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1、上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文1型糖尿病鼠類模型的腸道菌群分析姓名:徐靈筠申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):微生物分子生態(tài)學(xué)與基因組學(xué)指導(dǎo)教師:趙立平20070101上海交通大學(xué)理學(xué)碩士學(xué)位論文 ABSTRACT 成功的鼠(低血糖)都有兩條較亮的條帶,而糖尿病小鼠則較暗。割膠回收 DNA,測序結(jié)果表明這兩種都屬于乳桿菌屬(Lactobac
2、illus) 。因此我們選用乳酸菌種群(LAB)特異性引物擴(kuò)增所有樣品,DGGE 的分析結(jié)果驗(yàn)證了低血糖組的兩條明顯的優(yōu)勢帶在高血糖組中被顯著減弱。經(jīng)測序分析,這兩條帶分別代表腸乳酸桿菌(Lactobacillus intestinalis)和羅伊氏乳酸桿菌(Lactobacillus reuteri)。最后,通過 V3 DGGE 和 LAB DGGE 圖譜的主成分分析分析,對比三組小鼠菌群的條帶變化,驗(yàn)證了這兩種乳桿菌是導(dǎo)致低血糖和高
3、血糖兩類小鼠腸道菌群差別的主要原因,而其他健康相關(guān)菌群——擬桿菌、梭菌、雙歧桿菌的群落結(jié)構(gòu)未見明顯差別。此外,在糖尿病小鼠的試驗(yàn)中,還觀察到糖尿病小鼠的雙歧桿菌數(shù)量明顯低于正常小鼠。以上結(jié)果表明糖尿病發(fā)生后,兩種與宿主健康密切相關(guān)的腸道細(xì)菌群落(雙歧桿菌和乳桿菌)分別發(fā)生了結(jié)構(gòu)上和數(shù)量上的改變。 此后,對糖尿病大鼠的腸道菌群結(jié)構(gòu)的初步分析,表明糖尿病大鼠的乳酸菌種群結(jié)構(gòu)隨時(shí)間的變化顯著與健康對照大鼠的不同,而兩者的菌群結(jié)構(gòu)在造模前時(shí)間點(diǎn)
4、上沒有明顯差異。這提示糖尿病的發(fā)生和發(fā)展是導(dǎo)致腸道菌群結(jié)構(gòu)發(fā)生變化的重要影響因素。 本研究中,腸道益生菌的結(jié)構(gòu)數(shù)量變化與血糖值的反相關(guān)對應(yīng)關(guān)系,與采用分離培養(yǎng)的腸道菌群研究所揭示的結(jié)果相類似。這表明糖尿病鼠類發(fā)生的腸道菌群失調(diào)主要表現(xiàn)為腸道益生菌的減少,因此可能會(huì)影響宿主糖尿病的發(fā)生和發(fā)展,補(bǔ)充益生菌或用藥物干預(yù)菌群結(jié)構(gòu)可能將成為預(yù)防和治療 1 型糖尿病的有效途徑。 關(guān)鍵詞: 關(guān)鍵詞:腸道菌群,1 型糖尿病,鏈脲佐菌素(STZ) ,乳桿
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