胱抑素C對(duì)急性缺血性卒中的影響及對(duì)小鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、第一部分胱抑素C對(duì)急性缺血性卒中的影響
　　目的：觀察急性缺血性卒中（acute ischemic stroke，AIS）患者血清胱抑素C(cyststin C, CysC)水平的變化，探討血清CysC在AIS發(fā)病中的作用。
　　方法：收集自2012年11月至2014年12月在蘇州大學(xué)附屬第二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的AIS患者601例作為病例組，選擇同期住院的非AIS患者325例作為對(duì)照組，比較病例組與對(duì)照組的基本臨床資料。運(yùn)用l

2、ogistic回歸分析法研究血清CysC對(duì)AIS發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的影響；將病例組及對(duì)照組共926例患者按照血清CysC水平的區(qū)間范圍分為5個(gè)亞組，比較不同亞組血清CysC對(duì)AIS發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的影響；對(duì)AIS患者進(jìn)行美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表（National Institute of Health stroke scale, NIHSS）評(píng)分，運(yùn)用斯皮爾曼等級(jí)相關(guān)法分析血清CysC與NIHSS評(píng)分的相關(guān)性；根據(jù)發(fā)病部位將AIS患者分為前循環(huán)組、后循

3、環(huán)組及混合組，比較血清CysC與AIS發(fā)病部位的相關(guān)性。觀察103例AIS患者治療1周后的血清CysC水平，比較治療前后血清CysC水平的變化。
　　結(jié)果：AIS患者的血清CysC水平為1.01±0.21mg/L，對(duì)照組的血清CysC水平為0.95±0.18mg/L，AIS患者的血清CysC水平顯著高于對(duì)照組，兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-4.581,P<0.001)。logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，在調(diào)整年齡、性別、高血壓、糖

4、尿病、肌酐、尿素、尿酸、甘油三脂、高密度脂蛋白（high density lipoprotein, HDL）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein, LDL）、C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein, CRP)等因素后，升高的血清CysC(OR9.80,95％CI3.12,30.83, P<0.001)是AIS發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。所有研究對(duì)象以血清CysC水平劃分成五個(gè)亞組，與第一個(gè)亞組相比，第二亞組(

5、OR1.07,95%CI0.66-1.74, P>0.05)、第三亞組(OR1.09,95%CI0.67-1.78, P>0.05) AIS的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無(wú)明顯升高，第四亞組(OR1.92,95%CI1.08-3.40, P=0.026)、第五亞組(OR2.88,95%CI1.49-5.54, P=0.002) AIS的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)明顯升高，且第五亞組的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著高于第四亞組。故異常升高的血清CysC是AIS發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，且隨血清Cys

6、C水平升高，AIS的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增大。在AIS患者中，血清CysC與NIHSS評(píng)分無(wú)明顯相關(guān)(P>0.05)，與梗死部位無(wú)明顯相關(guān)(P>0.05)。與入院時(shí)的血清CysC相比(1.05±0.19 mg/L)，AIS患者通過(guò)1周治療后血清CysC水平顯著下降(0.99±0.18 mg/L)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。
　　結(jié)論：AIS患者的血清CysC水平在急性期（3d）明顯升高，經(jīng)過(guò)1周治療后顯著下降。升高的血清CysC成為

7、AIS發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，且血清CysC超過(guò)正常值上限后，AIS的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)與血清CysC水平呈正相關(guān)。
　　第二部分胱抑素C對(duì)小鼠腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)保護(hù)作用
　　目的：觀察小鼠腦缺血再灌注損傷后內(nèi)源性胱抑素C(Cystatin C，CysC)的變化情況；觀察外源性CysC干預(yù)對(duì)小鼠腦缺血再灌注損傷是否具有神經(jīng)保護(hù)作用。
　　方法：將雄性ICR小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)(sham)組、I/R（tMCAO）組和I/R+CysC

8、組，建立小鼠短暫性大腦中動(dòng)脈阻塞(transient middle cerebral artery occlusion，tMCAO)模型，取缺血損傷側(cè)腦組織作為標(biāo)本，采用Western blot法測(cè)定缺血再灌注48h內(nèi)腦組織中CysC的含量變化；采用免疫組化法比較假手術(shù)組和I/R組小鼠腦皮質(zhì)中CysC的表達(dá)量。在缺血前30min側(cè)腦室注射CysC，觀察CysC(不同給藥劑量)對(duì)tMCAO小鼠腦梗死體積及神經(jīng)行為功能的影響。
　　結(jié)

9、果：CysC含量在腦缺血再灌注損傷后6h顯著升高，在24h達(dá)到頂峰，在48h呈下降趨勢(shì)。與I/R組相比，CysC提前干預(yù)的tMCAO小鼠的腦梗死體積顯著減小，神經(jīng)行為功能明顯改善（P<0.05）。通過(guò)對(duì)小鼠缺血再灌注損傷前30min側(cè)腦室分別注射不同劑量CysC(25ng、50ng、100ng、200ng)，腦梗死體積在注射50ng時(shí)開(kāi)始減小(P<0.05)，在注射100ng、200ng時(shí)減小更明顯（P<0.05）。說(shuō)明在一定濃度范圍內(nèi)