LncRNA-CAHM和抑癌基因QKI及其編碼蛋白在胃癌中的表達及意義.pdf

1、目的:長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA，lncRNA)是一類轉(zhuǎn)錄本長度超過200nt、不編碼蛋白的RNA。近年來研究表明，lncRNA不僅參與多種生物學進程及扮演多種角色（如剪接、轉(zhuǎn)錄干擾、轉(zhuǎn)錄后調(diào)控、基因組印跡、染色質(zhì)修飾、細胞周期調(diào)控、表觀遺傳學調(diào)控、免疫監(jiān)視等），而且廣泛參與機體的生理和病理過程，與人類疾病的發(fā)生、發(fā)展和防治都有著密切聯(lián)系。異常的lncRNA表達能夠?qū)е掳[瘤在內(nèi)的多種疾病，盡管具體的機制

2、尚不清楚，但在不同的癌腫中，許多l(xiāng)ncRNA扮演著雙重角色，即致癌及抑癌。
　　DNA甲基化是一種表觀遺傳修飾。其模式改變，尤其是某些抑癌基因局部甲基化水平的異常增加，在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中起到了不容忽視的作用。有研究報道，CAHM基因在結(jié)直腸癌中出現(xiàn)頻繁過甲基化且其表達通常下調(diào)。抑癌基因QKI與CAHM基因毗鄰且位于下游，在結(jié)直腸癌中低表達。近年來對QKI的研究發(fā)現(xiàn)，QKI可以通過調(diào)節(jié)細胞周期，促進細胞分化等多方面抑制腫瘤細胞

3、的惡性表型。抑癌基因QKI在胃癌中的研究較少，其編碼蛋白可以抑制胃癌的發(fā)生和發(fā)展。迄今，CAHM參與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的機制仍不十分明確，在胃癌中的研究尚未見報道，與QKI基因編碼蛋白的相互作用尚不清楚。
　　本研究擬觀察lncRNA-CAHM和抑癌基因QKI及其編碼蛋白在胃癌中的表達，評價二者之間的關聯(lián)性及其與胃癌臨床病理因素的關系。檢測CAHM基因在胃癌組織中的甲基化水平，探討CAHM與QKI基因之間可能的作用機制。
　　方

4、法:1.采用Real-Time PCR法評估人胃癌組織中l(wèi)ncRNA CAHM、QKI mRNA表達情況。2.采用Western blot方法檢測胃癌及其配對非癌胃粘膜組織中QKI基因編碼蛋白的表達情況。3.采用甲基化特異性PCR法檢測CAHM基因的甲基化狀態(tài)。4.本研究所獲得的數(shù)據(jù)均使用SPSS19.0軟件分析，計數(shù)資料采用行×列表的x2檢驗或Fisher精確檢驗，相關系數(shù)用Pearson系數(shù)。檢驗水平α=0.05。
　　結(jié)果:

5、1.qRT-PCR結(jié)果顯示，與配對非癌胃粘膜組織相比，lncRNA CAHM在胃癌組織中的表達顯著下調(diào)，lncRNA CAHM表達與胃癌胃壁內(nèi)浸潤深度密切相關，P＜0.001;QKI mRNA在胃癌組織中的表達顯著下調(diào)，且與胃癌大體分型(Borrmann分型)密切相關，P＜0.001。Pearson相關性分析結(jié)果顯示，胃癌中l(wèi)ncRNA CAHM和QKI mRNA表達呈正相關(r=0.277，P＜0.001)。2.Western Blo

6、t檢測結(jié)果顯示，在胃癌組織中QKI基因編碼蛋白表達顯著下調(diào)(P＜0.001)。3.甲基化特異性PCR檢測結(jié)果顯示，在胃癌組織中CAHM基因呈高甲基化狀態(tài)。
　　結(jié)論:1.人胃癌組織中l(wèi)ncRNA CAHM與抑癌基因QKI mRNA表達顯著低于配對非癌胃粘膜組織，LncRNA CAHM表達與胃癌胃壁內(nèi)浸潤深度密切相關;QKImRNA表達與胃癌大體分型（Borrmann分型）密切相關，提示CAHM及QKI可能在胃癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要