pm2.5加劇慢性阻塞性肺疾病小鼠肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能缺陷的pi3kδrhoa細(xì)胞骨架機(jī)制

1、 分類號： 分類號： R563.3 密級： 密級： 公開 公開 研 究 生 學(xué) 位 論 文 論文題目（中文） 論文題目（中文） PM2.5 加劇慢性阻塞性肺疾病小鼠肺泡巨 加劇慢性阻塞性肺疾病小鼠肺泡巨 噬細(xì)胞吞噬功能缺陷的 噬細(xì)胞吞噬功能缺陷的 PI3Kδ-RhoA 細(xì)胞 細(xì)胞骨架機(jī)制 骨架機(jī)制 論文題目（外文） 論文題目

2、（外文） Mechanisms of cytoskeleton and PI3Kδ-RhoA in PM2.5 deteriorating phagocytosis defect of alveolar macrophage in chronic obstructive pulmonary disease mice 研 究 生 姓 名 研 究 生 姓 名 夏強(qiáng) 夏強(qiáng) 學(xué) 科 、 專 業(yè) 學(xué) 科 、 專 業(yè) 內(nèi)科學(xué) 內(nèi)科學(xué)·

3、;呼吸系病 呼吸系病 研 究 方 向 研 究 方 向 慢性阻塞性肺疾病 慢性阻塞性肺疾病 學(xué) 位 級 別 學(xué) 位 級 別 碩士 碩士 導(dǎo) 師 姓 名 、 職 稱 導(dǎo) 師 姓 名 、 職 稱 論文工作起止年 論文工作起止年月 劉曉菊 劉曉菊 教授 教授 2015 2015 年 10 10 月至 月至 2017 2017 年 3 月 論 文 提 交 日 期 論 文 提 交 日 期 2017 2017 年 4 月 論 文 答 辯

4、日 期 論 文 答 辯 日 期 2017 2017 年 5 月 學(xué) 位 授 予 日 期 學(xué) 位 授 予 日 期 2017 年 6 月 校址：甘肅省蘭州市 校址：甘肅省蘭州市I PM2.5 加劇慢性阻塞性肺疾病小鼠肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能 加劇慢性阻塞性肺疾病小鼠肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能缺陷的 缺陷的 PI3Kδ-RhoA 細(xì)胞骨架機(jī)制 細(xì)胞骨架機(jī)制 中文摘要 中文摘要 背景與 背景與目的 目的：PM2.5 能夠加劇慢性阻塞性肺疾?。璺危?/p>

5、小鼠肺泡巨噬細(xì)胞（AM）吞噬功能障礙，但其通過磷脂酰肌醇 3-激酶 δ（PI3Kδ）-Ras 同源基因家族成員 A（RhoA）及細(xì)胞骨架影響慢阻肺 AM 吞噬能力的機(jī)制鮮有報道，本文探討 PM2.5 加劇慢阻肺小鼠 AM 吞噬功能缺陷的 PI3Kδ-RhoA 細(xì)胞骨架機(jī)制。 方法： 方法：將 40 只 8 周齡無特定病原體 （SPF 級） BALB/c 雄性小鼠隨機(jī)分為健康對照組、慢阻肺組、健康 PM2.5 組、慢阻肺 PM2.5 組，

6、每組 10 只。單純香煙煙霧暴露法建立慢阻肺小鼠模型，造模的同時，慢阻肺 PM2.5 組與健康 PM2.5組小鼠均給予連續(xù)霧化吸入 PM2.5(588 µ g/m3) 90 d， 而健康對照組和慢阻肺組同時給予相同體積的生理鹽水霧化吸入。 造模結(jié)束后采用無創(chuàng)小鼠肺功能測量儀測定各組小鼠肺功能，以吸氣峰流速（PIF）、呼氣峰流速（PEF）及呼出 50%潮氣量時流速（EF50）表示，處死小鼠，取肺組織行 HE 染色，光鏡下觀察病理

7、改變；不連續(xù)密度梯度離心法分離 AM；流式細(xì)胞術(shù)檢測各組小鼠 AM 吞噬異硫氰酸熒光素標(biāo)記大腸桿菌（FITC-E.coli）的能力，用平均熒光強(qiáng)度（MFI）和吞噬陽性百分比（吞噬%）表示；提取 AM 總 RNA 與蛋白，實(shí)時熒光定量 PCR（RT-PCR）和蛋白印跡法（Western blot）檢測 PI3Kδ 和 RhoA mRNA、蛋白的表達(dá)；G-LISA 試劑盒檢測 RhoA 活性；共聚焦顯微鏡觀察 AM 細(xì)胞骨架的形態(tài)學(xué)變化。

8、結(jié)果： 結(jié)果： （1）小鼠肺功能及肺組織病理：慢阻肺組和健康 PM2.5 組小鼠 PIF、PEF 及 EF50 （7.06±0.52、 4.24±0.29、 3.27±0.36） 和 （7.74±0.43、 5.21±0.31、3.40±0.32）均顯著低于健康對照組（10.37±0.76、7.13±0.41、5.04±0.47） （均P＜0.01

9、） ，慢阻肺 PM2.5 組（4.73±0.21、3.43±0.17、2.04±0.14）均顯著低于慢阻肺組（均 P＜0.01） 。慢阻肺組、健康 PM2.5 組小鼠肺泡結(jié)構(gòu)紊亂，肺泡壁變薄，肺泡腔膨脹、破裂，肺泡間隔斷裂，各級支氣管壁可見炎癥細(xì)胞浸潤，支氣管管壁狹窄；且慢阻肺 PM2.5 組肺泡破壞程度明顯重于慢阻肺組；健康對照組肺泡壁結(jié)構(gòu)完整，氣道上皮無細(xì)胞脫落，無炎癥細(xì)胞浸潤，肺泡腔內(nèi)幾乎無滲出，肺泡