2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:探討哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白-細(xì)胞分裂周期蛋白42(mTOR-Cdc42)信號(hào)通路在慢性阻塞性肺疾?。璺危┬∈蠓闻菥奘杉?xì)胞(AM)吞噬功能低下中的作用。
  方法:將40只SPF級(jí)8周齡雄性 BALB/c小鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為健康對(duì)照組、慢阻肺組、健康雷帕霉素組及慢阻肺雷帕霉素組,每組10只。采用90天單純香煙煙霧暴露法建立慢阻肺小鼠模型,造模結(jié)束后觀察各組小鼠的肺功能及病理變化,分離小鼠 AM,其中健康雷帕霉素組及慢阻肺

2、雷帕霉素組用終濃度10nmol/L雷帕霉素孵育24h。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠AM吞噬異硫氰酸酯熒光素標(biāo)記大腸桿菌(FITC-E.coli)的能力;采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)AM mTOR及Cdc42 mRNA的表達(dá);采用蛋白印跡(Western Blot)法檢測(cè)AM mTOR、磷酸化-mTOR(p-mTOR)以及Cdc42蛋白的表達(dá);采用小G蛋白活性(G-LISA)試劑盒檢測(cè)AM Cdc42的活性;采用激光共聚焦

3、顯微鏡觀察AM細(xì)胞骨架變化。
  結(jié)果:(1)慢阻肺小鼠模型的肺功能及肺組織病理改變:吸氣峰流速(PIF)、呼氣峰流速(PEF)和呼出50%潮氣量時(shí)的流速(EF50):慢阻肺組(7.5±1.0、4.67±0.6、3.29±0.43)明顯低于健康對(duì)照組(11.61±1.12、7.63±0.44、5.05±0.37)(均P<0.01);慢阻肺小鼠肺組織光鏡下可見(jiàn)明顯的支氣管炎癥和肺氣腫改變,健康對(duì)照組小鼠無(wú)上述改變。
 ?。?)

4、AM吞噬 FITC-E.coli的能力:用平均熒光強(qiáng)度(MFI)和吞噬陽(yáng)性細(xì)胞百分比(吞噬%)表示:慢阻肺組(4060±590、28.65±1.26)較健康對(duì)照組(9190±988、67.50±4.56)明顯降低(均P<0.01);慢阻肺雷帕霉素組(4856±762、38.31±1.71)比慢阻肺組增高(P<0.05或P<0.01);健康雷帕霉素組(9207±967、67.91±3.64)較健康對(duì)照組無(wú)差異。
 ?。?)AM mT

5、OR、Cdc42 mRNA的表達(dá):慢阻肺組AM mTOR、Cdc42 mRNA的表達(dá)(2.62±0.46、2.56±0.50)較健康對(duì)照組(1.00±0.00、1.00±0.00)明顯增加(均P<0.01);慢阻肺雷帕霉素組AM mTOR、Cdc42 mRNA的表達(dá)(1.40±0.36、1.38±0.34)較慢阻肺組明顯降低(均 P<0.01);健康雷帕霉素組 AM mTOR、Cdc42 mRNA的表達(dá)(0.94±0.37、0.90±0

6、.34)較健康對(duì)照組無(wú)差異。
 ?。?)AM mTOR、p-mTOR以及Cdc42蛋白表達(dá):慢阻肺組(1.3047±0.5188、1.4645±0.4330、1.6121±0.3749)較健康對(duì)照組(0.4829±0.2674、0.5798±0.2552、0.6671±0.2168)明顯增加(均P<0.01);慢阻肺雷帕霉素組(0.8996±0.6634、0.9208±0.2771、0.9143±0.4764)較慢阻肺組降低(P<

7、0.05或P<0.01);健康雷帕霉素組(0.4725±0.2845、0.5592±0.2176、0.6368±0.22)較健康對(duì)照組無(wú)差異。
 ?。?) AM Cdc42的活性:慢阻肺組(0.4591±0.0853)較健康對(duì)照組(0.2995±0.0674)明顯升高(P<0.01);慢阻肺雷帕霉素組(0.3616±0.060)較慢阻肺組降低(P<0.01);而健康雷帕霉素組(0.2668±0.0572)較健康對(duì)照組無(wú)差異。

8、> ?。?)AM細(xì)胞骨架變化:慢阻肺組AM細(xì)胞周?chē)梢?jiàn)絲狀偽足伸出雜亂、長(zhǎng)短不一,板狀偽足面積增加;慢阻肺雷帕霉素組AM細(xì)胞形態(tài)規(guī)則,呈圓形或橢圓形,周?chē)梢?jiàn)較長(zhǎng)的絲狀偽足;健康對(duì)照組和健康雷帕霉素組AM細(xì)胞形態(tài)規(guī)則,呈圓形或者橢圓形,細(xì)胞周?chē)匆?jiàn)明顯的絲狀偽足。
 ?。?)相關(guān)性分析:各組小鼠 AM mTOR和Cdc42的mRNA、蛋白,p-mTOR蛋白以及Cdc42的活性與AM吞噬FITC-E.coli的平均熒光強(qiáng)度均呈負(fù)相關(guān)

9、(P<0.05或P<0.01);各組小鼠AM mTOR的mRNA、蛋白及p-mTOR蛋白與Cdc42的mRNA、蛋白和活性均呈正相關(guān)(P<0.05或者P<0.01)。
  結(jié)論:?jiǎn)渭兿銦煙熿F可復(fù)制慢阻肺小鼠模型;慢阻肺小鼠AM吞噬功能降低;mTOR-Cdc42信號(hào)通路在慢阻肺小鼠 AM中處于活化狀態(tài);mTOR-Cdc42信號(hào)通路活化致慢阻肺小鼠AM細(xì)胞骨架異常重排與其吞噬功能低下有關(guān);雷帕霉素抑制慢阻肺mTOR-Cdc42信號(hào)通路

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