實驗室生物安全講座二

1、實驗室生物安全,,,2,第四章 實驗室生物安全的主要設(shè)備與儀器,3,,4,常用可防護(hù)生物危害的儀器裝備,移液器,生物安全柜,高壓滅菌鍋,滅菌器,一次性接種環(huán),護(hù)目鏡,防護(hù)服,,目的：隔離操作者和感染性樣本，防止操作人員被感 染安全設(shè)備 --- 生物安全柜 個體防護(hù)裝備 --- 防護(hù)服；安全眼睛；手套鞋套；呼吸防護(hù)裝置；緊急沖洗裝置等。,華盛頓大學(xué)中學(xué)生游戲 －防護(hù),5,第一節(jié) 生物安全柜,6,一、生物安全柜概述,

2、（一）概念： 生物安全柜（biological safety cabinet,BSC） 是操作有感染性的材料時，用來保護(hù)操作者本人、實驗室環(huán)境及實驗材料，使其避免暴露于操作過程中產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計的負(fù)壓排氣柜。,7,生物安全柜的基本設(shè)計已經(jīng)歷了多次改進(jìn)。主要的變化是在排風(fēng)系統(tǒng)增加了HEPA（High Effieiency Particulate Air Filter）過濾器。對于直徑0.3μm

3、 的顆粒，HEPA 過濾器可以截留99.97%，而對于更大或更小的顆粒則可以截留99.99%。HEPA 過濾器能夠有效地截留所有已知傳染因子，并確保從安全柜中排出的是完全不含微生物的空氣。生物安全柜設(shè)計中的第二個改進(jìn)是將經(jīng)HEPA 過濾的空氣輸送到工作臺面上，從而保護(hù)工作臺面上的物品不受污染。,8,生物安全柜的選擇,9,,1. I級生物安全柜,I 級生物安全柜能夠為人員和環(huán)境提供保護(hù)，但不提供產(chǎn)品保護(hù)。用途：I級生物安全柜被用作特殊

4、的密封設(shè)備（例如離心、收獲設(shè)備或小的發(fā)酵設(shè)備）或可能產(chǎn)生氣溶膠的操作過程（例如倒籠子的垃圾，通氣培養(yǎng)或組織攪拌）。也可用來操作放射性核素和揮發(fā)性有毒化學(xué)物品 。,10,B型,,2. II級生物安全柜,II 級生物安全柜能夠為人員、環(huán)境和產(chǎn)品提供保護(hù)。 用途：進(jìn)行生物安全水平1、2、3級相關(guān)的操作。,A型,11,II級生物安全柜的種類,,12,II級A2型生物安全柜,13,3. III級生物安全柜,14,生物安全柜的選擇,15,二

5、、生物安全柜的使用,（一）個人防護(hù)要求：①使用生物安全柜時必須穿個人防護(hù)服，戴手套（手套應(yīng)套在隔離衣的外面）②最好帶口罩和帽子，根據(jù)需要帶防護(hù)眼罩或者面罩。③工作之前，操作者應(yīng)調(diào)節(jié)凳子高度確保自己的臉在開口之上。,,16,（二）生物安全柜內(nèi)物品擺放原則：①按照從潔凈區(qū)到污染區(qū)的方向擺放。②所有物品盡可能放在遠(yuǎn)離前格柵，靠近操作臺后緣的位置。③將廢棄物袋、盛放廢棄吸管的托盤以及吸濾瓶等體積較大的物品放在柜內(nèi)某一側(cè)。④前格柵不

6、能被實驗記錄本、儀器設(shè)備或者其他物品阻擋。,,17,,（三）生物安全柜的操作流程:,18,（四）生物安全柜的使用注意事項,①安全柜只有在工作正常時才能使用。②雙臂垂直緩慢進(jìn)入前面的開口，在生物安全柜中等待大約一分鐘，以使安全柜調(diào)整完畢后才可對物品進(jìn)行處理。③廢棄物應(yīng)丟棄在生物安全柜內(nèi)的處理容器中，避免胳膊在前開口處快速移動和頻繁進(jìn)出,以免干擾氣流。④盡量避免污染的物品進(jìn)入潔凈區(qū)。⑤在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行操作時，不能進(jìn)行文字工作。⑥

7、柜內(nèi)所有的工作要在工作面的中部或后部進(jìn)行，并能從觀察面板中看到。 ⑦前送風(fēng)格柵不得被便簽、滴管、或其他材料堵住，否則會干擾氣流從而可能使材料受到污染，使人員處在暴露狀態(tài)。⑧清潔和消毒:應(yīng)在每次工作完成后及一天結(jié)束時，使用合適的消毒劑清潔安全柜的表面。 ⑨柜子的風(fēng)扇在工作開始前和工作完成后要再各運行5分鐘。,19,20,,21,三、超凈工作臺,超凈工作臺是為保護(hù)試驗樣品而設(shè)計，通過吹過工作區(qū)域的層流空氣防止試驗樣品受粉塵或細(xì)菌的污染

8、。,22,水平層流的潔凈臺原理圖,垂直層流潔凈臺原理圖,超凈工作臺中不能操作感染性的材料，因其氣體是正壓直接排放。一旦感染性樣品放置于工作區(qū)域，層流空氣將把帶有微生物介質(zhì)的空氣吹向前臺正在操作的工作人員而產(chǎn)生危險。,23,生物安全柜與超凈工作臺的區(qū)別,24,除了了解安全柜各項性能指標(biāo)，最好最快最方便鑒別安全柜安全性能的方法是了解您購買的安全柜是否獲得過以下幾項主要的國際安全柜認(rèn)證： EN12469 (歐洲生物安全柜統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)) NSF

9、49 (美國生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)-二級生物安全柜) AS2252.2 (澳洲生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)-二級生物安全柜) JIS K3800 (日本生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)),25,,第二節(jié) 滅菌器,26,,一、概念： 泛指能達(dá)到滅菌要求的一切設(shè)備，即能在一定時間內(nèi)殺滅一切活的微生物（包括細(xì)菌芽胞）的設(shè)備，滅菌的保證水平為10－6 （即一件物品經(jīng)滅菌處理后仍然有微生物存活的概率為10－6）。 二、滅菌器的種類： 1. 高壓蒸

10、汽滅菌器―最常用 2. 干熱滅菌器 3. 環(huán)氧乙烷滅菌器和過氧化氫等離子體滅菌器。,27,三、使用高壓蒸汽滅菌器的注意事項 1.需要滅菌的各種包裹不應(yīng)過大過緊。 2.放入滅菌器內(nèi)的包裹‘不能排得太緊。 3.定期做好滅菌效果檢測。 4.易燃易爆物品禁用高壓蒸汽滅菌法。 5.瓶裝液體滅菌時，所盛液體不超過瓶體積的3/4 。 6.每次滅菌前，應(yīng)檢查安全閥的性能是否良好，使用

11、中也 應(yīng)密切觀察運行是否正常，及時發(fā)現(xiàn)問題，以免發(fā)生意 外。 7.在使用高壓蒸汽滅菌過程中，應(yīng)注意排盡滅菌器內(nèi)冷空 氣。 8.達(dá)到滅菌時間后，關(guān)閉電源，使壓力自然下降，壓力指針 到“0”后，方可打開鍋蓋。,28,第 五 章 病原微生物實驗室生物安全管理,29,原核生物型微生物： 包括兩個菌（細(xì)菌、放線菌），四個體（衣原體、支原體、立克次體、螺旋體）.,第 五 章

12、 病原微生物實驗室生物安全管理 ---- 病原微生物的種類及特點,30,第 五 章 病原微生物實驗室生物安全管理 ---- 病原微生物的種類及特點,原核生物型微生物的特點： 1. 大部分細(xì)菌可在人工培養(yǎng)基上生長繁殖。 2. 構(gòu)成細(xì)菌毒力的物質(zhì)基礎(chǔ)主要包括細(xì)菌的侵襲力(invasiveness) 毒素（toxin）. 細(xì)菌致病性的強

13、弱與細(xì)菌的毒力、侵入機體的數(shù)量、入侵途徑及機體的免疫狀態(tài)密切相關(guān)。 3. 細(xì)菌感染可采用抗生素來治療。,31,第 五 章 病原微生物實驗室生物安全管理---- 病原微生物的種類及特點,真核生物型微生物： 真菌（單細(xì)胞真菌和多細(xì)胞真菌）特點： 1. 真菌的致病： 淺表真菌感染--如:皮膚癬菌。真菌機會性感染---如：白色念珠菌，新型隱球菌。真菌毒素的致病作用---真菌中毒和引起腫瘤（黃曲霉毒素）。真菌性超敏反應(yīng)。

14、 2. 治療： 對細(xì)菌抗生素不敏感，必須采用抗真菌藥物治療。,32,第 五 章 病原微生物實驗室生物安全管理 ---- 病原微生物的種類及特點,非細(xì)胞型微生物： 病毒病毒結(jié)構(gòu)：核酸（DNA / RNA）,蛋白衣殼，包膜（某些病毒有）；病毒特點：1. 在易感的活細(xì)胞中寄生。病毒的致病作用主要通過侵入易感細(xì)胞、損傷細(xì)胞或改變細(xì)胞功能而引發(fā)。2. 病毒感染用抗生素治療無效，

15、目前理想的抗病毒藥物不多。,33,34,第 五 章 病原微生物實驗室生物安全管理 --- 病原微生物的種類及特點,非細(xì)胞型微生物： 朊粒（prion）： 朊粒的特點： 1. 一種特殊的致病因子，只含蛋白質(zhì)，不含核酸。 2. 朊粒： 是一種由正常宿主細(xì)胞基因編碼的、構(gòu)象異常的朊蛋白，是人和動物的傳染性海綿狀腦?。═SEs）的病原體。TSE 可通過多種途徑傳播

16、（消化道、血液、神經(jīng)及醫(yī)源性）。 3. 抵抗力很強，一般高壓滅菌條件不能破壞。 對患者的血液、體液，手術(shù)器械等必須用 1mol / L NaOH 處理 1小時, 再高壓滅菌 134 C, 2小時。,35,一、病原微生物的風(fēng)險等級,36,二、病原微生物實驗室生物安全防護(hù),37,（一） 病原微生物樣本的采集,病原微生物菌（毒）種、樣本及已知或疑含病原體的物質(zhì)均稱為感染性物質(zhì)?；疽螅?.采集設(shè)備與器材：

17、 必須有相應(yīng)的生物安全防護(hù)設(shè)備與器材。如個人防護(hù)用品（隔離衣、帽、口罩、鞋套、手套、防護(hù)眼鏡等）、防 護(hù)器材、生物安全防護(hù)設(shè)施和實驗條件等。2. 采集人員與操作規(guī)范： 必須由掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能的工作人員進(jìn)行采集 遵循生物安全操作規(guī)范 具有保證病原微生物樣本質(zhì)量的技術(shù)方法和手段 具有詳細(xì)的樣本采集記錄 具有應(yīng)急措施與預(yù)案3. 樣本的分類

18、、包裝與運輸： 必須按規(guī)定要求對感染性物質(zhì)行分類、包裝與運輸。疑似高致病性病原微生物樣本，應(yīng)該采取特殊明確的標(biāo)示.,38,（二）病原微生物菌（毒）種的保藏與管理,1. 菌（毒）種的供應(yīng)： 第一類、第二類菌（毒）種： 由衛(wèi)生部指定的保藏管理機構(gòu)統(tǒng)一供 應(yīng)，其他任何單位或個人不得對國內(nèi)、外辦理。 第三類、第四類菌（毒）種：專業(yè)實驗室負(fù)責(zé)供應(yīng)所管理的菌（毒）

19、 種，其他菌（毒）種均由各有關(guān)保藏管理中心供應(yīng)。 2.菌（毒）種的使用: 使用單位需符合生物安全要求的條件和設(shè)備。菌（毒）種應(yīng)有專人負(fù)責(zé)管理，建立必要的制度。 *使用第一類菌（毒）種的單位，必須經(jīng)國務(wù)院衛(wèi)生行政部門批準(zhǔn)； *使用第二類菌（毒）種的單位必須經(jīng)省、自治區(qū)、直轄市衛(wèi)生行政部門批準(zhǔn)； *使用第三類菌（毒）種的單位，應(yīng)當(dāng)經(jīng)縣級衛(wèi)生行政部門批準(zhǔn)。,39,（三）實驗廢棄物的處理,處理方式如下：,國外

20、嚴(yán)格規(guī)定,40,,41,第六章 臨床實驗室生物安全管理,42,一、臨床實驗室的生物安全隱患 最大隱患： 存在大量未知因素帶來的風(fēng)險。 臨床實驗室接收的標(biāo)本很多是來源于未知疾病的個體，其中是否含有致病因子及其危害性大小、傳染途徑均不明。 二、臨床實驗室的生物安全準(zhǔn)則 防護(hù)原則：假設(shè)所有來自病人的血液、體液和 組織都具有傳染性！ 要求臨床

21、實驗室人員嚴(yán)格按照實驗室安全操作規(guī)程操作，重要是降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生。,43,臨床檢驗相關(guān)生物危險等級分布,44,,醫(yī)務(wù)人員職業(yè)防護(hù)認(rèn)定病人的血液、體液、分泌物、排泄物均具有傳染性，接觸上述物質(zhì)者．必須采取防護(hù)。雙向防護(hù)，既防止疾病從病人傳至醫(yī)務(wù)人員，又防止疾病從醫(yī)務(wù)人員傳至病人,45,,防護(hù)措施（問題：意識薄弱 措施不到位） l 洗手：接觸病人的污染物時，不論是否戴手套，都必須洗手。 2 戴手套： 3 有可能發(fā)

22、生噴濺時，應(yīng)戴眼罩和口罩，并穿防護(hù)衣。 4 被污染的醫(yī)療用品和儀器設(shè)備應(yīng)及時處理! 5 銳利器具和針頭應(yīng)小心處理，以防被刺傷。 6 接種疫苗 （乙肝疫苗 ）,46,,三、臨床實驗室安全操作的基本要求一般臨床實驗室應(yīng)按BSL-2的要求。安全防護(hù)措施包括安全操作規(guī)范程序﹑安全防范制度和廢棄物處理制度等。 （1）所有處理血液、體液或其他可能具有傳染性的物質(zhì)（包括接觸病人 的黏膜或有損傷的皮膚、或在處理污染

23、的物品或表面時）的工作人 員都應(yīng)戴手套，如果有可能發(fā)生血液或體液的噴濺，或必須在生物 安全柜外處理微生物時，則應(yīng)使用面部防護(hù)裝備。如果手套破損、 刺破、或失去其屏障功能，則應(yīng)盡快更換。一次性手套不得重復(fù)使 用，在接觸病員后應(yīng)更換手套。不能戴著手套離開實驗室或接觸 “潔凈”設(shè)施表面（如鍵盤、電話、門柄等）。（2）工作臺面應(yīng)鋪墊一塊具有吸收性能的材料，以防止液體滴落或濺 落造成的感

24、染性物質(zhì)擴散，使用后按感染性廢棄物處理。（3）所有可能產(chǎn)生氣溶膠或飛沫的操作都應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行。,47,（4）實驗室應(yīng)使用機械移液裝置，絕對禁止用口吸移液。 （5）禁止用手直接處置注射器及其他銳器，以防止損傷； 使用后或廢棄的銳利物品都應(yīng)放入專用容器內(nèi)，并及 時運走處理。 （6）實驗中用過的污染物品在重復(fù)使用或裝入容器中按傳 染性廢棄物進(jìn)行處理前，應(yīng)先進(jìn)行去污處理。 （7）被血液或其他

25、體液污染的設(shè)備在進(jìn)行維修之前應(yīng)先進(jìn) 行清潔和消毒，無法徹底消毒的設(shè)備必須貼上生物危 害警告標(biāo)簽。 （8）手或其他部位的皮膚在接觸血液或其他體液后必須立 即徹底清洗，在實驗工作結(jié)束后或取下手套后應(yīng)立即 洗手;在離開實驗室之前應(yīng)脫下所有的個人防護(hù)裝備。 （9）血液或其他體液發(fā)生泄漏或工作結(jié)束后，要及時用合 適的化學(xué)殺菌劑對實驗室工作區(qū)進(jìn)行表面消毒。,48,臨床實驗室安全操作的

26、基本要求,（2）工作臺面應(yīng)鋪墊一塊具有吸收性能的材料，以防止液體滴落或濺落造成的感染性物質(zhì)擴散，使用后按感染性廢棄物處理。 （3）所有可能產(chǎn)生氣溶膠或飛沫的操作都應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行。,49,臨床實驗室安全操作的基本要求,（4）實驗室應(yīng)使用機械移液裝置，絕對禁止用口吸移液。 （5）禁止用手直接處置注射器及其他銳器，以防止損傷；使用后或廢棄的銳利物品都應(yīng)放入專用容器內(nèi)，并及時運走處理。 （6）實驗中用過的污染物品在重復(fù)使用或

27、裝入容器中按傳染性廢棄物進(jìn)行處理前，應(yīng)先進(jìn)行去污處理。,50,,（7）被血液或其他體液污染的設(shè)備在進(jìn)行維修之前應(yīng)先進(jìn)行清潔和消毒。 （8）手或其他部位的皮膚在接觸血液或其他體液后必須立即徹底清洗，在實驗工作結(jié)束后或取下手套后應(yīng)立即洗手；在離開實驗室之前應(yīng)脫下所有的個人防護(hù)裝備。 （9）血液或其他體液發(fā)生泄漏或工作結(jié)束后，要及時用合適的化學(xué)殺菌劑對實驗室工作區(qū)進(jìn)行表面消毒。,51,動物尸體解剖毒液滴到物品表面打開容器的螺旋蓋

28、摔碎有培養(yǎng)物的瓶、平皿注射器從安瓿抽取毒液離心時離心管破裂打開、打碎干燥菌種安瓿管注射器針尖滴出的毒液拍打、刷衣服攪拌小白鼠鼻內(nèi)接種,可造成中重度氣溶膠的操作,52,血液成分制備人員:,據(jù)文獻(xiàn)顯示: 無償獻(xiàn)血者HBsAg 、 抗-HCV 、 抗-HIV的感染率分別為6.1%、2.2%和0.03%;未明原因的血液傳播性疾病不斷地增加;采集、制備血液標(biāo)本，難免面臨很多危險因素和意外暴露。,53,,危險因素：1&

29、#160; 物理因素  包括針刺損傷和操作擦傷。針頭刺傷為采集成分血樣標(biāo)本后針頭誤投垃圾桶，撿回時碰傷手指；據(jù)統(tǒng)計，血站職工職業(yè)暴露中針刺占77.78%，皮損污染占15.7%，黏膜污染占6.52%［2］。 2  生物因素  主要包括乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、艾滋病病毒、結(jié)核桿菌、流感病毒等。據(jù)研究含病毒高的血液和體液依次為：血液、血液成分、傷口分泌物、精液、陰道分泌物、羊水等。,54,,,Is

30、 it a sharps hazard?,Examples:needlessyringesscalpelsall biologically contaminated objects that can easily penetrate skin (Pasteur pipettes,razor blades, etc.),Place sharps in approved sharps container for disposal!

31、,55,,3.  隱患因素：  醫(yī)療廢棄物（基本上屬于感染性廢物）；， 損傷性廢物；， 主要包括： 成分血轉(zhuǎn)移袋；一次性耗材；一次性生理鹽水和廢抗凝劑；注射器及針頭； 滲漏血袋；一次性工作服、帽子、口罩、手套等。,56,,發(fā)現(xiàn)損傷后的護(hù)理  :發(fā)生針頭刺傷，操作中擦傷、割傷等時：(1)暫時停止接觸血液工作；(2)立即脫去乳膠手套，用生理鹽水沖洗查看傷情；(3)在傷口近心端向

32、遠(yuǎn)心端擠壓傷口，盡可能擠出損傷處的血液，再用流水進(jìn)行沖洗完成后用0.5%碘伏消毒，并包扎傷口；(4)已污染的工作服先消毒后清洗；(5)查看制備的血袋條碼，以便檢查結(jié)果(6)登記受傷情況及處理方法；(7)傷情嚴(yán)重者實施生物安全應(yīng)急預(yù)案并接受醫(yī)學(xué)觀察。,57,急診科,急診患者特點： 在潛伏期的患者和未明確診斷的傳染病患者較多。必須樹立的觀念：把任何患者的血液及污染物；呼吸道排泄物等；都認(rèn)為具有潛在感染性，加強自我防護(hù)。防護(hù)措施

33、：戴帽子 口罩 手套，隔離衣等，在特殊情況下可考慮戴雙層手套（在工作服的口袋內(nèi)備 2 雙手套，便于在緊急情況下使用）；重視洗手 ！實施預(yù)防接種：如甲肝 乙肝 流感疫苗等，,58,抗腫瘤藥和其他危險藥物的生物防護(hù),危險藥物： 指具有致癌性、 致畸性、 生殖毒性、 遺傳毒性及低劑量致器官毒性的藥物。包括： 抗腫瘤藥、 抗病毒藥、 激素、 免疫抑制劑等。,59,,職業(yè)暴露風(fēng)險：研究

34、表明：醫(yī)務(wù)人員在診療、配制和使用危險藥物等過程中可直接或間接暴露于危險藥物,產(chǎn)生不良反應(yīng)。暴露的途徑：呼吸道吸入、 皮膚接觸吸收、 消化道攝入等。危害： 職業(yè)暴露危險藥物可導(dǎo)致機體免疫力 降低、 發(fā)生腫瘤的危險性增加和潛在的生殖損害。,60,,安全防護(hù)措施: 1，制定安全操作規(guī)程; 對可能接觸危險藥物的 醫(yī)務(wù)人員加強安全教育和培訓(xùn); 2，設(shè)置專用配藥場所; 使用生物安全柜; 3，個人防護(hù)：裝備包括手套、 隔離衣、 護(hù)目鏡

35、、 面罩等;4，加強對廢棄物處理的管理;,61,,正確使用個人防護(hù)設(shè)備 ： 如防護(hù)服、手套、目鏡、一次性帽子、口罩及鞋套。防護(hù)服： 宜穿一次性低穿透性隔離衣 ,有條件可選用正壓連身工作服； 隔離衣應(yīng)具有低穿透性、 開口向后、長袖緊袖口;,62,,手套：研究證明戴手套是預(yù)防抗腫瘤藥物皮膚暴露的最有效手段, 值得注意的是手套的厚度比質(zhì)地更為重要,應(yīng)使用無粉、 厚、 長的乳膠手套,長度能覆蓋住隔離衣袖口為宜 ；

36、Slevin 等的研究指出 ,乳膠手套防滲透功能差 ,而聚乙烯手套具有防滲透功能 ,但由于聚乙烯手套比較薄 ,使用過程中容易破損且不易于精細(xì)操作 ,因此建議戴雙層手套 ,在聚乙烯手套外加戴一層乳膠手套 ,注意手套須蓋住袖口。 戴手套前及脫手套之后應(yīng)認(rèn)真洗手。切忌因怕麻煩而簡化防護(hù)程序。,63,,配藥注意事項 在進(jìn)行藥物配制操作時, 打開安瓿時應(yīng)墊以紗布,以防劃破手套;打開粉劑安瓿時,應(yīng)用無菌紗布包裹; 溶解藥物時, 溶媒應(yīng)沿

37、安瓿壁緩慢注入瓶底, 以防粉沫溢出。抽取藥液選用一次性注射器,以不超過容器的 3 /4容積為宜,排氣時應(yīng)排到密閉容器中。,64,,有害污物的管理： 接觸化療藥物的用具、 污物應(yīng)放入專用袋內(nèi)集中封閉處理,收集容器應(yīng)堅固、防漏和帶蓋,有明確標(biāo)識。勿在放置抗腫瘤藥物的冰箱中存放食品;勿在操作室內(nèi)飲水和進(jìn)食。,65,,發(fā)生急性危險藥物暴露后的緊急處理： 如不慎將藥液濺到皮膚上或眼睛內(nèi), 可用大量清水或氯化鈉注射液反復(fù)沖洗接觸

38、部位的皮膚,記錄接觸情況,必要時按化療藥外漏處理。,66,第七章 基因工程實驗室的生物安全管理,67,,基因工程： 包括 1. 利用載體系統(tǒng)的重組體DNA 技術(shù) 2. 利用物理或者化學(xué)方法把異源DNA 直接導(dǎo)入有機體的技術(shù) 基因工程: 具有巨大應(yīng)用前景基因工程安全性問題也受到廣泛關(guān)注重組DNA技術(shù)可能制造出具有潛在危險的新型微生物，對人類、動物和環(huán)境造成

39、威脅 涉及 “生物安全性”問題,68,,69,一、基因工程實驗室的危險因素,1.材料危害,70,2.儀器使用的危險因素 高壓滅菌鍋 離心機 凝膠成像系統(tǒng) 電泳系統(tǒng) 超聲破碎儀電穿孔儀雜交爐 ……3.有害化學(xué)試劑溴化乙錠焦碳酸二乙酯（DEPC）Trizol秋水仙素氯仿 ……,71,二、安全防護(hù)原則,基本原則： 1

40、. 確保實驗操作人員的安全。 2. 確保實驗操作場所及周邊環(huán)境的安全。 3. 確保實驗儀器設(shè)備正常運作的安全。 4. 確保實驗操作對象的安全。 一級屏障： 生物安全柜、通風(fēng)櫥柜、高壓滅菌鍋等。 二級屏障： 實驗室設(shè)計建造、設(shè)備配置等。,72,三、生物安全評估,安全性評估考察的依據(jù)主要建立于: 1.生物表達(dá)系統(tǒng)的生物安全性 2.轉(zhuǎn)基因動物和基因敲除動物的安全性。 3.轉(zhuǎn)基因植物

41、的生物安全性。 4.遺傳修飾的生物安全性。,73,三、基因工程的安全控制,（一）相關(guān)法規(guī) 我國相繼頒布了《基因工程安全管理辦法》（1993年）和《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理條例》（2001年），以及其他相關(guān)的微生物學(xué)實驗室生物安全管理等規(guī)章，為基因工程在我國的安全管理提供了法律保障。,74,,（二）基因工程工作安全等級 按照潛在危險程度，分為四個安全等級: 安全等級Ⅰ:

42、 該類基因工程工作對人類健康和生態(tài)環(huán)境尚不存在危險； 安全等級Ⅱ: 該類基因工程工作對人婁健康和生態(tài)環(huán)境具有低度危險； 安全等級Ⅲ: 該類基因工程工作對人類健康和生態(tài)環(huán)境具有中度危險； 安全等級Ⅳ: 該類基因工程工作對人類健康和生態(tài)環(huán)境具有高度危險。,75,目前各國實驗室中使用的宿主—載體系統(tǒng)遵從于美國國立衛(wèi)生研究院

43、制定的生物控制系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)。確立以原核生物和低等真核生物作為宿主，相關(guān)改造的系列質(zhì)粒為載體的生物控制系統(tǒng)。,76,（三）基因工程的安全控制,安全等級的標(biāo)準(zhǔn)，由國務(wù)院主管部門制定。 屬于安全等級Ⅰ和Ⅱ的工作，由本單 位行政 負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)。 屬于安全等級Ⅲ的工作， 報國務(wù)院主管部門批準(zhǔn)。 屬于安全等級Ⅳ的工作，經(jīng)國務(wù)院主管部門 審查，報全國基因工程安全委員會批準(zhǔn)。,77,（四）安全操作規(guī)范,1. 常規(guī)安全管理:

44、適用于其他類型實驗室安全管理的日常規(guī)范，同樣適用于基因工程實驗室。2.生物安全管理: 世界衛(wèi)生組織按實驗室所從事研究工作的生物危害等級將實驗室分為3個類別，并按照不同的類別制定了相應(yīng)的安全操作規(guī)范。,78,基礎(chǔ)實驗室安全操作規(guī)范 從事一、二級安全等級的研究工作場所，操作規(guī)范基本同一級生物安全實驗室。 特別強調(diào)： 1.降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生； 2.所有重

45、組DNA, 重組工程菌培養(yǎng)物、廢棄物必須 進(jìn)行滅活處理（物理方法; 如高壓滅菌等; 化學(xué) 方法:化學(xué)消毒劑 ）。 3.在進(jìn)行有可能產(chǎn)生氣溶膠和高濃度生物危害物 質(zhì)的實驗操作時，使用生物安全柜。,79,一、名詞解釋 1.實驗室生物安全 2.氣溶膠 二、簡答題1.實驗室感染的來源有哪些？ 2.第三類病原微生物的判定標(biāo)準(zhǔn)是什么？ 屬于此類的微