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1、Vacuolar(H+)-ATPase(V-ATPase)廣泛分布在質(zhì)膜及內(nèi)膜系統(tǒng)中,是一種多亞基的質(zhì)子泵。該酶能夠水解ATP,轉(zhuǎn)運(yùn)質(zhì)子,維持胞質(zhì)pH平衡,形成跨膜電化學(xué)梯度。Vhasfd編碼V-ATPase的H亞基,H亞基對(duì)V-ATPase正常功能的行使是必需的。有報(bào)道表明,沉默V型ATP酶的A或E亞基會(huì)對(duì)靶標(biāo)生物產(chǎn)生重要影響。但是目前對(duì)H亞基的研究報(bào)道是很少的。
東亞飛蝗(Locusta migratoria mani
2、lensis,Meyen)是我國(guó)重點(diǎn)防治的一種遷飛性。農(nóng)業(yè)害蟲,對(duì)東亞飛蝗的研究以及對(duì)蝗災(zāi)的防治措施一直都被人們廣泛關(guān)注。目前,使用有機(jī)磷類殺蟲劑仍然是防治東亞飛蝗的主要手段,但長(zhǎng)期使用殺蟲劑會(huì)導(dǎo)致Resistence、Residue、Resurgence(3R)問題的產(chǎn)生。因此,開發(fā)低毒性、高效率、無殘留、無公害的新型農(nóng)藥已經(jīng)成為防治農(nóng)業(yè)害蟲的重要任務(wù)。對(duì)東亞飛蝗的基因進(jìn)行克隆并研究其功能,分析其對(duì)東亞飛蝗生長(zhǎng)發(fā)育是否有重要作用的基因
3、,能否為新型殺蟲藥物的研發(fā)提供靶標(biāo)的相關(guān)課題有重大意義。
主要研究結(jié)果有:
①克隆得到了編碼東亞飛蝗V型ATP酶H亞基的基因,Lm-Vhasfd,該基因全長(zhǎng)cDNA序列為2018bp,開放閱讀框編碼515個(gè)氨基酸殘基。
②半定量PCR結(jié)果分析表明,在所選取的各個(gè)組織中Lm-Vhasfd都有表達(dá),在血淋巴、中腸、軀干和腿組織中高表達(dá),在脂肪體和頭組織中表達(dá)量相對(duì)低。
③通過注射特異d
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