功能化磁性粒子—高效液相色譜分離分析體液中的單胺類神經遞質.pdf

1、單胺類神經遞質包括兒茶酚胺類的去甲腎上腺素(NE)、腎上腺素(E)和多巴胺(DA)，以及吲哚胺類的5-羥色胺(5-HT)等，這些神經遞質在生物體內起著重要作用，其含量與人體健康密切相關。由于體液組成復雜，且單胺類神經遞質在體液中的含量低，因此，利用前處理過程對樣品進行除雜與富集是非常必要的。與傳統(tǒng)的樣品前處理方法相比，功能化磁性粒子由于具有易于分離、安全無毒等優(yōu)點，在醫(yī)藥、生物、環(huán)保等方面已得到廣泛應用，但是將磁性粒子用于體液中單胺類神

2、經遞質分離分析方面的研究還很少。
　　本文成功地制備了三種不同功能化的磁性粒子，并利用多種手段對合成的功能化磁性粒子進行了表征，分析了它們的性質。分別利用這三種功能化磁性粒子對尿液中單胺類神經遞質進行了分離分析研究，取得了令人滿意的效果。
　　論文主要分為以下四個部分:
　　1.對單胺類神經遞質、單胺類神經遞質的檢測方法、單胺類神經遞質的前處理方法進行了綜述，重點介紹了固相萃取在單胺類神經遞質前處理方面的應用及功能化磁

3、性粒子的制備。
　　2.采用多步法制備得到苯硼酸基功能化磁性納米粒子(Fe3O4@APBANPs)，并通過透射電鏡(TEM)、傅里葉紅外光譜儀(FT-IR)、X射線衍射儀(XRD)和振動樣品磁強計(VSM)等不同的表征手段對合成的Fe3O4@APBANPs粒子進行表征。利用Fe3O4@APBANPs對四種單胺類神經遞質NE、E、DA及5-HT進行分離提取，結合高效液相色譜-電化學(HPLC-ECD)分析檢測。在1mL料液中，確定了

4、單胺類神經遞質濃度為5μg/mL時，磁性粒子用量為10mg，萃取時間為5min，洗脫劑為0.02mol/L鹽酸-甲醇的最佳萃取-洗脫條件。實驗表明，Fe3O4@APBANPs磁性粒子對三種兒茶酚胺類神經遞質NE、E及DA均展示了較好的提取效果，而對吲哚胺類神經遞質5-HT幾乎沒有提取，說明磁性粒子上的硼酸基對具有鄰位酚羥基結構的化合物具有明顯的選擇性。在優(yōu)化條件下，將該磁性粒子用于分離富集尿樣中的NE、E和DA，結果顯示，NE、E及DA

5、在0.01～2.0μg/mL濃度范圍內色譜峰高與濃度呈現良好的線性關系，檢出限分別達到了7.8ng/mL、2.0ng/mL、7.9ng/mL，相對標準偏差均小于5.3％。將建立的方法用于人體尿樣中單胺類神經遞質的測定，獲得了令人滿意的結果，說明建立的Fe3O4@APBANPs磁性粒子分離富集-高效液相色譜測定單胺類神經遞質的方法是一種簡單、快速、靈敏的新方法。
　　3.合成了二氧化鈦包裹的介孔功能化磁性納米粒子(Fe3O4@nSi

6、O2@mTiO2NPs)，并利用TEM、FT-IR、XRD、VSM和BET等表征手段對合成的粒子進行了表征分析。利用Fe3O4@nSiO2@mTiO2NPs對四種單胺類神經遞質NE、E、DA及5-HT進行了分離提取，對料液相pH、提取時間、緩沖溶液種類與濃度、磁性粒子用量、洗脫溶劑種類與濃度等條件進行了優(yōu)化。結果表明，合成的磁性粒子具有較高的選擇性，對NE、E及DA展示了較好的萃取效果，而對5-HT幾乎沒有萃取。在優(yōu)化條件下，該磁性粒子

7、對NE、E和DA的富集因子范圍在8-10之間，結合HPLC-ECD分析檢測，在0.01-1.5μg/mL濃度范圍內，NE、E和DA的峰高與濃度之間呈現良好的線性關系，檢出限分別為11.8ng/mL、0.66ng/mL、6.0ng/mL。將建立的方法用于人體尿樣中單胺類神經遞質的測定，獲得了令人滿意的結果，說明建立的Fe3O4@nSiO2@mTiO2NPs磁性粒子分離富集-高效液相色譜測定單胺類神經遞質的方法是一種簡單、快速、靈敏的分析方

8、法。
　　4.采用一步包埋法制備了羧甲基纖維素包裹的功能化磁性納米粒子(Fe3O4@CMCNPs)，并利用TEM、FT-IR、XRD、和VSM等手段對合成的磁性粒子進行了表征。利用Fe3O4@CMCNPs磁性粒子對四種單胺類神經遞質NE、E、DA、5-HT進行分離提取，對料液相pH、提取時間、洗脫溶劑種類與濃度等條件進行了優(yōu)化。在優(yōu)化條件下，將該磁性粒子用于分離富集尿樣中的單胺類神經遞質，結合高效液相色譜-電化學方法(HPLC-E