microRNa-92b與高血壓心肌肥厚的相關性及機制研究.pdf

1、第一章社區(qū)人群高血壓左室肥厚的患病率及危險因素分析
　　背景和目的:
　　左室肥厚是最為常見的高血壓靶器官損害。左室肥厚是心肌梗死、猝死、卒中、充血性心力衰竭及心血管疾病總死亡率的強預測因子。左室肥厚的亞型分類影響心血管預后。
　　本文采用最新的左室肥厚分類定義，對社區(qū)高血壓患者規(guī)范化管理網(wǎng)絡管理的有效數(shù)據(jù)進行回顧性分析，旨在分析東莞寮步社區(qū)高血壓人群左室肥厚及各亞型的患病率及其危險因素。
　　方法:
　　

2、本回顧性分析對2290例未合并其他心血管疾病、心臟瓣膜病和射血分數(shù)≥50％的高血壓患者的一般資料、實驗室檢查及心臟超聲指標進行分析。并根據(jù)最新的左室?guī)缀螛?gòu)型分類系統(tǒng)，分析左室肥厚各亞型的危險因素。
　　結(jié)果:
　　共檢出左室肥厚555人(24.2％)，向心型左室肥厚為最常見的左室肥厚亞型，其患病率為14.8％。多元logistic回歸分析結(jié)果顯示，左室肥厚的危險因素為收縮壓、年齡，其保護因素為男性。在調(diào)整年齡、性別、體重指數(shù)

3、(BMI)、高血壓病史和飲酒史后，逐步回歸分析表明，與離心型左室肥厚（離心非擴張型左室肥厚及離心擴張型左室肥厚）相比，向心型左室肥厚的相關危險因素更多。年齡、頸圍(NC)、收縮壓(SBP)、高尿酸血癥和飲酒與向心型左室肥厚呈正相關，而BMI和男性與向心型左室肥厚呈負相關。飲酒是向心型左室肥厚最強的危險因素。年齡和腹型肥胖與離心非擴張型左室肥厚呈正相關，而男性與離心非擴張型左室肥厚呈負相關。腹型肥胖是離心非擴張型左室肥厚最強的危險因素。

4、SBP和年齡與離心擴張型左室肥厚呈正相關，而男性與離心擴張型左室肥厚呈負相關。年齡是離心擴張型左室肥厚最強的危險因素。
　　結(jié)論:
　　本研究高血壓人群左室肥厚患病率為24.2％，收縮壓水平、年齡及女性是左室肥厚的危險因素。向心型左室肥厚是檢出率最高的左室肥厚亞型，其合并的相關危險因素更多。
　　第二章循環(huán)miRNA-92b、miRNA-155與高血壓左室肥厚的相關性研究
　　背景與目的:
　　microR

5、NAs是一類長約22個核苷酸的單鏈、內(nèi)源性的非編碼小分子RNA，主要在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因的表達。已有大量研究證實，miRNAs不僅在心血管發(fā)育過程中發(fā)揮重要作用，而且與心肌肥大、心肌纖維化、心臟重構(gòu)、心力衰竭及心肌梗死等心血管疾病的發(fā)生密切相關。由于miRNAs在循環(huán)中的穩(wěn)定性，循環(huán)miRNAs已被證實為多種心血管疾病的生物標志物。本研究選采用qRT-PCR方法驗證循環(huán)miR-155、miR-92b、miR-133b水平與高血壓左室肥厚

6、的相關性。
　　方法:
　　從社區(qū)高血壓患者數(shù)據(jù)庫中隨機選取資料完整的高血壓左室肥厚、高血壓非左室肥厚各40例，同時從社區(qū)中選取年齡、性別相匹配的正常健康人群為正常對照組40例，收集患者外周血標本。用試劑盒提取血漿中總RNA，以RNA為模板反轉(zhuǎn)錄cDNA，隨后使用miRNA熒光定量檢測試劑盒分別檢測循環(huán)miR-155、miR-92b、miR-133b表達水平，選用U6為內(nèi)參，采用△Ct值法分別計算miR-155、miR-92

7、b、miR-133b相對表達水平，使用Spearman相關、Logistic回歸及ROC曲線對miRs相對表達水平進行分析。
　　結(jié)果:
　　與正常健康人群相比，高血壓合左室肥厚人群的miR-155、miR-133b表達上調(diào)，miR-92b表達下調(diào)，miR-155、miR-92b的表達水平與左室質(zhì)量指數(shù)及診室收縮壓水平的顯著相關。 miR-155與左室質(zhì)量指數(shù)正相關，可能具有潛在的促心肌肥大作用，miR-92b與左室質(zhì)量指數(shù)

8、負相關，可能具有潛在的抗心肌肥大作用。
　　結(jié)論:
　　我們的研究結(jié)果表明， miR-155、miR-92b可能參與是高血壓患者血壓調(diào)節(jié)及左室肥厚的發(fā)生，可能是高血壓心肌肥厚的治療靶點。但是，其具體機制仍然需要進一步的研究證實。
　　第三章 miR-92b在血管緊張素Ⅱ誘導的心肌細胞肥大中的作用及機制研究
　　背景與目的:
　　miRs在心肌肥厚的發(fā)生、進展過程中發(fā)揮重要作用。近來有研究發(fā)現(xiàn)一些miRs在心

9、肌細胞肥大過程中表達下調(diào)，可能均有潛在的抗心肌肥厚作用。本研究組前期已驗證在高血壓左室肥厚患者循環(huán)miR-92b表達下調(diào)。本研究旨在進行體外細胞實驗驗證miR-92b在AngⅡ誘導的心肌肥大模型中的表達水平，證實其是否具有抑制心肌肥大的作用以及相關機制。
　　方法和結(jié)果:
　　在Ang-Ⅱ誘導的肥大小鼠心肌細胞中miR-92b表達水平明顯下調(diào)。在Ang-Ⅱ處理后的心肌細胞中轉(zhuǎn)染miR-92b mimic，結(jié)果顯示，過表達mi

10、R-92b使經(jīng)Ang-Ⅱ誘導后的NMVCs中ANP和β-MHC蛋白表達水平顯著下調(diào)。熒光素酶活性檢測結(jié)果顯示，GATA6是miR-92b直接作用靶基因。經(jīng)Ang-Ⅱ誘導建立的心肌細胞肥大模型中，NMVCs中ANP和β-MHC蛋白表達水平的明顯增加，GATA6mRNA及蛋白表達水平顯著上調(diào)。轉(zhuǎn)染miR-92bmimic后，GATA6 mRNA和蛋白的相對表達水平均顯著下調(diào);轉(zhuǎn)染GATA6 siRNA后，GATA6 mRNA和蛋白相對表達水

11、平也顯著下調(diào)。FITC-鬼筆環(huán)肽染色結(jié)果表明miR-92b mimic和GATA6siRNA可改善因Ang-Ⅱ處理導致的NMVCs增大。經(jīng)Ang-Ⅱ處理后的NMVCs，分別轉(zhuǎn)染miR-92b mimic和GATA6 siRNA，miR-92b mimic和GATA6 siRNA可使ANP，β-MHC和GATA6的蛋白表達水平下調(diào)。轉(zhuǎn)染NF-κB P65 siRNA敲低P65可改善NMVCs中因Ang-Ⅱ誘導的miR-92b的表達下調(diào)。N