基于LIF因子探討鹿茸多肽對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:本文通過分子生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)，將LIF因子轉(zhuǎn)染于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，探討鹿茸多肽(Pilose antler polypeptides，PAP)對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone mesenchymal stemcells，BMSCs)增殖、分化及抗氧化方面的影響并對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行提取、培養(yǎng)及鑒定，觀察LIF因子對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的作用影響，從而為鹿茸多肽及骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞更好的應(yīng)用于脊髓損傷提供了理論依據(jù)。
　　方法:將

2、大鼠進(jìn)行手術(shù)造模，分離骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，對(duì)BMSCs進(jìn)行培養(yǎng)及鑒定，通過實(shí)驗(yàn)，我們?cè)诠鈱W(xué)顯微鏡觀察了分離后BMSCs的細(xì)胞形態(tài)，將BMSCs進(jìn)行傳代培養(yǎng)，繪制BMSCs生長曲線，利用BMSCs的表面抗原標(biāo)記物(CD34，CD44，CD90)對(duì)其鑒定，結(jié)果證實(shí)實(shí)驗(yàn)分離得到細(xì)胞為大鼠BMSCs。按照試劑盒說明書，將LIF基因轉(zhuǎn)染于大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，獲得了穩(wěn)定轉(zhuǎn)染表達(dá)LIF的BMSCs，通過MTT比色，檢測(cè)SOD、MDA活性，細(xì)胞信號(hào)通路

3、檢測(cè)及免疫組化檢測(cè)，觀察鹿茸多肽對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的作用影響。
　　結(jié)果:本實(shí)驗(yàn)成功分離、培養(yǎng)并鑒定了大鼠BMSCs;研究發(fā)現(xiàn)，鹿茸多肽可以提高細(xì)胞活力，但是轉(zhuǎn)染LIF基因后，細(xì)胞活力顯著降低，鹿茸多肽也無法升高其細(xì)胞活力，說明鹿茸多肽促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞活力的影響可能是通過LIF基因發(fā)揮作用了;鹿茸多肽通過對(duì)SOD、MDA的調(diào)節(jié)，實(shí)現(xiàn)其對(duì)細(xì)胞的抗氧化作用，且這些作用可能是通過LIF基因?qū)崿F(xiàn)的;鹿茸多肽可以促進(jìn)大鼠BMSCs的增殖

4、、分化，轉(zhuǎn)染LIF基因后的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞加入鹿茸多肽后，未影響骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖、分化。
　　結(jié)論:①鹿茸多肽可以提高骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞活力。
　　②鹿茸多肽可以提高骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的抗氧化應(yīng)激活性。
　?、勐谷锥嚯目梢蕴岣呤构撬栝g充質(zhì)干細(xì)胞的抗炎活性。
　?、軐IF因子轉(zhuǎn)染于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，鹿茸多肽未影響骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖、分化，所以考慮可以將轉(zhuǎn)染LIF因子的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作為細(xì)胞移植的載體