細胞工程復習精簡版

1、1名詞解釋1.1.細胞工程：細胞工程：是指主要以細胞為對象，應用生命科學理論，借助工程學原理與技術，有目的地利用或改造生物遺傳性狀，以獲得特定的細胞、組織產品或新型物種的一門綜合性科學技術。2.2.愈傷組織：愈傷組織：脫分化后的植物細胞經過細胞分裂，產生無組織結構、無明顯極性的松散的細胞團，稱之為愈傷組織（Callus）。3.3.外植體：外植體：主要指用于離體培養(yǎng)的植物或組織切段。4.4.極性（植物細胞）：極性（植物細胞）：細胞分化早期

2、的一個最主要現象就是極性的建立，它使細胞的一端與另一端之間顯示出結構和生理化上的差別，細胞內極性的建立是細胞分化開始的第一步。5.5.動物細胞培養(yǎng)：動物細胞培養(yǎng)：是模擬體內生理環(huán)境使分離的動物細胞在體外生存、增殖的一門技術。6.6.干細胞：干細胞：干細胞是一類具有自我更新和分化潛能的細胞。7.7.動物克?。簞游锟寺。簞游锟寺∈且环N通過核移植過程進行無性繁殖的技術。不經過有性生殖過程，而是通過核移植生產遺傳結構與細胞核供體相同動物個體的技

3、術，就叫做動物克隆。8.8.前體：前體：指某一代謝中間體的前一階段的物質。9.9.細胞融合：細胞融合：是指使用人工方法使兩個或兩個以上的細胞合并形成一個細胞的技術。10.10.單克隆抗體：單克隆抗體：經過免疫哺乳類動物單一的B淋巴細胞，可以分泌單一性抗體，這種具有特異性的、同性質的抗體為單克隆抗體。11.11.組織工程；組織工程；是利用生命科學、醫(yī)學、工程學原理與技術，單獨或組合地利用細胞、生物材料、細胞因子實現組織修復或再生的一門技術

4、。12.12.動物克?。粍游锟寺?；重復同7，另克隆動物一般指采用核移植、胚胎移植技術得到的動物。13.13.細胞轉化：細胞轉化：是指細胞發(fā)生遺傳改變而產生永生化，即由限定性細胞系轉化為連續(xù)性細胞系，可以在體外進行無限傳代和生長繁殖。14.14.胚胎干細胞：胚胎干細胞：簡稱ES(EmbryoStem)細胞，是一種全能干細胞，它是從著床前胚胎內細胞團或原始生殖細胞經體外分化抑制培養(yǎng)分離的一種全能性細胞系，可以分化成任何一種組織類型的細胞。1

5、5.15.動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)：動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)：是指在人工條件下（設定pH、溫度、溶氧等）高密度大量增殖的技術。培養(yǎng)流程：組織——消化——原代培養(yǎng)——傳代培養(yǎng)（細胞系與細胞株）——小規(guī)模培養(yǎng)（轉瓶等）——大規(guī)模培養(yǎng)（生物反應器）——產品。16.16.看護培養(yǎng)：看護培養(yǎng)：用一塊活躍生長的愈傷組織來看護單個細胞，使其持續(xù)分裂和增殖。這塊愈傷組織被稱為看護組織。具體方法：將單個細胞接種于濾紙上，再置于愈傷組織之上培養(yǎng)。優(yōu)點是：簡便、成功率高

6、。缺點是不能在顯微鏡下直接觀察。17.17.微載體：微載體：是直徑60250μm的適用于貼壁依賴型細胞生長的微粒。一般是由天然葡聚糖或者各種合成的聚合物組成。18.18.獲能：獲能：精子獲能是指精子獲得穿透卵子透明帶能力的過程。19.19.體細胞雜交：體細胞雜交：將兩個親本不同的體細胞的原生質體經人工誘導融合并培養(yǎng)再生成體的過程。20.多倍體多倍體：是指個體細胞中含有超過正常數目染色體的個體。二.簡答題簡答題.1.1.動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)

7、定義及有哪些培養(yǎng)系統(tǒng)？動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)定義及有哪些培養(yǎng)系統(tǒng)？動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)（celllargescaleculture）：是指在人工條件下（設定pH、溫度、溶氧等）高密度大量增殖的技術。培養(yǎng)系統(tǒng)：轉瓶（管）培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)，中空纖維生物反應器等。3（2）高pH的高濃度Ca2離子誘導融合：鈣離子中和原生質體膜或細胞膜表明表面電荷，使彼此緊密接觸，決定質膜的穩(wěn)定性和可塑性；高pH能改變質膜的表面電荷，利于細胞融合。（3）PEG誘導：P

8、EG分子具有輕微的負極性，可以與具有正極性基團的水分子、蛋白質、碳水化合物形成氫鍵，在相鄰的原生質體間起到分子橋的作用，使原生質體接觸。當PEG分子被洗脫時，膜電荷發(fā)生紊亂而重新分配。此時，一種原生質體上帶正電的基團可能與另外一個原生質體中帶負電的基團相連，導致原生質體融合。（4）高Ca2和pH誘導PEG結合：誘導在高Ca2和pH溶液的作用下，將與質膜結合的PEG分子洗脫，將進一步加劇電荷平衡失調，從而提高融合的幾率。7.7.胚胎干細胞

9、分化潛能評價？胚胎干細胞分化潛能評價？（1）體外分化實驗：將獲得的胚胎干細胞制成懸浮液培養(yǎng)在鋪有明膠的培養(yǎng)皿中，一段時間后部分細胞貼壁生長，分化成神經、肌肉、軟骨等不同細胞。（2）體內分化實驗：將一定量的胚胎干細胞注射進同源動物皮下，有組織瘤生成。（3）嵌合體形成：將胚胎干細胞通過聚集法或者注射法與受體胚胎結合，并且將胚胎移植進同期化代孕母受體，各自表達自己的基因型，最終得到嵌合體動物。（4）核移植：以胚胎干細胞作為核供體移植到去核卵母

10、細胞中，觀察重組胚胎是否能正常發(fā)育、產生個體。8.8.人工種子結構上從里到外分為哪幾部分，分別是什么？人工種子結構上從里到外分為哪幾部分，分別是什么？結構上從外向里包括三部分：（1）人工種皮外層，保護胚狀體中的水分免于喪失和防止外部力量沖擊；（2）人工胚乳含有必需的營養(yǎng)成分和某些植物激素；（3）胚狀體或芽。9.9.影響植物細胞次級代謝產物的因素？（下面內容可以只答個大概）影響植物細胞次級代謝產物的因素？（下面內容可以只答個大概）（1）生

11、物因素：）生物因素：細胞株：細胞株：穩(wěn)定、高產、生長速度快的細胞株是細胞大規(guī)模培養(yǎng)生產代謝產物的前提；細胞凋亡：細胞凋亡：細胞凋亡是植物細胞培養(yǎng)過程中不可避免的現象，但是可以通過條件改變進行調控來減少細胞凋亡；細胞團：細胞團：細胞團的形成影響穩(wěn)定的懸浮體系的維持，同時造成了培養(yǎng)物的顯著異質性，細胞團表面與內部的細胞存在營養(yǎng)吸收和代謝產物分泌的差異。此外，細胞團容易受剪切力影響而破碎，引起培養(yǎng)液粘度增加，致使氣體交換與傳遞受到影響。要保持

12、反應器良好的混合效果。適當大小的細胞團有利于代謝產物積累；生物合成機制：生物合成機制：結合目標產物進行生物合成機制研究，揭示代謝途徑及誘導合成機制是細胞培養(yǎng)的重要生物學問題，有利于指導建立優(yōu)化的培養(yǎng)工藝與技術。（2）化學因素：主要通過合適的培養(yǎng)基選擇來控制，包括營養(yǎng)鹽、前體和調節(jié)因子等。）化學因素：主要通過合適的培養(yǎng)基選擇來控制，包括營養(yǎng)鹽、前體和調節(jié)因子等。營養(yǎng)鹽：一方面是保證植物細胞生物量的增長；另外一方面是要保證細胞能合成和積累次

13、級代謝產物；前體：指某一代謝中間體的前一階段的物質。缺乏某一種前體時細胞就不能合成某一種代謝物，如果在培養(yǎng)基中加入外源前體將會有助于合成該代謝產物或使其產量增加。誘導子：是指那些能夠與細胞發(fā)生相互作用，通過細胞內一系列的信號轉導過程，作用于與細胞次生代謝相關的基因表達，進而改變細胞次生代謝相關酶的活力，最終使細胞次生代謝水平發(fā)生改變的物質。反饋抑制：植物次級代謝產物在培養(yǎng)系統(tǒng)的積累有時會對目標產物的合成具有反饋抑制。可以采用流加半連續(xù)培