病原微生物第9章腸桿菌科

1、復(fù) 習(xí) 題,1．在化膿性感染中，能促感染局限化的細(xì)菌產(chǎn)物是 A．血漿凝固酶 B．鏈道酶 C．透明質(zhì)酸酶 D．鏈激酶 E．以上都不是,A.金黃色葡萄球菌 B.甲型溶血型鏈球菌 C．乙型溶血型鏈球菌 D M蛋白 1．可引起風(fēng)濕熱的是2．可引起食物中毒的是3.常引起感染性心內(nèi)膜炎的致病菌是4.與腎小球腎炎有關(guān)的抗原蛋白是,攜帶NDM-1的大腸桿菌感染，會導(dǎo)致許多病人出現(xiàn)尿路感染和血

2、液中毒。在已發(fā)現(xiàn)的NDM-1細(xì)菌感染病例中，至少有一例已經(jīng)對所有已知的抗生素具有抗藥性。,超 級 細(xì) 菌,NDM-1的大腸埃希菌,第十章 腸桿菌科,,,,,,,知 識 要 點,1.掌握：（1）大腸埃希菌的生物學(xué)性狀、致病性。（2）志賀菌的生物學(xué)性狀、致病性、微生物學(xué)檢查法。（3）沙門菌的生物學(xué)性狀、致病性、微生物學(xué)檢查法；血清學(xué)診斷和肥達試驗。2. 熟悉：（1）大腸埃希菌的微生物學(xué)檢查法及防治原則。（2）志賀菌和

3、沙門菌感染的防治原則；3.了解：（1）大腸埃希菌在衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查中的意義。（2）志賀菌感染的免疫性；（3）沙門菌的分類及其感染的免疫性；（4）其他菌屬的致病性。,概 述,大多數(shù)為正常菌群,少數(shù)是致病菌，如：致病性大腸埃希菌、傷寒沙門菌、痢疾志賀菌、,腸桿菌科細(xì)菌是一大群寄居在人類和動物腸道中生物學(xué)性狀近似的革蘭陰性桿菌。,形態(tài)結(jié)構(gòu),形態(tài)相似。中等大小的革蘭陰性桿菌。多有鞭毛，少數(shù)有莢膜或包膜，致病菌多有菌毛。從形態(tài)上無

4、法區(qū)別。,共同特性,生 化 反 應(yīng) 活 潑,致病菌株多不能分解乳糖。乳糖發(fā)酵試驗可初步鑒別腸道致病菌和非致菌,能分解多種糖類和蛋白質(zhì)，形成不同的代謝產(chǎn)物，常以此作為鑒別手段。,共同特性,,大腸埃希菌和痢疾志賀菌，你能區(qū)分嗎？,用鑒別培養(yǎng)基，不就行了？,SSA—指示劑為中性紅，分解乳糖產(chǎn)酸的細(xì)菌呈紅色菌落（大腸），不分解乳糖的細(xì)菌呈無色菌落。,,抗原結(jié)構(gòu)：復(fù)雜,（1）O抗原（菌體抗原）：LPS的最外層核心多糖（2）H抗原（鞭毛

5、抗原）（3）莢膜抗原：如Vi抗原、K抗原,共同特性,對一般消毒劑敏感。 膽鹽、煌綠等染料對大腸埃希菌等非致病菌有選擇性的抑制作用。借選擇培養(yǎng)基來分離致病性腸道菌。,抵 抗 力 弱,共同特性,Escherichia,Escherichia 的細(xì)菌一般不致病，是人類和動物腸道中的正常菌群。其中以大腸埃希菌（E.coli）最為重要（代表菌）。,埃希菌屬,形態(tài)染色,G-桿菌多有周鞭毛致病株有菌毛,兼性厭氧、營養(yǎng)要求不高普通平板：灰

6、白色、光滑、濕 潤、中等大小的菌 落。選擇培養(yǎng)基中菌 落為紅色液體培養(yǎng)基：均勻混濁生長,培養(yǎng)特性：,生化反應(yīng),能發(fā)酵葡萄糖等多種糖類，產(chǎn)酸產(chǎn)氣。大部分菌株迅速發(fā)酵乳糖。在克氏雙糖管中，斜面和底層均產(chǎn)酸產(chǎn)氣——同沙門菌、志賀菌區(qū)分 硫化氫陰性、動力陽性 IMViC 試驗為+ + - -。,,抗原結(jié)構(gòu)：復(fù)雜,（1）O抗原（菌體抗原

7、）：170種（2）H抗原（鞭毛抗原）：50種（3）K抗原：100種,致病性,致病物質(zhì)所致疾病,致病物質(zhì)：,黏 附 素：黏附于泌尿道和腸道的細(xì)胞上。外 毒 素： 1、不耐熱腸毒素Ⅰ和Ⅱ 2、耐熱腸毒素a和b 3、志賀毒素Ⅰ和Ⅱ 4、溶血素A,A,LT的結(jié)構(gòu)和作用

8、部位,,B,B,B,B,B,,A亞單位：毒素的活性部位B亞單位：與腸黏膜上皮細(xì)胞表面的GM1神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合后,使A亞單位穿過細(xì)胞膜與腺苷環(huán)化酶作用,,,腸粘膜細(xì)胞上的腺苷環(huán)化酶,A亞單位,ATP,cAMP,,,活化,,小腸分泌過度，腹瀉,ST的作用：激活腸粘膜細(xì)胞上的鳥苷環(huán)化酶,GTP,cGMP,液體平衡紊亂，腹瀉,,,,所致疾病：,1、腸道外感染化膿性感染：腹膜炎、闌尾炎、手術(shù)創(chuàng)口感染，體弱者可引起敗血癥。新生兒引起新生兒腦膜炎

9、。泌尿道感染：為上行感染，尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎。表現(xiàn)為尿頻、排尿困難、血尿和膿尿。,腸出血性大腸埃希菌 EHEC (enterohemorrhagic E.coli),腸產(chǎn)毒素性大腸埃希菌 ETEC (enterotoxigenic E.coli),腸侵襲性大腸埃希菌 EIEC (enteroinvasive E.coli),腸致病性大腸埃希菌 EPEC (enteropathogenic E.coli ),腸集聚性大腸

10、埃希菌EAEC (enteroaggregative E.coli),2、腸道感染：胃腸炎,腸產(chǎn)毒素性大腸埃希菌(ETEC ),疾?。?歲以下嬰幼兒腹瀉和旅行者腹瀉癥狀： 從輕微的腹瀉至水瀉，有惡心、低熱作用部位：小腸粘膜細(xì)胞致病物質(zhì)：定植因子、 不耐熱腸毒素(LT) 、耐熱腸毒素(ST),腸侵襲性大腸埃希菌 （ EIEC）,疾?。狠^大兒童和成人腹瀉。癥狀：發(fā)熱、腹痛、腹瀉、膿血便和有里急后重。

11、 類似細(xì)菌性痢疾。作用部位：大腸致病物質(zhì)：內(nèi)毒素致病機理：不產(chǎn)生腸毒素，侵襲和破壞結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞，造成炎癥和潰瘍，產(chǎn)生黏液膿血便。,腸致病性大腸埃希菌（ EPEC）,疾?。簨胗變焊篂a。癥狀：發(fā)熱、嘔吐、腹瀉、粘液便。作用部位：小腸致病物質(zhì)：不產(chǎn)生毒素，粘附素破壞微絨毛刷狀緣，絨毛萎縮、上皮細(xì)胞排列紊亂，功能受損。,腸出血性大腸埃希菌(EHEC ),疾?。撼鲅越Y(jié)腸炎，溶血性尿毒綜合征 多見

12、于5歲以下兒童。癥狀：劇烈腹痛、水瀉、大量鮮血便。作用部位：小腸遠(yuǎn)端、結(jié)腸致病物質(zhì)：菌毛、志賀毒素等。致病機理：志賀毒素滅活核糖體，終止蛋白質(zhì)合成。引起腸黏膜水腫、出血、液體蓄積、腸黏膜脫落、腸細(xì)胞水腫、壞死、引起血性便。細(xì)菌血清型：O157：H7,,視頻,疾?。簨雰焊篂a。癥狀：持續(xù)性水瀉、嘔吐、脫水、低熱、偶有血便。致病物質(zhì)：毒素和黏附素致病機理：聚集性黏附腸道上皮細(xì)胞，導(dǎo)致微絨毛變短，單核細(xì)胞浸潤和出血。,腸集聚性大

13、腸埃希菌（EAEC）,微生物學(xué)檢查,病人標(biāo)本中細(xì)菌的分離與鑒定 1、標(biāo)本的采集：不同的病變采集不同的標(biāo)本 2、分離培養(yǎng)與鑒定： 選擇培養(yǎng)基，生化反應(yīng)鑒定 致病性大腸埃希菌須用血清學(xué)試驗定型 必要時鑒定腸毒素（ELISA、基因探針等）尿路感染：確定大腸埃希菌+計數(shù)， 尿菌量?10萬/mL時才有診斷意義,微生物學(xué)檢查,衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查 大腸菌群數(shù)：每1000ml樣品

14、中的大腸菌群數(shù)。,微生物學(xué)檢查,標(biāo)準(zhǔn)：大腸菌群數(shù)——飲水≤3個/ 1000ml 果汁、瓶裝汽水 ≤ 5個/100ml,,尿路感染：確定大腸埃希菌+計數(shù)， 尿菌量?10萬/mL時才有診斷意義,防治原則,預(yù)防：菌毛疫苗,治療： 磺胺藥、慶大霉素等,Shigella,志賀菌屬,志賀菌屬是人類細(xì)菌性痢疾的病原菌，俗稱痢疾桿菌（dysentery bacterium）。,主要致病特點是能侵襲結(jié)腸

15、粘膜上皮細(xì)胞，引起自限性化膿性感染病灶。,形態(tài)染色與培養(yǎng)特性,無鞭毛、有菌毛 生化反應(yīng)不活躍 SS培養(yǎng)基上呈無色半透明菌落 克氏雙糖管斜面不發(fā)酵底層產(chǎn)酸不產(chǎn)氣 硫化氫陰性、動力陰性,,抗原構(gòu)造與分類,我國以福氏志賀菌引起的菌痢最常見。,O抗原,K抗原 阻抑抗O抗體與O抗原結(jié)合,,,,分為4群44個血清型（包括亞型）,,對理化因素的抵抗力較其他腸道桿菌為弱。 對氯霉素、鏈霉素、氟哌酸、四環(huán)素、痢特靈、黃

16、連素、磺胺類等藥物敏感，但容易出現(xiàn)耐藥變異株。,抵抗力,抗原結(jié)構(gòu)、生化反應(yīng)、毒力及對藥物的敏感性易發(fā)生變異,變異,致病物質(zhì),侵襲力：菌毛黏附回腸末端和結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞， 并侵入生長繁殖，產(chǎn)生炎癥。,,,,,派伊爾淋巴結(jié)的M細(xì)胞,通過Ⅲ型分泌系統(tǒng)向上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌4種蛋白,志賀菌,,,,,IpaA IpaB,黏附并侵入,,IpaC,IpaD,,,,,,,誘導(dǎo)細(xì)胞膜凹陷 導(dǎo)致細(xì)

17、菌內(nèi)吞,,,,,志賀菌溶解吞噬小泡 進入細(xì)胞質(zhì)內(nèi)繁殖,,,,,,,,,,,宿主細(xì)胞內(nèi)肌動纖維的重排,推動細(xì)菌進入毗鄰細(xì)胞細(xì)胞到細(xì)胞傳播,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,①細(xì)菌逃避了免疫的清除作用而得到了自身保護,②通過誘導(dǎo)細(xì)胞程序性死亡從吞噬中得到了存活,,1.侵襲力,作用,1.侵襲力,2.內(nèi)毒素,,,,,,,,,,內(nèi)毒素,,腸黏膜,通透性,

18、,,內(nèi)毒素的吸收,,促進,發(fā) 熱神志障礙中毒性休克,,作用,,內(nèi)毒素,,,,,,,,,,腸黏膜,破壞,,炎癥潰瘍,形成,,典型的膿血黏液便,,內(nèi)毒素,,,,,,,,,腸壁自主神經(jīng)系統(tǒng),,,作用于,,腸功能紊亂,,腸蠕動失調(diào)和痙攣,,腹痛里急后重,3.外毒素：志賀毒素——由1個A亞單位和5個B亞單位組成。,,毒素作用:引起上皮細(xì)胞微絨毛的破壞。個別病人志賀毒素可介導(dǎo)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，導(dǎo)致溶血性尿毒綜合征(HUS)

19、,所致疾病——細(xì)菌性痢疾,傳染途徑： 糞---口,傳染源： 病人和帶菌者,,臨床表現(xiàn),急性細(xì)菌性痢疾,急性典型：發(fā)熱、腹痛、里急后重,粘液膿血便,急性中毒型：小兒—中毒型,慢性細(xì)菌性痢疾：病程遷移二月以上,,視頻,中毒性痢疾病人,免 疫 性,志賀菌感染局限于腸粘膜，一般不入血，消化道黏膜表面的分泌型IgA（SIgA）為主，病后免疫力短暫。,及時送/暫用30%甘油緩沖水保存,SS平板（無色透明小菌落）,血清學(xué)反應(yīng)（玻片凝集）,最后診斷,分

20、離培養(yǎng),新鮮膿血便/肛拭,雙糖培養(yǎng)基（生化反應(yīng)）,,,,,,,,,快速診斷,,熒光菌球試驗,協(xié)同凝集試驗,微生物學(xué)檢查,,防治原則,（1）控制傳染源、切斷傳播途徑、增進機體免疫力（2）口服減毒活疫苗。,預(yù)防,多種抗菌素可選擇，但很易引起耐藥性,治療,Salmonella,沙門菌屬,目的要求,掌握：對人致病的沙門氏菌的種類、致病物質(zhì)和所致疾??；肥達試驗的原理、結(jié)果分析與判斷。熟悉：沙門氏菌的主要生化反應(yīng)、特異性預(yù)防。了解：沙門氏

21、菌的形態(tài)、抵抗力及變異。,概 述,是一大群寄生于人類和動物腸道中，生化反應(yīng)和抗原構(gòu)造相似的革蘭氏陰性桿菌。,菌群菌型甚多，僅少數(shù)對人致?。▊抽T菌、副傷寒沙門氏菌等）。,有些沙門菌對動物致病，可傳染人，引起食物中毒，如鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、鴨沙門菌、豬霍亂沙門菌等。,生物學(xué)性狀,大都周身鞭毛、有菌毛。,,,不分解乳糖在SS選擇培養(yǎng)基上形成無色菌落。,克氏雙糖管中，斜面不發(fā)酵，底層產(chǎn)酸產(chǎn)氣（傷寒沙門菌除外），硫化氫

22、陽性或陰性、動力陽性,,,,,常見沙門菌的主要生化特性,,抗原構(gòu)造與分類,O抗原：脂多糖，群特異性 O抗原刺激機體產(chǎn)生IgM型抗體,H抗原：鞭毛蛋白 H抗原刺激機體產(chǎn)生IgG型抗體,Vi抗原：多糖，與毒力有關(guān)。測定Vi抗體有助于檢出傷寒及副傷寒帶菌者。,抵 抗 力,較差，對一般消毒劑敏感,但對膽鹽、煌綠等的耐受性較其他腸道菌強，故膽鹽、煌綠可用作沙門菌選擇培養(yǎng)基，利于分離糞便中的沙門氏菌。,致 病 物

23、質(zhì),1、侵襲力：菌毛——粘附作用,2、內(nèi)毒素：發(fā)熱、白細(xì)胞減少、中毒性休克,3、腸毒素：類似ETEC產(chǎn)生的腸毒素、引起水樣腹瀉,1.侵襲力,具有耐酸應(yīng)答基因,氧化酶、超氧化物歧化酶,Vi抗原,1、腸熱癥（傷寒和副傷寒）,傳染源：病人和帶菌者、水源傳播途徑： 糞—口典型病程：分四個階段,所 致 疾 病,潛伏期,傷寒沙門菌經(jīng)口到小腸，侵入小腸末端的M細(xì)胞，被巨噬細(xì)胞吞噬后在細(xì)胞內(nèi)繁殖。部分細(xì)菌通過淋巴液到達腸系膜淋巴結(jié)大量繁殖。,初

24、期,細(xì)菌隨淋巴液經(jīng)胸導(dǎo)管進入血液（第一次菌血癥），并擴散到肝、脾、腎、膽、骨髓等到部位。此階段為臨床上的發(fā)病第一周，出現(xiàn)發(fā)熱、不適、全身疼痛等前驅(qū)期癥狀。,極期,在肝、脾、腎、膽、骨髓等部位繁殖。由巨噬細(xì)胞帶入血液（第二次菌血癥），膽囊中細(xì)菌通過膽汁進入腸道，部分隨糞便排出，部分再次進入腸壁淋巴組織而激發(fā)超敏反應(yīng)，導(dǎo)致局部壞死和潰瘍，嚴(yán)重可造成腸出血及腸穿孔，腎中的細(xì)菌可隨尿排出。此階段為臨床上的第2、3周，出現(xiàn)持續(xù)高熱、相對緩脈

25、、肝脾腫大、白細(xì)胞下降、皮膚玫瑰疹、全身中毒癥狀顯著。,第2、3周取什么樣品為標(biāo)本？抗體的水平如何？,恢復(fù)期,進入恢復(fù)階段。病愈后部分患者可自糞便或尿液繼續(xù)排菌3周至3個月，甚至1年，稱恢復(fù)期帶菌者。約有3%的傷寒患者成為慢性帶菌者。,膽囊----腸道----糞排菌皮膚---玫瑰疹腎-----尿排菌肝脾-----腫大,傷寒和副傷寒桿菌,小腸黏膜,腸系膜淋巴結(jié),派伊爾淋巴結(jié)的M細(xì)胞,進入血液,再次進入血液,,,,,,,,,第一次菌血

26、癥,第二次菌血癥,腸熱癥（傷寒和副傷寒）的致病過程,糞—口途徑,傷 寒 瑪 麗,,2、腸炎型食物中毒,臨床表現(xiàn)：發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。為攝入污染的食物，細(xì)菌在腸內(nèi)繁殖所至。引起細(xì)菌：鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、腸炎沙門菌。,,視頻,3、敗血癥,引起細(xì)菌：豬霍亂沙門菌、丙型副傷寒沙門菌、鼠傷寒沙門氏菌、腸炎沙門菌。臨床表現(xiàn)：高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血,免 疫 性,腸熱癥病后產(chǎn)生牢固免疫，細(xì)胞免疫為主。 特異性體

27、液免疫也有輔助殺菌的作用。,,傷寒和副傷寒 食物中毒 敗血癥第1周取外周血 可疑食物 血液第1-3周取骨髓液 嘔吐物第2周起糞便第3周取尿液 糞便,微生物學(xué)檢查：查病原,標(biāo)本,,SS平板,生化反應(yīng),血清學(xué)鑒定,,,,雙糖發(fā)酵等,凝集試驗,,血清學(xué)檢查：查抗體,,1、肥達試驗（Widal test）,原理：用已知傷寒沙門菌菌體O抗原、H抗原以及引起副傷寒的甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌和希

28、氏沙門菌H抗原的診斷菌液與受檢血清作試管或微孔板凝集試驗，測定受檢血清中有無中相應(yīng)抗體及其效價的試驗,用途：輔助診斷腸熱癥（傷寒副傷寒）,2、帶菌者檢查,測Vi抗體，若效價?1：10有診斷價值,,肥達氏反應(yīng)的結(jié)果及分析,1、正常值：因隱性感染或預(yù)防接種含有一定量的抗體； 當(dāng)傷寒沙門菌O凝集效價?1：80，H凝集效價?1：160， 引起副傷寒的沙門菌H凝集效價?1：80，有診斷意義,2、動態(tài)觀察：發(fā)病初期和恢復(fù)期雙份血

29、清， 后者有四倍或四倍以上增高才有診斷意義。,,3、O與H抗體在診斷上的意義：,O抗體為IgM，出現(xiàn)早，消退快,H抗體為IgG，出現(xiàn)晚，消退慢,,防 治 原 則,早期發(fā)現(xiàn)，隔離治療,預(yù)防：三聯(lián)死疫苗 Ty21a口服減毒活疫苗 傷寒Vi莢膜多糖疫苗,治療：首選氯霉素 環(huán)丙氟哌酸,第四節(jié) 其它菌屬,一、克雷伯菌屬肺炎克雷伯菌肺炎亞種鼻炎克雷伯菌鼻炎亞種肉芽腫克雷伯菌二、變形