豬瘟與肺炎枝原體的免疫

1、關于豬瘟免疫的幾個問題,閆之春安平2007-10,提要,我的豬群是否流行豬瘟野毒？用什么方法確定？多大比例？我的豬群應如何做免疫控制？要不要免疫？哪些群組？何時免疫？免疫效果如何？用什么指標衡量？,如何面對一家豬場的疫情？管理學的視角,做出診斷：依據(jù)什么說是這種??？選擇監(jiān)測指標：先定義采取措施：測量/監(jiān)控指標改善提高！,定義測量控制改善！,,豬瘟-診斷要有標準,“我場剛出生的仔豬，腎臟回盲口有出血點，看

2、來有溫和豬瘟”“我場保育期仔豬發(fā)燒，送檢發(fā)現(xiàn)藍耳病抗體很高，死亡增加，腎臟、回盲口有出血點，看來是藍耳病散發(fā)豬瘟”“我場仔豬、母豬，豬瘟抗體大部分‘不合格’，中豬死亡增多，可能是散發(fā)豬瘟”“……”,豬瘟-診斷要有標準,豬瘟這次全國疫情有豬瘟嗎？某一頭豬是否感染豬瘟野毒？豬群這次疫情是否豬瘟？,豬瘟-診斷要有標準,豬群、活體、時效！臨床癥狀：？病理變化：？病毒學：分離？？PCR熒光抗體反向間接血凝血清學

3、:熒光抗體血清中和試驗(普通、競爭、間接)ELISA……..,豬瘟-診斷要有標準,580母豬，2006年12月, 母豬群流產(chǎn)之后，，5-8周齡保育豬約一半發(fā)燒，前后送檢15頭，2中心：,豬瘟-診斷要有標準,1,200母豬，2007年6月初3周齡哺乳豬4/12欄發(fā)燒，前后送檢7頭，2研究所：,豬瘟-診斷要有標準,以什么標準‘覺得’有豬瘟呢？大體病變出血點！臨床、大體病變?nèi)绾闻c霍亂沙門氏菌病鑒別？甚至中大豬潰瘍！依據(jù)很不充分！

4、豬瘟抗體尚沒有區(qū)分野毒vs疫苗毒的抗體檢測方法：種豬場銷售案例使用了什么方法測抗體？有的豬場經(jīng)常在測不到豬瘟抗體+見到一些出血點時懷疑發(fā)生了豬瘟---如果真是豬瘟野毒感染，抗體在5d以內(nèi)便會大很高！,豬瘟-診斷要有標準,以什么標準‘覺得’有豬瘟呢？抗原檢測小心！ELISA特異性受到廣泛質疑PCR如何區(qū)分是疫苗毒的RNA? 不能！盲樣的重復性經(jīng)常受質疑分離病毒不實際,豬瘟-診斷要有標準,PCR、ELISA送檢，至

5、少15個樣本，一定要設最少15%的(相同豬、同天采樣)重復樣本，重復性好，才能使用這次檢測的結果。別人無法重復的檢測方法不是科學,豬瘟-診斷要有標準,豬群的流行率是多少？抽檢多少頭？抽檢什么豬？,豬瘟-診斷要有標準,許多獸醫(yī)已經(jīng)習慣于熟悉的30個樣本數(shù)（假如流行率≥10%，置信區(qū)間在95%，30個樣本數(shù)足以檢測出至少1頭陽性）。當流行率是5%，從一個大的群體中挑選30個樣本，其中不包含1頭單一發(fā)病動物的可能性超過20%。 但是

6、，重要的是我們要記?。寒斄餍新时容^低時，用30個樣本來診斷疾病的可靠性會不夠。要明確目的：檢測疾??？估計流行率或發(fā)病率？ 群體大小、預期流行率、置信區(qū)間、檢測方法的敏感性/特異性當流行率非常高（> 90%）或者非常低時，估計流行率所需的樣本數(shù)量相對較少 缺少預期流行率的資料，一個保守的方法是使用表示50%流行率的樣本數(shù)目。再者，這些指導方針是假定理想的檢測性能，依據(jù)檢測性能的參數(shù)可能需要加以修改。,從5%或10%流行率群體

7、中挑選30個樣本中的預期感染數(shù),估計疾病流行率在10%以內(nèi),置信區(qū)間為90%或95%（假定理想的方法），預期流行率對樣本數(shù)量的影響,豬瘟-診斷要有標準,以什么標準‘覺得’有豬瘟呢？USDA 資助 AASV 的報告標準,豬瘟-診斷要有標準,以什么標準‘覺得’有豬瘟呢？USDA 資助 AASV 的報告標準臨床病例的定義,豬瘟-診斷要有標準,臨床個案定義 由于豬瘟的臨床癥狀類似于許多其它流行病，本個案定義旨在幫助確定是否報

8、告該病例。當一個豬群在很大程度值得懷疑且符合一項或者一項以上的下述臨床特征，這個豬群則應報告。1）豬群中具有臨床癥狀的病例2）豬群中具有臨床上一致的病例，包括：尸體剖檢證實腎臟、膀胱、淋巴結、 喉頭等器官的出血，或者其它敗血病 的癥狀3）豬群中具有臨床上一致的病例：3個月前要么從國外進口過有關豬的遺傳物質（材料）、飼料污染，或者與最近參觀過國外農(nóng)場的人有過接觸。,豬瘟-診斷要有標準

9、,臨床癥狀描述 感染豬可以表現(xiàn)持續(xù)發(fā)燒，皮膚變色，結膜炎、神經(jīng)癥狀，呼吸窘迫、流產(chǎn)和下痢，并且對抗生素治療無效。白細胞減少是一致的發(fā)現(xiàn)。,豬瘟-診斷要有標準,圖1 腎皮質的點狀出血,豬瘟-診斷要有標準,圖2 扁桃體的多處壞死灶,豬瘟-診斷要有標準,圖3 脾臟的梗死灶,豬瘟-診斷要有標準,圖4淋巴結的周邊出血,豬瘟-診斷要有標準,不要看見出血點輕易下結論 某次發(fā)病有豬瘟鑒別診斷沙門氏菌病急性巴氏桿菌病非洲豬

10、瘟香豆素中毒丹毒副嗜血桿菌其它病毒性腦脊髓炎鉤端螺旋體病圓環(huán)病毒相關病（PCVAD）藍耳病豬鏈球菌病其它敗血性疾病,豬瘟-如何免疫？,C-株疫苗特點：一般情況下 抗體產(chǎn)生之前，有沒有保護性的體液免疫？接種約6d后，即應該有。-Aynaud, Corthier 1976; Terpstra 1988接種3天后即應產(chǎn)生堅強免疫力，中和抗體通?？稍?周后產(chǎn)生，并可持續(xù)4-12周。斷奶仔豬接種后的免疫期可長達1年半。-B

11、iront, Leuner 1987, Terpstra 1990, Dahle 1995, Bounma 2001對中等毒力（2.2基因亞群）及僅引起繁殖障礙的低毒力株保護性也很好。Yu, Tu, 2001,豬瘟-如何免疫？,C-株疫苗：注意接種7d后脾臟、血液中上可檢出病毒,偶爾可通過接種豬傳染給接觸豬。用MPK細胞培養(yǎng)的C-株疫苗接種豬的血樣中經(jīng)?？捎肞CR檢出病毒。用強毒攻擊后1-4d (!) 再用C-株疫苗免疫，試驗仔豬

12、全部死亡。所謂應急免疫接種實際是不可行的。 Urbaneck, Tesmer, 1973仔豬的母源抗體越高，對疫苗免疫的抑制作用就越強！不同類型、病毒量、制作方法的C-株疫苗， 抗體的應答完全不同??！ 仇華吉 2004,豬瘟-如何免疫？,仔豬母源抗體越高，對面疫苗免疫的抑制作用就越強！不同類型、病毒量、制作方法的C-株疫苗， 抗體的應答完全不同那么，我的豬場應該怎么做？用哪種疫苗？抗體產(chǎn)生、持續(xù)、消失的規(guī)律怎樣？在何時進行第

13、一接種？,豬瘟-如何免疫？,所用的疫苗有資料嗎？妊娠早期接種是否會增加死產(chǎn)仔數(shù)？接種后多長時間能產(chǎn)生保護？母豬？保育仔豬？中大豬？保護抗體可以持續(xù)多長時間？母豬？保育仔豬？中大豬？,豬瘟-如何免疫？,所用的疫苗沒有資料唯一的辦法就是自己做實驗！哪些試驗？測什么？用什么方法測？ELISA抗體檢測仍然是重復性最好的方法！3項試驗抗體產(chǎn)生規(guī)律試驗：免疫前的抗體水平、免后是否產(chǎn)生抗體？產(chǎn)生時間？母豬、仔豬、大豬

14、母源抗體的水平及消失規(guī)律：連續(xù)測定不同年齡段豬的抗體檢測：群體抗體檢測,豬瘟-如何免疫？ 3項試驗,1 抗體產(chǎn)生規(guī)律試驗：免疫前、后是否產(chǎn)生抗體？時間？母豬、仔豬、大豬1）各選30頭豬2）接種前測ELISA抗體-是否已經(jīng)有抗體？3）接種15天、30天、45天測考察疫苗的效果,豬瘟-如何免疫？ 3項試驗,2 母源抗體的水平及消失規(guī)律：對確定仔豬的最佳首免時間極為重要 1）紀錄母豬的免疫時間2）選40頭未吃初乳的

15、仔豬（野毒感染的風險？），不接種豬瘟疫苗，連續(xù)采血測ELISA抗體3）出生后7天、14天、21天（斷奶時）、28天、42天、63天（出保育）測建議ELISA阻斷率30%以下的仔豬占20%時（認為豬群已受到明顯威脅）做首免。,仔豬日齡,豬瘟-如何免疫？ 3項試驗,2 母源抗體的水平及消失規(guī)律：仍有80%的仔豬有母源抗體20%低過0.3的阻斷率，是為了覆蓋這部分的‘受威脅’的豬，應該評估你的豬場所受的威脅，可能有80%時作首免也不遲

16、。,豬瘟-如何免疫？ 3項試驗,3 不同年齡段豬的抗體檢測：群體抗體監(jiān)測首免日齡前，抽檢25頭首免后（最好在某飼養(yǎng)階段末，如出保育，生長I期結束）20天抽25頭根據(jù)妊娠母豬的免疫方案（普防？跟胎？）抽2組各25頭即可。如果是同一分場內(nèi)，總計約75-100頭,豬瘟：結語與建議,不要輕易懷疑是豬瘟發(fā)病-正常免疫豬場的野毒陽性率可能非常低；多數(shù)豬場尚未科學檢測、科學抽樣；臨床癥狀+PCR確診。送檢PCR/ELISA有重復樣；

17、相同豬連續(xù)監(jiān)測抗體是好辦法。更換疫苗必須評估磨刀不誤砍柴工建議母豬產(chǎn)前/配種前接種，沒必要一年3次以上普防；根據(jù)母源抗體消失情況，仔豬免疫1-2次已非常充分。,枝原體肺炎,攻擊、破壞氣管上皮的纖毛，破壞了呼吸系統(tǒng)抵御有害微生物入侵的機制主要影響 ：生長豬的飼養(yǎng)成本平均日增重、飼料轉換率、肺成品率、藥物成本死亡率PRRS活躍場、SIV時更易繼發(fā)感染其他呼吸系統(tǒng)病,,地方性肺炎的成本,1982,使用疫苗的盈虧平衡點,疾

18、病成本,疫苗成本,總成本,平均肺部病變評分,枝原體肺炎-何時免疫？,大部（？）豬感染之前，應有疫苗保護又能避開母源抗體的干擾母源抗體有干擾嗎？,枝原體肺炎-何時免疫？,大部（？）豬感染之前，應有疫苗保護但是文獻及試驗數(shù)據(jù)表明，血清抗體轉陽的時間可能是11-24周齡，很大的范圍，究竟我的豬場肺炎枝原體感染的時機主要是哪個年齡段呢？不測不知道！,枝原體肺炎-何時免疫？,又能避開母源抗體的干擾母源抗體有干擾嗎？,枝原體肺炎-何時免

19、疫？,16周攻毒，21周評肺.Jayappa, H., Davis, R., (2001) 母源抗體降低時再接種更好!,不同周齡、不同母源抗體水平下疫苗接種的效果,肺變評分,接種前母源抗體水平,實驗組,枝原體肺炎-何時免疫？,Thacker et al (2002) 母源抗體降低時在接種要好（6-9周齡）!,枝原體免疫周齡、母源抗體水平對單針免疫的影響,,母豬免疫,母豬未免疫,14周攻毒，18周屠宰評分肺臟,枝原體肺炎-何時免疫？,

20、母源抗體降低時接種好!產(chǎn)前免疫過母豬的豬場，根據(jù)不同的斷奶日齡，仔豬枝原體免疫可能應該推遲可能推遲到出保育時根據(jù)新的免疫學研究，美國的不少專家認為即便母豬不接種，仔豬的首免也應是10-12周齡。,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,每個豬場都是不同的！斷奶日齡及豬舍通風質量可能是影響枝原體流行程度的最重要因素。飼料越貴，越應考慮免疫接種。只有用自己的豬群做過試驗才知道，而且要定期做。,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,只有用自己的豬群做過試驗

21、才知道，而且要定期做。Excel 案例12個保育生長肥育場，藍耳病陽性但穩(wěn)定場的后代各2次重復共約900豬，用3種疫苗免疫方案，統(tǒng)計自斷奶到肥育一期,稱重5次分析死亡率、平均日增重的差異,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,正確的結果解釋：2005年，該豬場一胎母豬的后代仔豬，7、21日齡免疫2針某品牌的枝原體苗可以提高平均日增重59克（p<0.01),枝原體肺炎-免疫有效嗎？,,,,枝原體肺炎-

22、免疫有效嗎？,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,只有用自己的豬群做過試驗才知道，而且要定期做。Excel 案例2， 同一公司3個保育-肥育場，1個來自藍耳病隱性群，2個來自藍耳病陽性、但穩(wěn)定場的后代共約1,200豬，用4種疫苗免疫方案，統(tǒng)計自斷奶到肥育一期,稱重5次分析死亡率、平均日增重的不同豬場、性別、胎次差異使用了復雜的單變量一般線性模型分析處理間的差異，皮爾孫檢驗分析死亡率,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,枝

23、原體肺炎-免疫有效嗎？,結論：各個免疫方案之間及其與對照組之間均無差異。這家公司、目前的豬群，是否免疫枝原體疫苗沒有區(qū)別。,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,只有用自己的豬群做過試驗才知道，而且要定期做。Excel 案例3， 廣西-更大規(guī)模、更系統(tǒng)的實驗已進入數(shù)據(jù)處理階段2個生長肥育群；用5種疫苗免疫方案，統(tǒng)計自斷奶到肥育2期；分析死亡率、平均日增重、飼料效率、咳嗽指數(shù)、屠宰肺部評分、不同時間的抗體水平變化。敬請期待！,枝原體肺