海螵蛸對(duì)胃粘膜損傷保護(hù)及其凝血、止血功效研究.pdf

1、海螵蛸，又名烏賊骨，為傳統(tǒng)中藥材，具有抗胃潰瘍、凝血、止血、成骨等生物活性。但是，在烏賊的加工過(guò)程中，海螵蛸通常被丟棄，造成資源浪費(fèi)。如果能根據(jù)海螵蛸自身生物活性開(kāi)發(fā)成新型藥物或保健食品，不僅能變廢為寶，而且更能產(chǎn)生良好的經(jīng)濟(jì)效益。本試驗(yàn)以海螵蛸為主要原料，采用先進(jìn)的分析手段對(duì)海螵蛸的結(jié)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)，驗(yàn)證海螵蛸胃粘膜損傷保護(hù)作用、凝血、止血活性，并研制出治療胃潰瘍的片劑。主要研究?jī)?nèi)容如下：
　　1、海螵蛸物質(zhì)結(jié)構(gòu)及其主要成分的分析研

2、究。采用環(huán)境掃描電鏡、紅外光譜、X射線衍射、電感耦合等離子體質(zhì)譜4種手段對(duì)海螵蛸的結(jié)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)并分析，初步探究其結(jié)構(gòu)與部分生物活性的關(guān)系。經(jīng)電鏡掃描發(fā)現(xiàn)，海螵蛸腹面疏松層整體呈房架結(jié)構(gòu)，由疏松多孔的壁龕樣的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)形成。而粉碎后的海螵蛸，其網(wǎng)格結(jié)構(gòu)完全被破壞。但是，經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)：粉碎后海螵蛸粉末仍具有保護(hù)胃粘膜損傷、凝血、止血的活性，這說(shuō)明此網(wǎng)格結(jié)構(gòu)與其凝血、止血、保護(hù)胃粘膜損傷活性關(guān)系不大。由紅外掃描和X射線衍射分析可知：海螵蛸含有

3、文石結(jié)構(gòu)的碳酸鈣，完整海螵蛸與其腹層相比化學(xué)成分基本相同，但文石含量不同。此外，通過(guò)電感耦合等離子體質(zhì)譜檢測(cè)，海螵蛸含70種無(wú)機(jī)元素，其中含大量的Ca，少量的Na、Sr、Fe、P、K、Mg，微量的Si、Zn、Cu、Al、Br、Ba、B、Mn、Ni等。
　　2、海螵蛸對(duì)乙醇誘導(dǎo)的急性胃粘膜損傷的保護(hù)作用研究。在Wistar大鼠體內(nèi)營(yíng)造乙醇誘導(dǎo)的急性胃粘膜損傷模型，以不同劑量的海螵蛸對(duì)模型Wistar大鼠進(jìn)行灌胃給藥，測(cè)定胃粘膜的損傷

4、面積、損傷指數(shù)、損傷抑制率、胃液體積、酸度、MDA、GSH、T-SOD、PEG2、MPO等指標(biāo)，比較各組對(duì)乙醇誘導(dǎo)的急性胃粘膜損傷的保護(hù)效果。結(jié)果顯示：海螵蛸具有保護(hù)乙醇誘導(dǎo)的胃粘膜損傷的作用。其作用機(jī)制可能是：海螵蛸中的鈣與胃酸產(chǎn)生中和作用，提高胃液pH值，減輕其對(duì)胃粘膜侵蝕作用。同時(shí)，可調(diào)節(jié)胃粘膜組織中NO含量，加強(qiáng)胃粘膜的屏障功能；促進(jìn)胃液、胃組織、血清中PGE2的合成，增強(qiáng)黏膜組織的抵抗能力，加速潰瘍的愈合。此外，提高SOD的活

5、力，清除氧自由基和減輕脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，降低胃組織和血清中MDA的含量，減輕對(duì)胃粘膜細(xì)胞的損傷，不同程度的降低胃組織中MPO的活性，參與調(diào)節(jié)胃粘膜損傷的炎癥反應(yīng)，可能是其保護(hù)胃粘膜的另一機(jī)制。
　　3、海螵蛸凝血作用效果研究。通過(guò)分析海螵蛸懸浮液對(duì)不同實(shí)驗(yàn)組小鼠出血時(shí)間和凝血時(shí)間的影響，驗(yàn)證其凝血效果，并對(duì)可能的凝血機(jī)制進(jìn)行探討，為新型海螵蛸藥物的開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。結(jié)果表明，在250 g/L劑量下，海螵蛸的出血時(shí)間和凝血時(shí)間分別比生

6、理鹽水對(duì)照組縮短11.45 min和1.38 min。海螵蛸各劑量組均能明顯縮短小鼠的出血時(shí)間和凝血時(shí)間，且不同程度脫鈣后的海螵蛸固形物組的出血時(shí)間和凝血時(shí)間與生理鹽水對(duì)照組相比均差異極顯著。這表明，不論海螵蛸中鈣含量多寡，均具有凝血活性，且未脫鈣海螵蛸的凝血效果最好，對(duì)劑量也有一定的依賴性。而單純的碳酸鈣卻不具有凝血活性。海螵蛸能明顯縮短凝血時(shí)間，提示海螵蛸凝血活性可能與各種凝血因子的含量及它們的功能有關(guān)。海螵蛸能明顯縮短出血時(shí)間，這

7、提示海螵蛸可能與血小板數(shù)胃粘膜損傷量、血小板的功能、毛細(xì)血管功能、組織因子數(shù)量及組織收縮力等有關(guān)。
　　4、海螵蛸體外止血效果研究。通過(guò)小鼠試驗(yàn)，比較海螵蛸與其他常見(jiàn)的止血材料的止血性能。以豚鼠模型，評(píng)價(jià)海螵蛸粉末對(duì)豚鼠背部健康皮膚和破損皮膚產(chǎn)生刺激的反應(yīng)，探究其致敏性。通過(guò)小鼠股動(dòng)脈橫切面止血試驗(yàn)，證實(shí)了超微粉碎海螵蛸止血時(shí)間最短為（1.21±0.11）min，止血速度短于云南白藥和淀粉，止血效果理想。經(jīng)豚鼠背部健康皮膚和破損皮