基于LIF因子探討鹿茸多肽對骨髓間充質(zhì)干細胞作用的實驗研究.pdf

1、目的:本文通過分子生物實驗技術(shù)，將LIF因子轉(zhuǎn)染于骨髓間充質(zhì)干細胞，探討鹿茸多肽(Pilose antler polypeptides，PAP)對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(bone mesenchymal stemcells，BMSCs)增殖、分化及抗氧化方面的影響并對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞進行提取、培養(yǎng)及鑒定，觀察LIF因子對骨髓間充質(zhì)干細胞的作用影響，從而為鹿茸多肽及骨髓間充質(zhì)干細胞更好的應(yīng)用于脊髓損傷提供了理論依據(jù)。
　　方法:將

2、大鼠進行手術(shù)造模，分離骨髓間充質(zhì)干細胞，對BMSCs進行培養(yǎng)及鑒定，通過實驗，我們在光學(xué)顯微鏡觀察了分離后BMSCs的細胞形態(tài)，將BMSCs進行傳代培養(yǎng)，繪制BMSCs生長曲線，利用BMSCs的表面抗原標(biāo)記物(CD34，CD44，CD90)對其鑒定，結(jié)果證實實驗分離得到細胞為大鼠BMSCs。按照試劑盒說明書，將LIF基因轉(zhuǎn)染于大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞，獲得了穩(wěn)定轉(zhuǎn)染表達LIF的BMSCs，通過MTT比色，檢測SOD、MDA活性，細胞信號通路

3、檢測及免疫組化檢測，觀察鹿茸多肽對骨髓間充質(zhì)干細胞的作用影響。
　　結(jié)果:本實驗成功分離、培養(yǎng)并鑒定了大鼠BMSCs;研究發(fā)現(xiàn)，鹿茸多肽可以提高細胞活力，但是轉(zhuǎn)染LIF基因后，細胞活力顯著降低，鹿茸多肽也無法升高其細胞活力，說明鹿茸多肽促進骨髓間充質(zhì)干細胞活力的影響可能是通過LIF基因發(fā)揮作用了;鹿茸多肽通過對SOD、MDA的調(diào)節(jié)，實現(xiàn)其對細胞的抗氧化作用，且這些作用可能是通過LIF基因?qū)崿F(xiàn)的;鹿茸多肽可以促進大鼠BMSCs的增殖

4、、分化，轉(zhuǎn)染LIF基因后的骨髓間充質(zhì)干細胞加入鹿茸多肽后，未影響骨髓間充質(zhì)干細胞的增殖、分化。
　　結(jié)論:①鹿茸多肽可以提高骨髓間充質(zhì)干細胞的細胞活力。
　?、诼谷锥嚯目梢蕴岣吖撬栝g充質(zhì)干細胞的抗氧化應(yīng)激活性。
　?、勐谷锥嚯目梢蕴岣呤构撬栝g充質(zhì)干細胞的抗炎活性。
　?、軐IF因子轉(zhuǎn)染于骨髓間充質(zhì)干細胞，鹿茸多肽未影響骨髓間充質(zhì)干細胞的增殖、分化，所以考慮可以將轉(zhuǎn)染LIF因子的骨髓間充質(zhì)干細胞作為細胞移植的載體