鈍頂節(jié)旋藻16S rRNA-ITS分子鑒定及重金屬Pb2+對(duì)節(jié)旋藻影響研究.pdf

1、節(jié)旋藻(Arthrospira)是一類光合自養(yǎng)的不形成異形胞的藍(lán)細(xì)菌,大部分分布于淡水中,少量分布在海洋或咸水中。節(jié)旋藻含有豐富的蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)、維生素等多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),因此被稱為“21世紀(jì)最理想的食品”,是目前應(yīng)用最廣泛的微藻之一。節(jié)旋藻的規(guī)?；囵B(yǎng)及生理生化、分子遺傳研究得到了廣泛的關(guān)注。
　　本研究針對(duì)不同來源和不同形態(tài)的節(jié)旋藻藻株,通過系列稀釋法和微吸管分離法挑取單藻絲,建立了節(jié)旋藻藻種庫及藻的純培養(yǎng)體系。以純培養(yǎng)的節(jié)旋藻為

2、材料,結(jié)合細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察,比較了6種提取節(jié)旋藻全基因組 DNA的方法,并運(yùn)用16S rRNA-ITS區(qū)基因分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)這些藻株樣品進(jìn)行相關(guān)序列測(cè)定和分子系統(tǒng)進(jìn)化分析。結(jié)果表明,凍融 CTAB法能夠提取出高質(zhì)量的節(jié)旋藻全基因組,并能夠滿足分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的要求;分子系統(tǒng)研究表明,純化的企業(yè)藻株均為鈍頂節(jié)旋藻,它與螺旋藻之間差異明顯,在系統(tǒng)發(fā)育樹上分成兩支。
　　本研究從純培養(yǎng)的節(jié)旋藻藻株中,選取 A和 B兩株藻,分別從生物量、藻膽蛋

3、白、可溶性蛋白及半數(shù)致死濃度方面研究了重金屬鉛離子對(duì)節(jié)旋藻藻株的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,鉛離子對(duì)藻株 B比 A的影響更為明顯。藻株 A:Pb2+濃度低于1 mg/L,促進(jìn)其生長(zhǎng);Pb2+濃度為10-40 mg/L,對(duì)其無明顯影響;Pb2+濃度大于50 mg/L時(shí),抑制其生長(zhǎng);Pb2+濃度為100 mg/L,藻絲體降解死亡;96 h半數(shù)致死濃度(EC50)為61.66 mg/L。藻株 B:Pb2+濃度低于20 mg/L,對(duì)其無明顯影響;Pb2