樹突狀細(xì)胞在慢性阻塞性肺疾病肺臟中的變化及意義.pdf

1、慢性阻塞性肺疾?。–OPD）是一種常見呼吸系統(tǒng)疾病，隨著社會工業(yè)化程度的提高，大氣污染的加重，全球發(fā)病率呈上升的趨勢。目前COPD的發(fā)病機制仍未闡明，目前認(rèn)為可能和氣道的慢性炎癥、蛋白酶與抑蛋白酶失衡、氧化與抗氧化失衡等機制有關(guān)。其中氣道慢性非特異性炎癥機制備受關(guān)注。樹突細(xì)胞（Dendritic Cell，DCs）作為迄今發(fā)現(xiàn)的功能最強的抗原提呈細(xì)胞（APC），在調(diào)節(jié)肺組織免疫反應(yīng)中起關(guān)鍵作用，它們能感知捕獲吸入的抗原，有效地將抗原加工

2、、再游走遞呈到回流的肺淋巴結(jié)中，激活淋巴結(jié)中的T 淋巴細(xì)胞，并決定由哪一種免疫反應(yīng)（Th1 型、Th2 型或免疫耐受）來完成“戰(zhàn)斗任務(wù)”，在肺組織中發(fā)揮著呼吸道“哨兵”的作用。我們設(shè)想COPD患者氣道中的這種慢性非特異性的炎癥與氣道、肺實質(zhì)中的DCs 功能異常是否有密切關(guān)系？故本實驗通過免疫組化染色觀察COPD 大鼠模型中氣道及肺組織中DCs的數(shù)量及其表面分子的表達(dá)，進(jìn)一步了解DCs 在COPD中的數(shù)量及功能變化。
　　 研究目

3、的：通過研究DCs 在COPD中的數(shù)量及功能變化，將有助于我們對DCs 在COPD慢性炎癥中的作用進(jìn)一步了解，亦有助于為闡明COPD 發(fā)病機制提供依據(jù)。
　　 研究方法：實驗動物為清潔級SD大鼠，8周齡雄性大鼠40只，體重約(200±20)g，隨機分為正常對照組（Ⅰ組）、吸煙30天組（Ⅱ組）、吸煙 60天組（Ⅲ組）、吸煙 90天組（Ⅳ組），每組均為10只。吸煙組放人自制的吸煙箱中，每次點燃2支香煙放入，燃燒10分鐘，休息5分鐘后

4、再放入2支香煙，每天吸煙40支，每周吸煙6天。Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組分別在吸煙30天、60天、90天后處死各組大鼠。分離肺組織,置于4%甲醛固定液中保存，常規(guī)石蠟包埋、切片 4μm，組織學(xué)檢查（HE染色)及免疫組化備用。應(yīng)用免疫組化法及計算機圖像分析方法分析比較各組氣道DCs分布、數(shù)量及表面分子CD80、CD86、MHCⅡ的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1、模型組及吸煙組大鼠吸煙2 周后開始出現(xiàn)倦怠、毛發(fā)失去光澤、呼吸道分泌增多

5、，HE染色提示Ⅳ組大鼠有慢性阻塞性肺疾病特征性病理改變。
　　 2、吸煙組大鼠DCs 細(xì)胞數(shù)量較對照組增多（P<0.05），隨吸煙時間的延長，增多越明顯。
　　 3、對照組與吸煙組比較，肺臟中DCs 表面分子CD80、MHC－Ⅱ表達(dá)下調(diào)（P<0.01），隨吸煙時間的延長，下調(diào)越明顯。
　　 4、與對照組比較，吸煙組肺臟DCs 表面分子CD86 表達(dá)變化不明顯。（P>0.05）。
　　 結(jié)論：