理變化：脾臟壞死、腹股溝或腸系膜淋巴結(jié)腫大；肺間質(zhì)水腫（肺炎）,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,41,A thin undersized pig affected

28、 by PMWS（斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征）,The accentuated spine (明顯突出的脊椎) reflects the growth retardation (生長停滯) in pigs with PMWS.,Clinical symptoms （Jimmy Kwang, TLL, NUS),相同日齡豬生長速度不同，豬群整齊度差,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,42,,,2013-11-23,湖北省動物疫病

29、診斷培訓,43,流行病學特征,,來自臨床第一線的圖片：腫大的腹股溝淋巴結(jié),2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,44,,,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,45,心肌冠狀溝膠凍樣,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,46,圓環(huán)病毒病Vs 大腸桿菌水腫病,2011.3.23西安,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,47,肺間質(zhì)增寬，水腫,弓形體；巴氏桿菌藍耳??？？,2013-11-23,湖北省動

30、物疫病診斷培訓,48,4-2、皮炎與腎病綜合癥（PDNS）,死亡率低，可以自行康復，影響種豬外觀。 ；圓環(huán)斑：紫色，與周圍正常皮膚的界限清楚；豬無癢感； 與缺鋅、疥螨病和壞死性皮炎的區(qū)別皮膚不呈油膩狀（干躁）本質(zhì)上是一種過敏反應(yīng)（早期感染后，再次感染），免疫復合物沉積所致,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,49,,,圓環(huán)病毒：皮炎,2013-7-6,拜耳長沙BET會議,50,2013.6.18.網(wǎng)絡(luò)咨詢

31、，50-80kg豬，死亡。PCV2引起的皮炎,,2013-7-6,拜耳長沙BET會議,51,鑒別診斷：母豬鋅缺乏癥,2013-7-6,拜耳長沙BET會議,52,滲出性皮炎,,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,53,4-3 母豬圓環(huán)病毒皮炎與繁殖性能下降,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,54,4-4 PCV2引起先天性震顫和腹瀉,病毒見于神經(jīng)元的胞核和胞質(zhì)內(nèi)，細胞核呈強陽性，少量的小膠質(zhì)細胞呈陽性。,小腸：黏膜

32、固有層內(nèi)淋巴細胞和樹突狀細胞胞漿呈陽性,2013-6-19,株洲會議,55,（5）急性肺臟水腫,肺臟實變胸腔積液病豬突然死亡,JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, May 2011, p. 2012–2016 Vol. 49, No. 5,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,56,5、診斷方法的應(yīng)用,（1）病原學檢測：用于精液中病毒的檢查（2）血清學檢測：評價免疫整齊度，不用于感染的診斷

33、或調(diào)查。（3）綜合判定：結(jié)合臨床特征，排除影響豬生長的其它疾?。焊篂a耐過豬、寄生蟲病豬、飼料質(zhì)量不良,國家生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項目,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,57,實驗室檢測方法,5-1、病原檢測 （1）病毒分離鑒定：PCV2 WH株 （2）PCR：區(qū)分PCV1和PCV2 區(qū)分PCV2病毒兩種基因型（2a,2b,2c?)：不同基因型的毒力差異？ （3）基因組測序：檢測病毒的變異

34、（4）熒光定量PCR：測定PCV2病毒載量 （5）免疫組化：發(fā)現(xiàn)組織中的病毒抗原,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,58,PCV2全基因序列PCR擴增,注：1、2、3陽性結(jié)果；大小 1767bp或1768bp,引物：P1：5’- GTA CCT TGT TGG AGA GCG GG -3’ P2：5’- TCA CAG CAG TAG ACA GGT CA-3’，,PCR反應(yīng)體系50μL：模板1μL，10×

35、Buffer5μL，dNTP4μL，引物均為0.4μΜ；反應(yīng)條件：95℃2 min，94℃1min， 58℃1 min，72℃2 min。,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,59,以血液為樣品進行圓環(huán)病毒2型病原學檢測,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,60,PCV2基因分型PCR方法的初步應(yīng)用,注：樣品6、21 為單純PCV2a陽性； 樣品1、4、5、6、7、8、9、15、16、17、18、19

36、、20為PCV2b陽性結(jié)果；21為陽性對照；22為陰性對照；M為DL2000,PCV2a-PCR,PCV2b-PCR,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,61,,實時定量PCR檢測豬2型圓環(huán)病毒,R2：0.997178,PCV2F：5’-CCAGGAGGGCGTTCTGACT-3’； PCV2R：5’-CGTTACCGCTGGAGAAGGAA-3’； Probe PCV2S：5’AATGGCATCTTCAACA

37、CCCGCCTCT-3 本方法用于評估感染或攻毒豬的病毒血癥高低和病毒培養(yǎng)的含量測定。,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,62,5-2、抗體檢測,ORF2－ELISA和免疫酶單層過氧化物酶試驗：未免疫豬群感染調(diào)查、免疫豬群免疫狀況評估中和試驗：與保護力有關(guān)（一般在免疫后3周）；同時，γ-干擾素水平也與保護力相關(guān)。,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,63,6. 疫苗研究,6.1、滅活疫苗 （1）免疫原選

38、擇：不同病毒株；桿狀病毒或PCV1表達PCV2衣殼蛋白（Cap蛋白）。 （2）免疫原的制備：轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)；懸浮培養(yǎng) （3）病毒的滅活：甲醛（使蛋白質(zhì)變性）；BEI（破壞核酸） （4）劑型：水包油，油包水，,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,64,疫苗制備毒株的選擇,歐洲的流行毒株基因型也已經(jīng)從PCV2a演變?yōu)镻CV2b.采用我國流行毒株P(guān)CV2b基因型來源于PCV2a的疫苗不能提供在PCV2、PPRSV

39、和PPV混合感染情況下，針對PCV2b毒株及PCV2a/2b的完整保護力 --Opriessnig et al., 2013, A PCV2 vaccine based on genotype 2b is more effective than a 2a-based vaccine to protect against PCV2b or combined PCV2a/2b viremia in pigs with concur

40、rent PCV2, PRRSV and PPV infection, Vaccine, 31(3),487-94,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,65,病毒的滅活方式,PCV2抵抗力強，傳統(tǒng)方法（甲醛）很難滅活。該試劑只破壞病毒表面蛋白。BEI滅活劑的選擇：可破壞核酸，摧毀病毒復制能力，但是不破壞病毒的免疫原性蛋白。作為免疫原，保持其空間構(gòu)像是關(guān)鍵因素之一。如大腸桿菌表達的ORF2蛋白，免疫后能產(chǎn)生抗體，但無中和

41、活性。,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,66,病毒滅活后細胞傳代檢驗-滅活徹底,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,67,獲得國家新獸藥注冊證書,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,68,豬圓環(huán)病毒病新型疫苗研究,6.2、弱毒疫苗： PCV2 ORF3基因缺失毒株 PK-15連續(xù)傳120代致弱（ORF2中：110位氨基酸: 脯氨酸 to 丙氨酸; 191位氨基酸: 精

42、氨酸 to 絲氨酸）6.3 基因工程疫苗 以偽狂犬病為載體 以減毒沙門氏菌為載體6.4 DNA疫苗,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,69,疫苗實驗室評價指標,（1）體溫反應(yīng) （2）病毒血癥（定性或定量）（臨床試驗中也需要測定的指標） （3）抗體水平（ELISA抗體） （4）免疫后攻毒豬的病理變化 （5）免疫組化觀察病毒在淋巴結(jié)的分布,2013-11-23,湖北

43、省動物疫病診斷培訓,70,效力試驗中組織病理學評價—肺臟,106 TCID50,輕度肺泡壁充血,107 TCID50,未見明顯的病理變化,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,71,效力試驗中組織病理學評價-淋巴結(jié),未免疫攻毒組,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,72,組織學病理變化——淋巴結(jié),正在變性,網(wǎng)狀細胞的變性壞死,未免疫攻毒組,105 TCID50 免疫組,淋巴濾泡網(wǎng)狀細胞變性壞死,2013-11-23,湖

44、北省動物疫病診斷培訓,73,組織學病理變化——淋巴結(jié),106 TCID50 免疫組,淋巴竇出血,107 TCID50免疫組,未見明顯的病理變化,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,74,6、疫苗臨床評價,（1）提高保育豬或全程的成活率（2）提高豬群的整齊度（3）提高飼料報酬（4）降低其他疾病混合發(fā)生（5）經(jīng)濟效益提升,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,75,經(jīng)濟效益分析,保育階段的經(jīng)濟效益,育肥階段的經(jīng)濟效

45、益,對于年出欄1萬頭規(guī)模的豬場，出欄豬的平均重95千克，將增加的效益大約為：【21.35+（23-8）×0.33+11.7+（95-23）×0.24】×10000=552,800元,,,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,76,如何正確使用疫苗？,是否應(yīng)該使用疫苗：保育階段成活率低于90％時；皮炎出現(xiàn)，預(yù)示保育階段感染。疫苗只起預(yù)防作用，不作為治療目的。高水平中和抗體可清除病毒。在3－4周齡使

46、用，可取得預(yù)期的效果干擾素對本疫苗沒有影響。其它注意事項：疫苗的保管，注射前平衡到室溫；針頭消毒,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,77,豬圓環(huán)病毒病疫苗不同免疫程序的優(yōu)缺點,母豬免疫：節(jié)省費用；是否有繁殖障礙；仔豬能否獲得均一的抗體水平，需要測定。仔豬免疫：費用相對高，工作量大；但仔豬群體免疫整齊。母豬與仔豬都免疫：最佳，但成本高、工作量大。,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,78,7、防治措施,免疫

47、預(yù)防：是目前公認的最適預(yù)防措施控制繼發(fā)感染： 主要是副豬嗜血桿菌與鏈球菌的感染 個人建議：豬圓環(huán)病毒+副豬嗜血桿菌：解決保育豬殘次問題加強飼養(yǎng)管理 優(yōu)質(zhì)的飼料（原料）：不使用霉變飼料 添加谷氨酰胺和精氨酸減輕PCV2感染小鼠的繁殖障礙問題（Ren W, Yin.Y, 2011, 2012, Amino acid）,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,79,8. 控制豬圓環(huán)病毒病，仍

48、需解決的科學問題,（1）病毒與宿主免疫系統(tǒng)相互作用（2）哪些風險因子是必須條件，兩者如何互作？（3）區(qū)分滅活苗免疫和感染豬的方法（4）敏感細胞系的構(gòu)建與應(yīng)用 （5）不同基因型之間的重組和新病毒的產(chǎn)生（6）混合感染及其防控,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,80,鳴謝：研究團隊+國內(nèi)外企業(yè),武漢科前、南京天邦、武漢中博和中牧股份、法國梅里亞公司等國內(nèi)外企業(yè)的幫助！,2013-11-23,湖北省動物疫病診斷培訓,81,