微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

1、課題1　微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng),課程標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行微生物的分離和培養(yǎng)。課標(biāo)解讀1.知道培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí)，進(jìn)行無(wú)菌技術(shù)的操作。2.進(jìn)行微生物培養(yǎng)。,1．培養(yǎng)基(1)培養(yǎng)基概念按照微生物對(duì) 的不同需求，配制出供其 的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。,培養(yǎng)基的成分及無(wú)菌操作技術(shù),營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),生長(zhǎng)繁殖,(2)培養(yǎng)基種類(lèi)包括 培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基等。(3

2、)培養(yǎng)基的化學(xué)成分一般都含有 、 、 和 四類(lèi)營(yíng)養(yǎng)成分。還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì) 、 及 等的要求。,固體,液體,水,碳源,氮源,無(wú)機(jī)鹽,pH,特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),氧氣,2．無(wú)菌技術(shù)(1)無(wú)菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開(kāi)，主要包括以下四個(gè)方面①對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的

3、 、操作者的 ，進(jìn)行清潔和 ；②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、 和 等進(jìn)行 ；③為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在 附近進(jìn)行；④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與 相接觸。,空間,衣著和手,消毒,接種用具,培養(yǎng)基,滅菌,酒精燈火焰,周?chē)奈锲?(2)消毒和滅菌①

4、消毒：消毒是指使用 方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分 的微生物， (包括；不包括)芽孢和孢子，常用的方法有 消毒法、 消毒法、 消毒法。②滅菌：滅菌是指使用 殺死物體內(nèi)外 ，

5、 (包括，不包括)芽孢和孢子，常用的方法有 滅菌、 ＿＿＿滅菌和 滅菌。,較為溫和的物理或化學(xué),對(duì)人體有害,不包括,煮沸,巴氏,化學(xué)藥劑,強(qiáng)烈的理化因素,所有的,微生物,包括,灼燒,高壓蒸汽,干熱,[思維激活1] 用酒精擦拭實(shí)驗(yàn)者手臂屬消毒還是滅菌？70%與95%的酒精，哪一種效果更好？為什么？提示　酒精擦拭屬化學(xué)消毒，酒精消毒時(shí)，70%的酒精殺

6、菌效果最好。原因是：濃度過(guò)高，使菌體表面蛋白質(zhì)凝固成一層保護(hù)膜，乙醇分子不能滲入其中；濃度過(guò)低，殺菌力減弱。,1．碳源、氮源及生長(zhǎng)因子的來(lái)源與功能歸納,2.培養(yǎng)基類(lèi)型劃分,3.無(wú)菌技術(shù)(1)消毒和滅菌的區(qū)別,(2)無(wú)菌技術(shù)主要操作要求①實(shí)驗(yàn)前應(yīng)對(duì)操作空間、操作人員消毒，對(duì)所用器具和培養(yǎng)基滅菌。②實(shí)驗(yàn)進(jìn)行時(shí)需在酒精燈火焰周?chē)鸁o(wú)菌區(qū)操作，另外要避免已滅菌處理材料再次污染。,特別提示　(1)微生物最常用的碳源是糖類(lèi)，尤其是葡萄糖；最常利

7、用的氮源是銨鹽、硝酸鹽。(2)對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、H、O、N的有機(jī)物既是碳源，又是氮源、能源。(3)大凡對(duì)生長(zhǎng)因子不能合成或合成能力有限的微生物，其培養(yǎng)基中均需額外添加生長(zhǎng)因子，而許多微生物能自行合成生長(zhǎng)因子，其培養(yǎng)基中不需再添加。,【鞏固1】 下列培養(yǎng)基配方中能作為選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基的依次是(　　)。,A.①③ B．②① C．②④ D．③①解

8、析　高濃度的食鹽可以抑制多種細(xì)菌的生長(zhǎng)，但不影響金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)，從而可以將金黃色葡萄球菌分離出來(lái)，有高濃度食鹽的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍(lán)，可以用來(lái)鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌，有伊紅和美藍(lán)的培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基。答案　D,1．制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟： →稱(chēng)量→ → →倒平板。(2)倒平板的過(guò)程：

9、①在火焰旁右手拿錐形瓶，左手 。②右手拿錐形瓶，使錐形瓶的瓶口迅速通過(guò) 。③左手將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條縫隙，右手將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立刻 。④待平板冷卻凝固后，將平板 放置，使皿蓋在下、皿底在上。,培養(yǎng)基的制備與大腸桿菌的純化技術(shù),計(jì)算,溶化,滅菌,拔出棉塞,火焰,蓋上皿蓋,倒過(guò)來(lái),2．純化大腸桿菌(

10、1)微生物接種的最常用方法是 和 。(2)平板劃線(xiàn)法：通過(guò) 在瓊脂固體培養(yǎng)基表面 的操作，將聚集的菌種 。(3)稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的 ，然后將

11、不同稀釋度的菌液分別 ，進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，即可獲得 。,平板劃線(xiàn)法,稀釋涂布平板法,接種環(huán),連續(xù),劃線(xiàn),逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面,梯度稀釋,涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,單個(gè)細(xì)菌形成的菌落,3．菌種的保存為了保持菌種的純凈，需對(duì)菌種進(jìn)行保藏。

12、對(duì)于頻繁使用的菌種，我們可以采用 法；對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用 法。,臨時(shí)保藏,甘油管藏,[思維激活2] 除平板劃線(xiàn)法與稀釋涂布平板法外，還有哪些接種方法？微生物接種技術(shù)中最核心的內(nèi)容是什么？提示　微生物接種方法還有斜面接種及穿刺接種等方法，所有微生物接種方法中最核心的內(nèi)容是“防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度”。,1．制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基計(jì)算：依

13、據(jù)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方比例，計(jì)算配制100 mL的培養(yǎng)基時(shí)，各種成分的用量 稱(chēng)量：牛肉膏比較黏稠，可用稱(chēng)量紙稱(chēng)取，牛肉膏和蛋白胨都易吸潮，稱(chēng)取時(shí)動(dòng)作要迅速，稱(chēng)后要及時(shí)蓋上瓶蓋,2．微生物分離與純化技術(shù)(1)原理微生物的分離與純化就是將待檢測(cè)微生物樣品通過(guò)劃線(xiàn)或涂布接種在固體培養(yǎng)基上，樣品中的每一個(gè)細(xì)胞或孢子都可以生長(zhǎng)繁殖形成單個(gè)菌落。將單個(gè)菌落接種到斜面培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后，即可得到一個(gè)微生物的純種。,(2)方

14、法步驟微生物的分離包括樣品稀釋、劃線(xiàn)或涂布及培養(yǎng)三個(gè)步驟①梯度稀釋操作(如圖1)圖1　微生物分離操作流程圖,a．將分別盛有9 mL水的6支試管滅菌，并按101～106的順序編號(hào)。b．用移液管吸取1 mL已培養(yǎng)的菌懸液，注入第二支試管中。用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，使菌懸液與水充分混勻。c．從101倍稀釋的試管中吸取1 mL稀釋液，注入102倍稀釋的試管中，重復(fù)第2步的操作。以此類(lèi)推，直到完成最后一支試管的

15、稀釋。注意：移液管需要經(jīng)過(guò)滅菌。操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1～2 cm處。,②劃線(xiàn)或涂布平板劃線(xiàn)分離法：在近火焰處，左手拿皿底，右手拿接種環(huán)，挑取大腸桿菌培養(yǎng)液在平板上劃線(xiàn)，常用的劃線(xiàn)方法有平行劃線(xiàn)和連續(xù)劃線(xiàn)兩種。平行劃線(xiàn)時(shí)，每轉(zhuǎn)一個(gè)角度燒一次接種環(huán)。劃線(xiàn)完畢后，蓋上培養(yǎng)皿蓋，做好標(biāo)記。圖2　劃線(xiàn)示意圖,涂布分離法：取3個(gè)平板，底面分別用記號(hào)筆寫(xiě)上10－4、10－5和10－6三種稀釋度，然后用無(wú)菌吸管分別吸取相應(yīng)稀

16、釋度的稀釋液各0.1 mL，放入已標(biāo)記好的平板上，用無(wú)菌玻璃涂棒在培養(yǎng)基表面輕輕地涂布均勻，室溫下靜置5～10 min，使菌懸液吸附進(jìn)培養(yǎng)基(圖3)。③培養(yǎng)將劃線(xiàn)或涂布接種的平板倒置于培養(yǎng)箱或溫室中37 ℃培養(yǎng)16～24 h，即可長(zhǎng)出單菌落(圖4),圖3　涂布法示意圖　　　圖4　斜面接種法,(3)結(jié)果分析①確認(rèn)培養(yǎng)基制備是否合格為確認(rèn)培養(yǎng)基制備是否合格，需設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，即接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入37 ℃恒溫箱中，

17、培養(yǎng)12 h和24 h，觀(guān)察現(xiàn)象并記錄——如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2 d后無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則實(shí)驗(yàn)失敗需要重新制備。,②接種操作成功的標(biāo)準(zhǔn)如果培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合該菌菌落的特點(diǎn)，則說(shuō)明接種操作是符合要求的；如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說(shuō)明接種過(guò)程中無(wú)菌操作還未達(dá)到要求，實(shí)驗(yàn)失敗，需要分析原因，再次制備。,特別提醒　(1)進(jìn)行劃線(xiàn)時(shí)最后一區(qū)和第一區(qū)不可接觸。(2)平板

18、劃線(xiàn)各次灼燒接種環(huán)的目的。平板劃線(xiàn)操作第一次劃線(xiàn)及每次劃線(xiàn)之前都需灼燒滅菌，劃線(xiàn)操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒目的不同。(3)灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。,【鞏固2】 下列有關(guān)平板劃線(xiàn)操作的敘述不正確的是(　　)。A．第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物B．每次劃線(xiàn)前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種C．在第二區(qū)域內(nèi)劃線(xiàn)時(shí)，接種環(huán)

19、上的菌種直接來(lái)源于菌液D．劃線(xiàn)結(jié)束后，灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者,解析　平板劃線(xiàn)操作中，接種環(huán)取菌種前灼燒的目的是避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物，以后每次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線(xiàn)后殘留的菌種。劃線(xiàn)結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)，是為了能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。從第二次劃線(xiàn)開(kāi)始，每次劃線(xiàn)時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端。答案　C,【例1】 氯

20、苯化合物是重要的有機(jī)化工原料，因其不易降解，會(huì)污染環(huán)境。某研究小組依照下列實(shí)驗(yàn)方案(圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培養(yǎng)基配方如表1。,微生物的營(yíng)養(yǎng)與培養(yǎng)基類(lèi)型,圖1,表1　培養(yǎng)基的組成,(1)配制Ⅱ號(hào)固體培養(yǎng)基時(shí)，除添加Ⅱ號(hào)液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加1%的______。(2)培養(yǎng)基配制時(shí)，滅菌與調(diào)pH的先后順序是______。(3)從用途上來(lái)說(shuō)，Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基和Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基分別屬于______培養(yǎng)基和______培養(yǎng)基。在Ⅱ

21、號(hào)培養(yǎng)基中，為SP1菌提供氮源的成分是______。(4)在營(yíng)養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時(shí)，SP1的菌體變成一個(gè)圓形的休眠體，這種休眠體被稱(chēng)為_(kāi)_____。,(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號(hào)培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長(zhǎng)曲線(xiàn)(如圖2)。從圖2可知，SP1菌在______培養(yǎng)條件下最早停止生長(zhǎng)，其原因是_________________________________。圖2,思維導(dǎo)圖：,深度剖析　本題考查培養(yǎng)基的配制原則以及微生物的

22、實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過(guò)程，意在考查考生的圖表信息轉(zhuǎn)換與分析能力。(1)固體培養(yǎng)基中需加入瓊脂作為凝固劑。(2)先配制培養(yǎng)基后滅菌，調(diào)pH屬于培養(yǎng)基的配制過(guò)程，故先調(diào)pH后滅菌。(3)從用途上看，Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基為通用培養(yǎng)基(基本培養(yǎng)基)；Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，以氯苯為唯一的碳源，其中為SP1菌提供氮源的成分是硝酸銨。(4)芽孢是在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)高度濃縮脫水形成的抗逆性很強(qiáng)的球形或橢圓形的休眠體。(5)由圖示可知SP1菌在20 mg/L氯苯培養(yǎng)條件下最早停止

23、生長(zhǎng)，20 mg/L氯苯可提供的碳源較少，碳源最早耗盡，影響菌體的生長(zhǎng)繁殖。,答案　(1)瓊脂　(2)先調(diào)pH，后滅菌　(3)通用　選擇　硝酸銨　(4)芽孢　(5)20 mg/L氯苯　碳源最早耗盡[誤區(qū)警示](1)瓊脂是最常用的凝固劑，但固體培養(yǎng)基未必均加瓊脂，如棉子殼培養(yǎng)基也屬固體培養(yǎng)基。(2)牛肉膏、蛋白胨等天然物質(zhì)既可提供碳源，也可提供氮源及生長(zhǎng)因子。,【例2】 培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌

24、、消毒方法依次是(　　)。①化學(xué)消毒　②灼燒滅菌?、鄹蔁釡缇、茏贤饩€(xiàn)滅菌?、莞邏赫羝麥缇、薨褪舷痉ˋ．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤,無(wú)菌操作技術(shù),思維導(dǎo)圖：,深度剖析　培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿能耐高溫，需用干熱滅菌；接種環(huán)可用灼燒滅菌達(dá)到迅速?gòu)氐椎臏缇Ч?；?shí)驗(yàn)操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，如用酒精擦拭雙手；空氣可用紫外線(xiàn)消毒；牛奶為不破壞其營(yíng)養(yǎng)成分可采用巴

25、氏消毒法。答案　A,[思維深化]幾種常用滅菌方法比較(見(jiàn)下表),【例3】 如圖是微生物平板劃線(xiàn)示意圖，劃線(xiàn)的順序?yàn)?2345。下列操作方法正確的是(　　)。A．操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B．劃線(xiàn)操作須在火焰上進(jìn)行C．在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D．在12345區(qū)域中劃線(xiàn)前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌,微生物純化培養(yǎng),深度剖析　本題考查平板劃線(xiàn)的操作方法。在每次劃線(xiàn)前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是

26、在火焰上灼燒，接種時(shí)劃線(xiàn)操作是在火焰邊進(jìn)行。在5個(gè)區(qū)域中，只要有單個(gè)活細(xì)菌，通過(guò)培養(yǎng)即可獲得所需菌落。答案　D,[歸納提升](1)倒平板時(shí)不要將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間，否則此培養(yǎng)基不能用來(lái)培養(yǎng)微生物。(2)平板倒置原因：平板皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，培養(yǎng)基表面的溫度也較高，平板倒置后，既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。(3)兩種純化方法的比較,單擊此處進(jìn)入 隨堂達(dá)標(biāo)檢測(cè),旁欄思考題1．無(wú)菌

27、技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還有什么目的？解析　許多微生物對(duì)人類(lèi)是有害的，因此實(shí)驗(yàn)室中無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。答案　無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。,2．請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。(1)培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿。(2)玻璃試管、燒瓶和吸管。(3)實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。解析　消毒和滅菌是無(wú)菌技術(shù)的兩項(xiàng)基本技術(shù)，實(shí)踐中需要根據(jù)無(wú)菌

28、操作的對(duì)象合理地選擇使用。原則是既要考慮使用的效果，又要考慮無(wú)菌操作對(duì)象的承受能力。答案　(1)、(2)需要滅菌；(3)需要消毒。,倒平板操作討論題1．培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50 ℃左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？答案　可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。2．為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？答案　通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。,3．平板

29、冷凝后，為什么要將平板倒置？答案　平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。4．在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？答案　空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。,平板劃線(xiàn)操作討論題1．為什么在操作的第一步以及

30、每次劃線(xiàn)之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線(xiàn)操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？答案　操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線(xiàn)時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端，從而通過(guò)劃線(xiàn)次數(shù)的增加，使每次劃線(xiàn)時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到單個(gè)菌落。劃線(xiàn)結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。,2．在灼

31、燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線(xiàn)？答案　以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3．在做第二次以及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)？答案　劃線(xiàn)后，線(xiàn)條末端細(xì)菌的數(shù)目比線(xiàn)條起始處要少，每次從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。,涂布平板操作討論題涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線(xiàn)與系列稀釋的無(wú)菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)行

32、無(wú)菌操作？答案　應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周?chē)?；等等?練習(xí)1．提示　可以通過(guò)保持干燥、真空的條件，以及冷藏等方法來(lái)阻止微生物的生長(zhǎng)。解析　可以從微生物生長(zhǎng)需要哪些條件的角度來(lái)思考。例如，微生物的生長(zhǎng)需要水、空氣、適宜的溫度等。,2．提示　相同點(diǎn)：三種培養(yǎng)技術(shù)都需要為培養(yǎng)物提供充足的營(yíng)養(yǎng)。不同點(diǎn)：無(wú)土栽培技術(shù)的操作并不需要保證無(wú)菌的條件，而其他

33、兩種技術(shù)都要求嚴(yán)格的無(wú)菌條件。解析　可以從這三種培養(yǎng)技術(shù)的原理、操作步驟等方面分別進(jìn)行總結(jié)歸納。,3．提示　巴斯德設(shè)計(jì)了一個(gè)鵝頸瓶(曲頸瓶)，現(xiàn)稱(chēng)巴斯德燒瓶。燒瓶有一個(gè)彎曲的長(zhǎng)管與外界空氣相通。瓶?jī)?nèi)的溶液加熱至沸點(diǎn)，冷卻后，空氣可以重新進(jìn)入，但因?yàn)橛邢蛳聫澢拈L(zhǎng)管，空氣中的塵埃和微生物不能與溶液接觸，使溶液保持無(wú)菌狀態(tài)，溶液可以較長(zhǎng)時(shí)間不腐敗。如果瓶頸破裂，溶液就會(huì)很快腐敗變質(zhì)，并有大量的微生物出現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)得到了令人信服的結(jié)論：腐敗物質(zhì)

34、中的微生物是來(lái)自空氣中的微生物，這個(gè)實(shí)驗(yàn)也導(dǎo)致了巴斯德創(chuàng)造了一種有效的滅菌方法——巴氏滅菌法。巴氏滅菌法又稱(chēng)低溫滅菌法，先將要求滅菌的物質(zhì)加熱到65 ℃ 30 min鐘或72 ℃ 15 min，隨后迅速冷卻到10 ℃以下。這樣既不破壞營(yíng)養(yǎng)成分，又能殺死細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)體，巴斯德發(fā)明的這種方法解決了酒質(zhì)變酸的問(wèn)題，拯救了法國(guó)釀酒業(yè)?，F(xiàn)代的食品工業(yè)多采取間歇低溫滅菌法進(jìn)行滅菌。,解析　這是一道開(kāi)放性的問(wèn)題，答案并不唯一，重點(diǎn)在于鼓勵(lì)學(xué)生積極參與，