分子生物學(xué)常用溶液配制

1、1分子生物學(xué)常用溶液配制分子生物學(xué)常用溶液配制一、分子生物學(xué)常用一、分子生物學(xué)常用貯存液的配制存液的配制130%丙烯酰烯酰胺溶液胺溶液【配制方法】將29g丙烯酰胺和1gN，N’亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中。加熱至37℃溶解之，補加水至終體積為100ml。用濾器（0.45μm孔徑）過濾除菌，查證該溶液的pH值應(yīng)不大于7.0，置棕色瓶中保存于室溫?！咀⒁狻勘０肪哂泻軓姷纳窠?jīng)毒性并可以通過皮膚吸收，其作用具累積性。稱量丙烯酰胺

2、和亞甲雙丙烯酰胺時應(yīng)戴手套和面具。可認為聚丙烯酰胺無毒，但也應(yīng)謹慎操作，因為它還可能會含有少量未聚合材料。一些價格較低的丙烯酰胺和雙丙烯酰胺通常含有一些金屬離子，在丙烯酰胺貯存液中加入大約0.2體積的單床混合樹脂（MB1Mallinckrodt），攪拌過夜，然后用Whatman1號濾紙過濾以純化之。在貯存期間，丙烯酰胺和雙丙烯酰胺會緩慢轉(zhuǎn)化成丙烯酰和雙丙烯酸。240%丙烯酰烯酰胺【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA測序級）和20gN，

3、N’亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為600ml的蒸餾水中。繼續(xù)按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法處理，但加熱溶解后應(yīng)以蒸餾水補足至終體積為1L?！咀⒁狻恳娚鲜雠渲?0%丙烯酰胺的說明40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列測定。3放放線菌素菌素D溶液溶液【配制方法】把20mg放線菌素D溶解于4ml100%乙醇中，1:10稀釋貯存液，用100%乙醇作空白對照讀取OD440值。放線菌素D（分子量為1255）純品在水溶液中的摩爾消化系數(shù)為21，900，故而

4、1mgml的放線菌素D溶液在440nm處的吸光值為0.182，放線菌素D的貯存液應(yīng)放在包有箔片的試管中，保存于20℃。【注意】放線菌素D是致畸劑和致癌劑配制該溶液時必須戴手套并在通風(fēng)櫥內(nèi)操作而不能在開放在實驗桌面上進行謹防吸入藥粉或讓其接觸到眼睛或皮膚。藥廠提供的作治療用途的放線菌素D制品常含有糖或鹽等添加劑。只要通過測量貯存液在440nm波長處的光吸收確定放線菌素D的濃度，這類制品便可用于抑制自身引導(dǎo)作用。40.1molL腺苷三磷酸（

5、腺苷三磷酸（ATP）溶液）溶液【配制方法】在0.8ml水中溶解60mgATP用0.1molLNaOH調(diào)至pH值至7.0，用蒸餾水定容1ml，分裝成小份保存于70℃510molL乙酸乙酸酰溶液溶液【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中，加水定容至1L后過濾除菌。610%過硫酸硫酸銨溶液溶液3130.5mollEDTA(pH8.0)溶液溶液【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二鈉（EDTANa2H2O），在

6、磁力攪拌器上劇烈攪拌，用NaOH調(diào)節(jié)溶液的pH值至8.0（約需20gNaOH顆粒）然后定容至1L，分裝后高壓滅菌備用?！咀⒁狻縀DTA二鈉鹽需加入NaOH將溶液的pH值調(diào)至接近8.0才能完全溶解。14溴化乙溴化乙錠（10mgml溶液）溶液）【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙錠，磁力攪拌數(shù)小時以確保其完全溶解，然后用鋁箔包裹容器或轉(zhuǎn)移至棕色瓶中，保存于室溫?！咀⒁狻啃⌒模轰寤义V是強誘變劑并有中度毒性，使用含有這種染料的溶液時務(wù)必

7、戴上手套，稱量染料時要戴面罩。152HEPES緩沖鹽溶液溶液【配制方法】用總量為90ml的蒸餾水溶解1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2PO42H2O、0.2g葡聚糖和1gHEPES，用0.5mollNaOH調(diào)節(jié)pH值至7.05，再用蒸餾水定容至100ml。用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成5ml小份，貯存于20℃。16IPTG溶液溶液【配制方法】IPTG為異丙基硫代βD半乳糖苷（分子量為238.3），在8ml蒸餾水

8、中溶解2gIPTG后，用蒸餾水定容至10ml，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成1ml小份貯存于20℃。171molL乙酸乙酸鎂溶液溶液【配制方法】在800ml水中溶解214.46g四水乙酸鎂，用水定容至1L過濾除菌。181molLMgCl2溶液溶液【配制方法】在800ml水中溶解203.4gMgCl26H2O，用水定容至1L，分裝成小份并高壓滅菌備用?！咀⒁狻縈gCl2極易潮解，應(yīng)選購小瓶（如100g）試劑，啟用新瓶后勿長期存放。19