三葉木通化學成分及生物活性研究.pdf

1、三葉木通Akebia trifoliate(Thunb.)Koidz為木通科木通屬藤本植物，是2015版《中國藥典》收載品種木通的基源植物之一，干燥藤莖入藥，具有利尿通淋、通經(jīng)下乳、清心除煩、抗氧化防衰老等功效。臨床上以其良好的利尿作用，廣泛的用于治療淋癥、心煩尿赤、水腫、濕熱痹痛等。然而其發(fā)揮利尿作用的活性部位及成分尚不明確。本課題以天然產(chǎn)物化學結(jié)合藥理實驗的方法，擬尋找三葉木通的利尿活性部位及成分，同時對其抗氧化成分進行了研究。

2、r>　　三葉木通藥材粗粉（4.9kg），以95％乙醇常溫浸提6次，每次浸泡48小時，合并提取液，減壓濃縮得到提取物浸膏280.6g。將浸膏懸浮于水中依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進行萃取，減壓回收溶劑。得到石油醚萃取物36.8g(13.1%)，乙酸乙酯萃取物29.7g(10.6%)，正丁醇萃取物137.7g(49.1%)，以及剩余水溶性部分70.6g(25.2%)。
　　采用大鼠代謝籠法對三葉木通藤莖提取物的石油醚、乙酸乙酯、正丁

3、醇萃取物和剩余水溶性部分的利尿活性進行測試。采用硅膠柱色譜及凝膠柱色譜等方法，對利尿作用顯著的正丁醇部位（P<0.01）進行分離純化，共得到8個化合物。通過NMR、HRMS等方法，結(jié)合文獻數(shù)據(jù)鑒定化合物結(jié)構(gòu)，分別為常春藤皂苷元（1）、丁香酸-4-O-α-L-鼠李吡喃糖苷（2）、β-谷甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷（3）、香草酸葡萄糖苷（4）、丁香酸葡萄糖苷（5）、甘露醇（6）、常春藤皂苷元-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷（7）、肌醇（8

4、）。其中化合物2、4、5為首次從木通屬植物中分離得到。實驗進一步對所分離得到的各化合物進行利尿活性測試，結(jié)果表明：與生理鹽水對照組相比，甘露醇（P<0.05）、常春藤皂苷元-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷（P<0.05）及常春藤皂苷元（P<0.05）的利尿活性顯著。
　　采用DPPH自由基清除法，首次對三葉木通乙醇提取物的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取物以及水溶性部分進行抗氧化活性篩選。采用多種色譜技術(shù)，對抗氧化活性較強的乙酸乙酯萃

5、取物進行化合物分離，共得到9個化合物。根據(jù)各化合物的理化性質(zhì)及核磁數(shù)據(jù)等解析其結(jié)構(gòu)，分別為β-谷甾醇（9）、香草酸（10）、6,7,10-三羥基-8-十八烯酸（11）、齊墩果酸（12）、2,6-二甲氧基-1,4-苯醌（13）、三十四烷（14）、秦皮乙素（15）、咖啡酸（16）、木通苯乙醇苷B（17）。其中化合物10、13、14為首次從木通屬植物中分離得到。對各化合物的抗氧化活性進行測定，結(jié)果表明：咖啡酸（IC50=14.939μg.mL