天麻素調(diào)脂及抗早期動(dòng)脈粥樣硬化的臨床及實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：在體實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)對(duì)高脂血癥（Hyperlipidemia，HLP）患者及模型小鼠體重及血脂水平的影響，研究天麻素治療HLP的有效性；通過(guò)觀察HLP模型小鼠主動(dòng)脈根部脂質(zhì)蓄積情況，從減少脂質(zhì)沉積角度探討天麻素抗早期動(dòng)脈粥樣硬化（Atherosclerosis，AS）的作用；通過(guò)檢測(cè)HLP患者及模型小鼠血清中白介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、細(xì)胞間黏附分子-1（Intercellular cell adhesi

2、on molecule-1，ICAM-1）、腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）的表達(dá)水平，從調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)角度探討天麻素抗早期AS的作用。離體實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)軟脂酸鹽（Palmitate acid，PA）預(yù)處理原代培養(yǎng)的血管平滑肌細(xì)胞（Vascular smooth muscle cells,VSMC）,在細(xì)胞層面模擬HLP刺激環(huán)境，通過(guò)觀察細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積情況并檢測(cè)細(xì)胞上清及細(xì)胞內(nèi)炎癥因子的表達(dá)水平

3、，進(jìn)一步探討天麻素抗早期AS的作用機(jī)制。
　　方法：臨床試驗(yàn):選取2014年9月-2015年2月就診于廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科與中西結(jié)合科門診及病房的68例HLP患者作為試驗(yàn)對(duì)象。隨機(jī)分為對(duì)照組和天麻素緩釋片組。天麻素緩釋片組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上給予天麻素緩釋片150mg/片，1片/次，每日2次（共300mg）；對(duì)照組維持基礎(chǔ)治療。6周后比較患者治療前后臨床癥狀、體重及血脂水平變化，采用酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme-linked i

4、mmuno sorbent assay，ELISA）比較血清中IL-1β、ICAM-1、TNF-α的表達(dá)水平。
　　動(dòng)物實(shí)驗(yàn):將60只C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、高脂組和天麻素組。對(duì)照組給予普通飲食，高脂組及天麻素組給予高脂飲食；天麻素組給予天麻素飲水（0.2mg/ml），對(duì)照組及高脂組予以普通飲水。3月后，比較小鼠體重、血脂水平及主動(dòng)脈根部脂質(zhì)沉積情況，運(yùn)用ELISA及實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（Real-time pol

5、ymerase chain reaction，RT-PCR）比較整體及血管局部 IL-1β、ICAM-1、TNF-α的表達(dá)水平。
　　細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
　　細(xì)胞實(shí)驗(yàn):分為對(duì)照組、PA組及天麻素組。100μMPA預(yù)處理原代VSMC，200μg/ml天麻素干預(yù)24小時(shí)后，采用油紅O染色及定量分析比較細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積情況，采用ELISA及RT-PCR比較上清液及細(xì)胞內(nèi)IL-1β、ICAM-1、TNF-α的表達(dá)水平。
　　結(jié)果臨床實(shí)驗(yàn)中

6、，天麻素緩釋片治療后，天麻素組血脂治療總有效率達(dá)44％。患者血脂水平較治療前明顯改善，其中總膽固醇（Total cholesterol，TC）、甘油三酯（Total triglyceride，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（Low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）水平均顯著下降（P<0.01）,高密度脂蛋白膽固醇（High density lipoprotein cholesterol，HDL-C

7、）水平則無(wú)明顯改變。此外，天麻素組患者血清中ICAM-1及IL-1β的表達(dá)水平均出現(xiàn)顯著降低（P<0.05）;而TNF-α的表達(dá)水平雖出現(xiàn)下降，但較對(duì)照組無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。
　　動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，體重方面，天麻素組小鼠較高脂組出現(xiàn)了顯著下降（P<0.05），但較對(duì)照組仍有一定程度增加（P<0.01）；血脂方面，天麻素組較高脂組，小鼠血清中TC、TG、LDL-C出現(xiàn)了不同程度的下降（P均<0.05），而HDL-C水平未發(fā)生

8、明顯改變（P>0.05）；脂質(zhì)蓄積方面，天麻素組小鼠主動(dòng)脈根脂質(zhì)蓄積較高脂組有一定程度的減輕；全身性炎癥反應(yīng)方面，天麻素組小鼠血清中IL-1β、ICAM-1、TNF-α表達(dá)水平較高脂組均出現(xiàn)一定程度的下降（P均<0.05）；血管局部炎癥反應(yīng)方面，天麻素組小鼠IL-1β、ICAM-1、TNF-α表達(dá)水平較高脂組也均出現(xiàn)一定程度的下降（P均<0.05）。
　　細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，天麻素組油紅O著色較PA組顯著減少，定量分析結(jié)果顯示，天麻素組相

9、對(duì)吸光度較PA組顯著降低（P<0.05）。而天麻素組細(xì)胞上清液及細(xì)胞內(nèi)ICAM-1、TNF-α的表達(dá)水平較PA組明顯降低（P均<0.05），但I(xiàn)L-1β下降水平無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論：1.天麻素具有一定的降脂作用。能夠顯著降低HLP患者及HLP模型小鼠血清中TC、TG、LDL-C水平，但對(duì)HDL-C的水平無(wú)明顯改善。2.天麻素對(duì)HLP模型小鼠體重具有一定控制作用。而臨床試驗(yàn)中，HLP患者藥物治療前后，BMI指數(shù)變化無(wú)明顯差異