水楊酸鈉壓抑小鼠內(nèi)膝體神經(jīng)元去極化反跳的藥理學(xué)特征.pdf

1、目的：水楊酸鈉是退熱、鎮(zhèn)痛、抗風(fēng)濕類藥物阿司匹林在體內(nèi)代謝后的主要活性成分。高劑量的水楊酸鈉能夠在人和動(dòng)物體內(nèi)可逆地誘導(dǎo)出耳鳴，因此常被用來制作動(dòng)物耳鳴。已有的研究結(jié)果表明，在水楊酸鈉誘導(dǎo)的耳鳴動(dòng)物模型中，聽覺通路中多個(gè)腦區(qū)的神經(jīng)活動(dòng)水平顯著地提高了，其中就包括了對(duì)聽覺信號(hào)加工和傳遞起著重要門控作用的神經(jīng)核團(tuán)內(nèi)膝體。內(nèi)膝體神經(jīng)元的一個(gè)非常重要的特性是去極化反跳，它夠調(diào)控聽覺信息加工與傳遞的門控作用。本論文旨在探究不同濃度水楊酸鈉對(duì)內(nèi)膝體

2、神經(jīng)元去極化反跳的藥理學(xué)特征，以理解水楊酸鈉誘導(dǎo)耳嗚的神經(jīng)機(jī)制。
　　方法:在本研究中，通過離體腦片和全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄VGAT-ChR2-EYFP轉(zhuǎn)基因成年小鼠內(nèi)膝體神經(jīng)元的去極化反跳反應(yīng)。該轉(zhuǎn)基因小鼠全腦的GABA能神經(jīng)元上表達(dá)ChR2光敏感通道蛋白。實(shí)驗(yàn)中通過細(xì)胞形態(tài)，電生理學(xué)特征和光遺傳技術(shù)鑒別內(nèi)膝體上的錐體神經(jīng)元和GABA能神經(jīng)元。主要記錄內(nèi)容包括了不同濃度的水楊酸鈉對(duì)內(nèi)膝體神經(jīng)元靜息膜電位、膜輸入阻抗、去極化反跳的潛

3、伏期、幅度和面積的影響。
　　結(jié)果:在成年的VGAT-ChR2-EYFP轉(zhuǎn)基因小鼠內(nèi)膝體腦片上，(1)錐體神經(jīng)元和GABA能神經(jīng)元可通過兩者不同的形態(tài)特征、電生理學(xué)特性及光遺傳技術(shù)來鑒別。(2)1.4mM，0.8mM，0.5mM，0.3mM水楊酸鈉均能可逆地超極化內(nèi)膝體神經(jīng)元靜息膜電位，但只有1.4mM的水楊酸鈉顯著地并可逆地降低了神經(jīng)元的膜輸入阻抗，壓抑了去極化反跳的產(chǎn)生，其他三個(gè)濃度對(duì)神經(jīng)元的膜輸入阻抗沒有影響，且不能壓抑去極

4、化反跳的產(chǎn)生。(3)0.8mM，0.5mM，0.3mM的水楊酸鈉在部分超極化電流刺激下能減小去極化反跳的潛伏期，幅度和面積。(4)在1.4mM水楊酸鈉溶液中加入GABAB受體的阻斷劑CGP55845，可以阻斷水楊酸鈉對(duì)成年小鼠去極化反跳的壓抑作用。(5)通過加入GABAB受體的激動(dòng)劑Baclofen，0.3mM水楊酸鈉可以壓抑去極化反跳的產(chǎn)生。(6)加入內(nèi)向整流鉀通道的阻斷劑Tertinpin-Q后，1.4mM水楊酸鈉和Baclofen

5、仍能壓抑去極化產(chǎn)生。
　　結(jié)論:在本研究中，不同濃度的水楊酸鈉均能超極化內(nèi)膝體神經(jīng)元的靜息膜電位，而且超極化程度與水楊酸鈉濃度成正比。1.4mM的水楊酸鈉能可逆地壓抑去極化反跳的產(chǎn)生，雖然低濃度的水楊酸鈉沒有壓抑去極化反跳的產(chǎn)生，但改變了去極化反跳的相關(guān)特性，提示我們不同濃度的水楊酸鈉可能對(duì)聽覺腦區(qū)加工聽覺信息的影響也是不同的。本研究表明1.4mM水楊酸鈉壓抑內(nèi)膝體神經(jīng)元的去極化反跳的過程中有GABAB受體的參與。但GABAB激活