2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  研究1mM布比卡因與1mM左旋布比卡因培養(yǎng)24-48小時后人大腸腺癌細(xì)胞系Caco-2的各項腫瘤細(xì)胞活性指標(biāo)以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路標(biāo)志蛋白的表達水平,包括:癌細(xì)胞遷移能力,核蛋白Ki67,膜聯(lián)蛋白V(Annexin V)和碘化丙啶(PI),78kDa葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白(Grp78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)。
  方法:
  本實驗于體外培養(yǎng)人大腸腺癌細(xì)胞株Caco-2并將細(xì)胞隨機分為四組:空白組(N組);載

2、體對照組(V組)-1mM DPBS液;布比卡因組(B組)-1mM鹽酸布比卡因;左旋布比卡因組(L組)-1mM鹽酸左旋布比卡因。各組在相同條件下培養(yǎng)24小時后(劃痕實驗取24小時與48小時兩個時間點),使用細(xì)胞劃痕實驗以檢測癌細(xì)胞的遷移能力;使用免疫熒光技術(shù)計算Ki67陽性率比較組間細(xì)胞周期情況;使用流式細(xì)胞術(shù)檢測膜聯(lián)蛋白V和碘化丙啶的表達情況以研究大腸癌細(xì)胞的凋亡水平;使用蛋白免疫印跡法和免疫熒光實檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路標(biāo)志蛋白Grp78和

3、CHOP的表達水平與核聚集現(xiàn)象。
  結(jié)果:
  在連續(xù)48小時體外培養(yǎng)過程中,布比卡因組(p<0.01)與左旋布比卡因組(p<0.001)的大腸癌細(xì)胞遷移速度顯著慢于空白組與載體對照組;在24小時培育后,B組與 L組的癌細(xì)胞胞核中Ki67的陽性率(B組為54.93±7.64,L組為57.23±8.04)顯著低于N組(92.33±6.74)和V組(98.66±1.17)(p<0.01);通過流式細(xì)胞術(shù)測得24小時培育后,布比

4、卡因與左旋布比卡因處理并未引起大腸癌細(xì)胞的顯著凋亡;通過Western Blot和免疫熒光技術(shù)測得相比N組和V組,Grp78在B組和L組中表達明顯降低(p<0.05),而CHOP在B組和L組中表達明顯增高(p<0.05),同時CHOP在熒光圖中呈現(xiàn)顯著的核聚集現(xiàn)象。
  結(jié)論:
  在體外培養(yǎng)的條件下,1mM布比卡因或左旋布比卡因24-48小時的處理可使人大腸腺癌細(xì)胞的遷移能力與增殖能力受到同等水平的顯著抑制但不能誘發(fā)凋亡,

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