骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)同種異體胰島的保護(hù)作用.pdf

1、分離純化過(guò)程中的理化損傷，移植后炎癥反應(yīng)與免疫排斥等因素，導(dǎo)致胰島移植物存活率低，功能下降。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSCs)可通過(guò)分泌多種生物活性分子參與組織修復(fù)，且具有強(qiáng)大的免疫抑制功能，可抑制T、B 淋巴細(xì)胞，樹突狀細(xì)胞等的分化與增殖，調(diào)節(jié)其功能。本研究目的：探討小鼠骨髓MSCs對(duì)同種異體胰島的保護(hù)作用。
　　 方法：（1）膠原酶灌注BALB/c 小鼠胰腺，37°C 水浴消化，篩網(wǎng)過(guò)濾純

2、化胰島，雙硫腙(dithizone，DTZ)染色鑒定其純度，吖啶橙(acridineorange，AO)/碘化丙啶(propidum iodide，PI)熒光染色評(píng)估其活力，葡萄糖刺激胰島素分泌試驗(yàn)檢測(cè)其功能。（2）從C57BL/6 小鼠股骨、脛骨提取骨髓細(xì)胞，通過(guò)連續(xù)貼壁培養(yǎng)、反復(fù)消化傳代純化擴(kuò)增MSCs，經(jīng)形態(tài)觀察、流式分析、定向分化對(duì)其進(jìn)行綜合鑒定。（3）將BALB/c 小鼠胰島分別用鏈脲菌素（streptozotocin，STZ

3、）、混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(mixed lymphocyte reaction，MLR)誘導(dǎo)化學(xué)、免疫損傷，與預(yù)先接種的MSCs 進(jìn)行共培養(yǎng)，五天后檢測(cè)胰島活力與功能，并與對(duì)照組進(jìn)行比較。
　　 結(jié)果：
　　 與小鼠骨髓MSCs 共培養(yǎng)的胰島較對(duì)照組胰島具有更高的胰島素分泌功能；AO/PI染色顯示，STZ 或MLR 處理的胰島中有大量紅染的死細(xì)胞，與骨髓MSCs 共同培養(yǎng)的胰島中紅染死細(xì)胞明顯減少。
　　 結(jié)論：小鼠骨