3-羥基苯甲醛抑制兔自體移植靜脈橋內膜增生的研究.pdf

1、研究背景及目的：心血管疾病是最常見的疾病病種，冠心病是心血管疾病重要的組成部分，也是心血管疾病中最常見的死因。對于嚴重的冠心病，冠狀動脈旁路移植術是其主要的治療方法。外科手術常用的取材有兩種:左乳內動脈和大隱靜脈。相較于乳內動脈血管橋的較好的遠期通暢率，大隱靜脈血管橋遠期通暢率不容樂觀。3-羥基苯甲醛（3-HBA）是一種原兒茶醛的前體，有研究表明原兒茶醛類物質有心血管保護作用。但并無3-HBA對靜脈橋作用的研究。本實驗通過研究3-HBA

2、對人大隱靜脈血管平滑肌細胞及兔自體移植靜脈橋內膜增生的影響，以其尋找一種新的能夠防治冠狀動脈旁路移植術后靜脈橋狹窄的藥物。
　　研究方法：1.人大隱靜脈平滑肌細胞進行體外培養(yǎng)，設立對照組，以及藥物梯度組(25，50，100μmol/L)，作用人大隱靜脈平滑肌細胞24h后，用MTT法檢測細胞增殖情況，Transwell小室法檢測細胞遷移情況，流式細胞儀（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）檢測細胞凋亡情況，Western Blot

3、檢測p-AKT蛋白表達情況。2.選取24只健康的實驗用新西蘭兔，不限雌雄，體重在2000g-2500g之間，編號，計算機隨機法分成實驗組A組和對照組B組，每組再均分為兩個亞組，即A1、A2組和B1、B2組，每個亞組6只兔子，建立同側頸外靜脈移植到頸總動脈的實驗動物模型，A組動物從耳緣靜脈注射3-HBA100mg/(kg·d)，B組動物給予同劑量生理鹽水以作對照。給藥時間一直持續(xù)至取材前一天。A1、B1組動物于模型建立后的第2周采集移植靜

4、脈橋，A2、B2組動物于模型建立后4周采集移植靜脈橋，計算機圖形軟件計算靜脈橋內膜厚度，并用蛋白印記法（Western Blot）對各組移植靜脈橋中AKT蛋白的磷酸化情況進行檢測。
　　結果：1.藥物干預人大隱靜脈平滑肌細胞24h后，相比于對照組，實驗組細胞增殖與遷移能力均受到明顯抑制，并呈現(xiàn)一定的劑量依賴性，流式細胞儀凋亡檢測發(fā)現(xiàn)其中晚期凋亡細胞比例明顯增加，Western blot實驗發(fā)現(xiàn)p-AKT表達明顯減少，p＜0.05，

5、差異均有統(tǒng)計學意義。2.24只兔子行搭橋模型成功，無明顯的手術切口感染。術后2周時，實驗組A1組靜脈橋內膜厚度為76.57±6.76μm，而同期對照組B1組靜脈橋內膜厚度為87.32±6.89μm，實驗組組靜脈橋內膜厚度較對照組已經稍有減小，p=0.123，差異無統(tǒng)計學意義;到4周時，實驗組A2內膜厚度為45.39±9.41μm，對照組B2組內膜厚度為134.07±18.80μm，p＜0.05，差異具有統(tǒng)計學意義。無論2周或者4周時，p