細胞工程1

1、專題2　細胞工程第2節(jié)　動物細胞工程第2課時　動物細胞融合與單克隆抗體,欄目鏈接,一、動物細胞融合,1．概念：指________或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程，又叫__________。2．過程：含有不同__________的兩個細胞―→________細胞。3．意義：克服了________雜交不親和的障礙。,兩個,細胞雜交,遺傳信息,雜交,遠緣,欄目鏈接,二、單克隆抗體,1．B淋巴細胞特點：一個B淋巴細胞分泌______

2、__種特異性抗體；體外培養(yǎng)條件下，B淋巴細胞________無限增殖。2．制備。,一,不能,雜交瘤細胞,能分泌所需抗體的雜交瘤細胞,欄目鏈接,3．應用：最廣泛的用途是用作__________________；用于____________；制成“生物導彈”，定向運載藥物。,體外診斷試劑,治療疾病,欄目鏈接,欄目鏈接,知識點1 動物細胞融合,1．概念：是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程，又稱細胞雜交。2．原理：細胞膜的流動

3、性。3．誘導方法：物理法——離心、振動、電激；化學法——聚乙二醇；生物方法——滅活的病毒。,,欄目鏈接,4．動物細胞融合的過程(如下圖所示)。,,欄目鏈接,5．優(yōu)點：動物細胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。6．植物、動物細胞融合的比較。,欄目鏈接,7.已成功的動物細胞融合實例。,欄目鏈接,例1 動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是(　　)A．誘導融合的方法完全相同B．所用的技術(shù)手段完全相同C．所

4、采用的原理完全相同D．都能形成雜種細胞,欄目鏈接,解析：首先兩種細胞工程技術(shù)中都要進行細胞融合，且融合的技術(shù)基本相同；第二，誘導的方法，除動物細胞的融合常用滅活的病毒做誘導劑外，其他的二者基本相同；第三，二者采用的原理不完全相同，動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性，最終形成的是雜種細胞，植物體細胞雜交除細胞膜的流動性外，還有細胞的全能性，最終雜種細胞形成的是雜種植株。答案：D,欄目鏈接,1．以下四種細胞工程技術(shù)中，培育出的新個體(或

5、細胞)同時具有兩個親本遺傳特性的是(　　)①植物組織培養(yǎng)?、谥参矬w細胞雜交?、蹌游锛毎诤稀、芎艘浦睞．①②③ B．①②④C．②③④ D．①③④,變 式遷 移,欄目鏈接,解析：①是通過細胞脫分化、再分化和有絲分裂形成新個體的過程，只具有一個親本遺傳特性。②③④不同程度地都具有雙親遺傳特性。答案：C,變 式遷 移,欄目鏈接,知識點2 單克隆抗體,1．

6、概念：由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體。2．特點：化學性質(zhì)單一，特異性強，靈敏度高，可大量制備。3．制備過程(如下圖所示)。,欄目鏈接,,,,欄目鏈接,,在制備單克隆抗體時，需經(jīng)兩次篩選，但目的不同。(1)第一次篩選是在B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合之后，因為有三種融合情況：B淋巴細胞與B淋巴細胞融合、骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合、B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合。而只有B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融

7、合細胞才是需要的雜種細胞。,,欄目鏈接,,(2)第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。由于該細胞群是由單個雜交瘤細胞克隆來的，所以產(chǎn)生的抗體一定是化學性質(zhì)單一、特異性強的單克隆抗體。,,欄目鏈接,,4．應用。(1)診斷疾病：診斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。(2)用于治療疾病和運載藥物：運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成“生物導彈”

8、。(3)分離和純化抗原分子。,,欄目鏈接,例2 下列關(guān)于單克隆抗體制備過程的敘述，正確的是(　　)A．制備過程中不需要動物細胞培養(yǎng)技術(shù)B．雜交瘤細胞具有漿細胞與癌細胞的所有特點C．經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細胞即可用于單克隆抗體的生產(chǎn)D．單克隆抗體制備過程中的細胞兩兩融合得到三種融合細胞,,欄目鏈接,解析：單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細胞與效應B細胞(漿細胞)結(jié)合，得到雜交瘤細胞經(jīng)過選擇培養(yǎng)基的篩選并經(jīng)單一抗體檢測后，培養(yǎng)能

9、產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞即可得單克隆抗體。雜交瘤細胞能無限繁殖但不具有癌細胞的轉(zhuǎn)移能力。經(jīng)過免疫的效應B細胞和骨髓瘤細胞雜交獲得三種細胞：效應B細胞與效應B細胞融合形成的融合細胞、效應B細胞與骨髓瘤細胞融合形成的雜交瘤細胞、骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合形成的融合細胞。答案：D,欄目鏈接,2．用動物細胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是(　　)A．將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞B．用纖維素酶處理B淋巴細胞與

10、小鼠骨髓瘤細胞C．用聚乙二醇作誘導劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合D．篩選雜交瘤細胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體,變 式遷 移,欄目鏈接,解析：酶具有專一性，纖維素酶只能分解纖維素，用纖維素酶處理植物細胞是植物細胞工程中用來除去細胞壁獲得原生質(zhì)體的方法，與動物細胞工程無關(guān)。B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞無纖維素。答案：B,變 式遷 移,欄目鏈接,點評：(1)教材中提及的B淋巴細胞實際上