_薄層色譜總結(jié)

1、薄層色譜方法總結(jié)薄層色譜方法總結(jié)1.方法原理(1)流動(dòng)相利用毛細(xì)管力帶著樣品穿過固定相。(2)樣品與固定相的相互作用是指組份在移行過程中由于偶極（誘導(dǎo)）偶極相互作用，氫鍵和范德華力的作用而產(chǎn)生不同程度的延緩、吸附、分散、離子交換和絡(luò)合等分離機(jī)理。2.溶劑使用的溶劑必須是“分析純”或“色譜純”，溶劑組成采用體積量比（如正丁醇冰乙酸水=4：1：1，VVV），或者絕對(duì)量（如18ml甲苯2ml甲醇）。其總量應(yīng)足以使TLCHPTLC板的浸入深度約

2、為5mm。展開劑要求新鮮配制，不要多次反復(fù)使用如需分層，則按要求放置分層后取需要的一相（上層或下層），備用。一、溶劑選擇規(guī)則：1、考慮分離成分的極性、溶解度、吸附度。2、先加入極性較小的溶劑，若不容再加入少量極性大的溶劑3、一般根據(jù)相似相溶原則，需要注意，極性相差大的不混溶。極性相差大的不混溶。4、混合溶劑通常使用一個(gè)高極性高極性和低級(jí)性低級(jí)性溶劑組成的混合溶劑?；旌先軇?。5、展開劑的比例要靠嘗試.一般根據(jù)文獻(xiàn)中報(bào)道的該類化合物用什么樣

3、的展開劑，就首先嘗試使用該類展開劑，然后不斷嘗試比例，直到找到一個(gè)分離效果好的展開劑。6、一般把兩種溶劑混合時(shí)采用高極性低極性的體積比為13的混合溶劑如果有分開的跡象再調(diào)整比例（或者加入第三種溶劑）達(dá)到最佳效果；如果沒有分開的跡象（斑點(diǎn)較“拖”），最好是換溶劑。二、展開劑的選擇條件：①對(duì)的所需成分有良好的溶解性；②可使成分間分開；②待測(cè)組分的Rf在0.2~0.8之間，定量測(cè)定在0.3～0.5之間；③不與待測(cè)組分或吸附劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；⑤沸

4、點(diǎn)適中，黏度較小；⑥展開后組分斑點(diǎn)圓且集中；⑦混合溶劑最好用新鮮配制。三、溶劑極性參數(shù)表環(huán)已烷環(huán)已烷:0.2、石油醚（、石油醚（Ⅰ類，類，30~60℃）、石油醚（、石油醚（Ⅱ類，類，60~90℃）、正已烷、正已烷:0.0、甲苯、甲苯:2.4、二甲苯、二甲苯:2.5、苯、苯:2.7、二氯甲烷、二氯甲烷:3.1、異丙醇、異丙醇:3.9、正丁醇、正丁醇:3.9、四氫呋喃、四氫呋喃:4.0、氯仿、氯仿:4.1、乙醇、乙醇:4.3、乙酸乙酯、乙酸

5、乙酯:4.4、甲醇、甲醇:5.1、丙酮、丙酮:5.1、乙腈、乙腈:5.8、乙酸、乙酸:6.0、水、水:10.21、一般來說，弱極性溶劑體系的基本兩相由正己烷正己烷和水組成，再根據(jù)需要加入甲醇、乙醇，乙酸乙酯來調(diào)節(jié)溶劑系統(tǒng)的極性，以達(dá)到好的分離效果，適合于生物堿、黃酮、萜類等的分離；2、中等極性的溶劑體系由氯仿氯仿和水基本兩相組成，由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等來調(diào)節(jié)，適合于蒽醌、香豆素，以及一些極性較大的木脂素和萜類的分離；3、強(qiáng)極性溶劑，由

6、正丁醇正丁醇和水組成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等來調(diào)節(jié)，適合于極性很大的生物堿類化合物的分離。四、展開劑的選擇物質(zhì)分子化學(xué)結(jié)構(gòu)中，通常由較極性部分較極性部分和非極性部分非極性部分兩部分。例如下面以苯丙烷為極性小部分，隨著極性基團(tuán)部分的增加，總體的極性就增加，展開劑極性也增加展開劑極性也增加了。4、類含氮有機(jī)物含氮有機(jī)物：鹽酸小檗堿：苯－醋酸乙酯－甲醇－異丙醇－濃氨試液(12：6：3：3：0.6)(氨蒸氣飽和)或正丁醇－冰醋酸水(7:1:

7、2)、麻黃堿：氯仿－甲醇－濃氨試液(20:5:0.5)或正丁醇－冰醋酸－水(8:2:1)甘草酸銨：醋酸乙酯－甲酸－冰醋酸－水(15:1:1:2)。結(jié)論分析：由于NH2硅醇基的作用很強(qiáng)，在強(qiáng)極性展開劑加有機(jī)酸、有機(jī)堿掃尾。對(duì)于極性化合物，使用正丁醇對(duì)斑點(diǎn)擴(kuò)散影響較小，因?yàn)榛衔锖凸枘z的作用強(qiáng)。當(dāng)被分離物質(zhì)為弱極性物質(zhì)，一般選用弱極性溶劑為洗脫劑；被分離物質(zhì)為強(qiáng)極性成分，則須選用極性溶劑為洗脫劑。如果對(duì)某一極性物質(zhì)用吸附性較弱的吸附劑（如以

8、硅藻土或滑石粉代替硅膠），則洗脫劑的極性亦須相應(yīng)降低。3.TLC的通用顯色方法理想的顯色希望靈敏度高，斑點(diǎn)顏色穩(wěn)定、斑點(diǎn)與背景間的對(duì)比度好，斑點(diǎn)的大小及顏色的深度與物質(zhì)的量成正比，在樣品組成并不完全已知的情況下，通用顯色方法顯得尤為重要，通用顯色方法主要有：1、紫外照射法：方便、不破壞樣品；2、碘蒸氣法：通用性強(qiáng)，與紫外法結(jié)合靈敏度高于該兩法單獨(dú)使用；3、熒光試劑：制造熒光背景，使原來紫外下無熒光物質(zhì)被鑒別，有熒光物質(zhì)更明顯；4、硫酸溶

9、劑：對(duì)絕大多數(shù)有機(jī)物有效，但有破壞性。4.薄層層析和紙色譜操作注意事項(xiàng)1、點(diǎn)樣點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。若因樣品溶液太稀，可重復(fù)點(diǎn)樣，但應(yīng)待前次點(diǎn)樣的溶劑揮發(fā)后方可重新點(diǎn)樣，以防樣點(diǎn)過大，造成拖尾、擴(kuò)散等現(xiàn)象，而影響分離效果。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面2、展開將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，浸入展開劑的深度為距原點(diǎn)5mm為

10、宜，密封，待展開至規(guī)定距離（一般為8～15cm），取出薄層板，晾干，待檢測(cè)。注：展開缸如需預(yù)先用展開劑預(yù)平衡，可在缸中加入適量的展開劑，密閉，一般保持15－30分鐘。3、顯色與檢視供試品含有可見光下有顏色的成分可直接在日光下檢視，也可用噴霧法或浸漬法以適宜的顯色劑顯色，或加熱顯色，在日光下檢視。有熒光的物質(zhì)或遇某些試劑可激發(fā)熒光的物質(zhì)可在356nm紫外光燈下觀察熒光色譜。對(duì)于可見光下無色，但在紫外光下有吸收的成分可用帶有熒光劑的硅膠板（

11、如GF254板），在254nm紫外光燈下觀察熒光板面上的熒光猝滅物質(zhì)形成的色譜。把我的祖?zhèn)髅胤礁嬖V你吧PE(6090)EtAcPE=1:2EtAcPEAcOH=15:5:1EtAcAcOHnButanolH2O=2:1:1:18年來我用這四種體系沒有出現(xiàn)過什么問題.我一直在用的是乙酸乙酯：環(huán)已烷，不斷調(diào)節(jié)比例，直到有滿意的Rf值，有拖尾時(shí)可能要加酸或堿，我一般乙酸和三乙胺。我用了好幾年了，都還好。不妨一試！鋪板鋪板用的勻漿不宜過稠或過稀