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文檔簡介
1、目的:研究人工培育的鐵皮石斛水提取物,對鏈脲霉素(STZ)所致的高血糖小鼠血糖、血脂、機體的脂肪和肌肉組織成分比例和肝臟抗氧化能力的影響,分析對腸道菌群影響。通過多種途徑分析高血糖對機體的影響,以及鐵皮石斛水提物對機體的保護作用和可能的機制。
方法:腹腔注射 STZ,制備小鼠糖尿病模型。實驗分為鐵皮石斛水提物高、中、低劑量組、正常對照組、模型對照組、陽性藥物組。觀察實驗動物的一般情況,記錄小鼠體重,用核磁共振儀測定小鼠機體組織
2、成分比例,用血糖試紙測空腹血糖值,血清 TC、TG、HDL值按照試劑盒說明檢測,利用分光光度計測肝臟SOD含量(黃嘌呤氧化酶法)、TBA法測MDA含量,通過PCR-DGGE凝膠電泳,quantity one軟件分析小鼠腸道菌群多樣性。
結(jié)果:(1)正常對照組小鼠在整個實驗過程中,生長情況良好,沒有死亡現(xiàn)象。成模小鼠精神不振、反應(yīng)慢、不愛活動,每日喝水量增加,排尿次數(shù)明顯增加、體重明顯下降(P<0.05)、毛發(fā)松馳無光澤、好激怒
3、、糞便變小,變黃且發(fā)干,模型對照組存活狀態(tài)最差,存活率僅為50%。石斛水提物三個劑量組和陽性藥物組小鼠的一般狀態(tài)均明顯改善,毛色和精神狀態(tài)有所恢復(fù),飲水量和尿量減少,糞便著色變深,存活率分別為80%、60%、60%、80%。模型對照組機體脂肪與肌肉的比例:正常對照組小鼠,隨體重的增加,脂肪組織明顯增加,明顯高于其他各組,脂肪組織所占比例>肌肉組織。模型對照組小鼠,隨體重的下降,脂肪組織也減少,與其他各組相比有很大差別,脂肪組織所占比例<
4、肌肉組織。石斛水提物三個劑量組及陽性藥物組,脂肪組織的變化與體重的變化一致,不論是脂肪組織的占比例還是肌肉組織所占比例均高于模型組,并且肌肉組織所占比例高于正常對照組。(2)與正常對照組比較,模型對照組血糖水平顯著上升,在建模第28d后開始下降,3個石斛水提物組血糖水平在第7d起與模型對照組比有所減少,14~28d減少更加明顯,差異有顯著性(P<0.01),這一結(jié)果與陽性藥物組的血糖的變化一致,并且各組彼此沒有顯著差異(P>0.05)。
5、(3)建模28d后,與正常對照組比較,模型對照組小鼠血清TC、TG含量明顯高于正常對照組小鼠(P<0.05),HDL低于正常對照組(P<0.05)。與模型對照組比較,石斛水提物三個劑量組和陽性藥物組的血清TC含量明顯減少(P<0.05),HDL含量明顯增加(P<0.05)。石斛低劑量組、陽性藥物組TG含量低于模型對照組(P<0.05),石斛中、高劑量組的血清TG含量高于模型對照組(P<0.05)。(4)與正常對照組比較,模型對照組小鼠肝
6、組織SOD活性顯著降低(P<0.05),MDA水平顯著上升(P<0.01)。與模型對照組比,三個劑量石斛水提物的肝組織 SOD活性均明顯升高、MDA含量均減少(P<0.05);陽性藥物組SOD活力有所增加(P<0.05),但是MDA含量高于模型對照組小鼠。(5)與正常對照組比較,陽性藥物組和模型對照組糞便中菌群條帶模糊不清,細(xì)菌表達(dá)量較低。石斛水提物中、高劑量組菌群多樣性好且表達(dá)量較高。聚類分析結(jié)果表明,石斛水提物低、中劑量組為一簇,菌
7、群相似度最高,石斛高劑量組、模型對照組,陽性藥物組和正常對照組為一簇,菌群相似度高,其中陽性藥物組與正常對照組菌群高度相似,石斛水提物治療組中以高劑量組的菌群與正常對照組最為相似。以上結(jié)果表明,鐵皮石斛水提物中、高劑量均能改善糖尿病小鼠的腸道菌群數(shù)量和多樣性,在提高菌群數(shù)量上比陽性藥物作用效果好。
結(jié)論:(1)石斛水提物能夠改善糖尿病小鼠機體的健康情況和體重急劇下降的并發(fā)癥;(2)石斛水提物對STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠有顯著的降血
8、糖功效,和陽性藥物(鹽酸二甲基雙胍)效果相差不多;(3)石斛水提物能調(diào)節(jié)STZ糖尿病小鼠機體脂肪與肌肉組織的比例,提示其可能調(diào)節(jié)了機體脂代謝,從而影響血糖水平;(4)石斛水提物能夠調(diào)節(jié)糖尿病導(dǎo)致的TC、TG升高、HDL降低,改善糖尿病小鼠的血脂混亂;(5)石斛水提物能夠通過升高糖尿病小鼠肝組織SOD活性、降低MDA水平,來增強肝臟抗氧化能力;(5)石斛水提物能夠調(diào)節(jié)糖尿病所導(dǎo)致小鼠腸道菌群失調(diào)、菌群數(shù)量減少。綜上所述,鐵皮石斛水提物通過
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